PCSK9蛋白作为与心肌缺血显著相关的血清生物标志物的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种PCSK9蛋白作为心肌缺血显著相关的血清生物标志物的应用，所述PCSK9蛋白在心肌缺血炎症状态下表达水平升高。本发明专利技术通过研究发现，血清中PCSK9水平升高是心肌缺血及其危险因素的标志，可能反映持续的炎症状态，可作为一种诊断心肌缺血的血清标志物，适用于心肌缺血疾病血清的辅助检测，发病机制研究和治疗心肌缺血的药物开发。

【技术实现步骤摘要】
PCSK9蛋白作为与心肌缺血显著相关的血清生物标志物的应用
本专利技术属于生物检测
，具体涉及一种PCSK9蛋白（Proproteinconvertasesubtilisin/kexintype9）作为与心肌缺血显著相关的血清生物标志物的应用。
技术介绍
前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin9型（proproteinconvertasesubtilisin/kexintype9，PCSK9）抑制剂是近几年来治疗高脂血症的新策略。PCSK9抑制剂通过降解LDL受体（LDLr）显著降低血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平。因此，大型临床试验建议，心血管疾病可能需要减少使用PCSK9抑制剂。体内PCSK9的最大来源是肝脏，在肾脏、脾脏和肠道也有一定程度的表达。最近，我们发现PCSK9在心肌缺血模型小鼠（结扎冠状动脉左前降支）心肌组织中的表达显著升高。其他研究表明，巨噬细胞也能够合成PCSK9，特别是在炎性环境下。巨噬细胞在缺血心肌中释放的PCSK9可能导致外周血PCSK9水平升高。我们发现，急性心肌梗死患者血浆中PCSK9表达水平升高。由于PCSK9在心肌梗死高度表达并释放于外周循环，其在慢性心肌缺血及相关条件下的血清中表达水平升高，可作为一种新的心肌缺血诊断标志物，血清检测法成本更低且高效。目前，心肌缺血的诊断方法有动态心电图（DCG）、核素心肌断层显像（ECT）、冠状动脉造影、超声心动图以及肌酸激酶、肌钙蛋白I、肌钙蛋白T或肌红蛋白的检查结果等。这些方法都存在各自的缺陷，误诊、漏诊及过度诊断、过度治疗在临床中均有不同程度存在。因此，筛选和鉴定一种高特异性、高灵敏度的心肌缺血诊断标志物已经成为心肌缺血研究中的关键点。
技术实现思路
本专利技术解决的技术问题是提供了一种PCSK9蛋白作为与心肌缺血显著相关的血清生物标志物的应用，PCSK9蛋白作为新的心肌缺血诊断标志物具有高特异性、高灵敏性，能够用于心肌缺血的早期诊断。本专利技术为解决上述技术问题采用如下技术方案，PCSK9蛋白作为与心肌缺血显著相关的血清生物标志物的应用。进一步的，所述PCSK9蛋白在心肌缺血炎症状态下表达水平升高，进而PCSK9蛋白能够作为心肌缺血的血清生物标志物用于心肌缺血炎症的早期诊断。本专利技术通过研究发现血清中PCSK9水平升高是心肌缺血及其危险因素的标志，可能反映持续的炎症状态，可作为一种诊断心肌缺血的血清标志物，适用于心肌缺血疾病血清的辅助检测，发病机制研究和治疗心肌缺血的药物开发。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术中的PCSK9蛋白是从心肌缺血患者血清中筛选得到的，PCSK9蛋白在心肌缺血患者血清中高表达，且能体现心肌缺血的相关因素性别、年龄、心肌缺血程度，具有高特异性、高灵敏性，可用于心肌缺血疾病的早期诊断。附图说明图1为PCSK9在健康对照组和慢性心肌缺血患者血清中的表达水平。图2为PCSK9在不同性别健康对照组和慢性心肌缺血患者血清中的表达水平。图3为PCSK9在不同年龄健康对照组和慢性心肌缺血患者血清中的表达水平。图4为PCSK9在不同缺血程度的慢性心肌缺血患者血清中的表达水平。具体实施方式以下通过实施例对本专利技术的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本专利技术上述内容实现的技术均属于本专利技术的范围。