硫醚环状肽胰淀素受体调节剂制造技术

本发明专利技术涉及胰淀素模拟肽类似物及其衍生物，其中每个肽的N‑末端通过非肽基环化桥接元素而共价连接至内部氨基酸侧链硫醇官能团。硫醚环化的胰淀素模拟物类似物及其衍生物可包含一种或多种改变(包括置换、插入、缺失和修饰)，并且可任选地包含血清白蛋白结合元素诸如至少14个碳原子的烷基链，该烷基链任选地带有另外的侧基羧酸根部分或半衰期延长的生物部分诸如HSA、非靶向mAb或Fc。此外，本发明专利技术涉及其组合物和治疗响应于胰淀素受体调节的病症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】硫醚环状肽胰淀素受体调节剂本申请要求2018年4月25日提交的美国临时专利申请序列号62/662,492的权益，该临时专利申请据此全文以引用方式并入。序列表本申请包含已经以ASCII格式电子递交的序列表，并且据此全文以引用方式并入。所述ASCII副本创建于2019年4月16日，命名为PRD3471WOPCT1_SL.txt，并且大小为55,747字节。
本专利技术涉及胰淀素、普兰林肽和达瓦林肽的硫醚环化类似物及其衍生物(本文称为“胰淀素模拟肽”)，其用作胰淀素受体的激动剂并且因此可用于治疗代谢疾病和障碍，诸如肥胖症、2型糖尿病、代谢综合征、胰岛素抵抗和血脂异常。
技术介绍
胰淀素是天然存在的含37个氨基酸的肽，其是肽的降钙素家族的结构相关成员，包括降钙素(CT)、降钙素基因相关肽(CGRP)、肾上腺髓质素(AM)和中介素(AM2)。它是由胰腺响应于营养物质流入胃肠道而合成和分泌的。在释放到循环中之后，胰淀素以高亲和力结合到主要位于中枢神经系统的后脑区域最后区域中的特定B类GPCR。因此，它是一种中枢作用的神经内分泌激素，用于通过抑制胃排空、抑制胰高血糖素释放并引起饱腹感来调节葡萄糖稳态(综述于HayDL等人，PharmacolRev2015；67:564-600)。已发现胰淀素与三种靶受体亚型AMY1R、AMY2R和AMY3R在体外相