实施例实验方法：这项研究包括362名慢性缺血患者和305名年龄和性别相匹配的对照组。ELISA检测血清中PCSK9的表达水平。我们观察到，与对照组相比，PCSK9水平在慢性缺血患者中较高；女性PCSK9水平明显高于男性；老年人PCSK9水平明显高于年轻人；PCSK9水平与缺血持续时间呈负相关，新发病缺血患者水平最高，随着缺血状态的稳定，水平下降。这些观察表明，血清中PCSK9水平升高是心肌缺血及其危险因素的标志，可能反映持续的状态。可用PCSK9蛋白作为与心肌缺血显著相关的血清生物标志物，适用于心肌缺血病血清的辅助检测，发病机制研究和治疗心肌缺血的药物开发。研究人群：选择症状性慢性缺血患者（n=362）和年龄和性别匹配的不存在已知的慢性缺血健康对照组（n=305）。这项研究是在新乡医学院第三附属医院和河南省人民医院进行。获得伦理研究委员会批准，有患者均提供书面知情同意。这项调查符合赫尔辛基宣言中概述的原则。符合条件的患者年龄在55岁至70岁之间，并接受不同疾病的诊断。诊断标准是基于已公布的共识准则。心肌缺血的诊断依据病史、心电图和肌酸激酶、肌钙蛋白I、肌钙蛋白T或肌红蛋白的检查结果。ELISA研究血清中PCSK9的表达水平采用酶联免疫吸附法（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）检测血清中PCSK9的表达水平，采用人PCSK9ELISA试剂盒检测血清中PCSK9表达水平，所有的实验步骤严格按照试剂盒说明书进行。统计分析数据以平均数±标准差表示。采用未配对t检验方法检验两组间的显著性差异。采用单因素方差分析比较多组间差异的显著性，随后采用Tukey事后比较检验。所有分析均由GraphPadPrismversion7.00完成。p值<0.05表示具有统计学意义。结果：PCSK9在健康对照组和慢性心肌缺血患者血清中的表达水平。如图1所示，慢性心肌缺血患者和对照组的PCSK9水平有很大的差异性。慢性心肌缺血患者PCSK9的平均水平高于对照组37%（p<0.0001）。如图2所示，对照组中男性和女性血清PCSK9水平相似，但女性慢性心肌缺血患者的表达水平显著高于男性慢性心肌缺血患者（p<0.0001）。慢性心肌缺血患者血清PCSK9表达水平持续高于同龄对照组（p<0.0001），且随年龄的增加而增加（图3）。PCSK9表达水平与缺血持续时间呈负相关（p<0.05），新发病缺血患者PCSK9表达水平最高，随着缺血状态的稳定，PCSK9表达水平下降（图4）。在大量患者中观察表明，慢性心肌缺血患者血清PCSK9水平升高（与年龄和性别匹配的对照组相比）。女性PCSK9水平高于男性慢性心肌缺血患者。心肌缺血患者的PCSK9蛋白高表达，特别是在急性缺血状态下。PCSK9蛋白水平被认为是心肌缺血及其强度的显著生物标志物，因此用于临床试验，以评估缺血状态和治疗反应。流行病学研究显示：男性罹患心力衰竭的风险明显高于女性，男女心力衰竭总体发病率之比为55:45，且男性人群平均发病年龄低于女性。但是，在75岁以上人群中，随年龄增长女性心力衰竭发病率的增幅明显高于男性，直至最后男女发病率相等。本研究中的一些有趣的发现是老年人、女性和急性缺血患者血清中PCSK9的水平较高。衰老与高水平的氧化应激和炎症有关。因此，血清PCSK9水平随着年龄的增长而增加。一些研究表明，PCSK9抑制剂可本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.PCSK9蛋白作为与心肌缺血显著相关的血清生物标志物的应用。/n

【技术特征摘要】
1.PCSK9蛋白作为与心肌缺血显著相关的血清生物标志物的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：...

【专利技术属性】
技术研发人员：王现伟，丁祖锋，李晓，张帆，刘冬玲，刘世杰，
申请(专利权)人：新乡医学院，
类型：发明
国别省市：河南;41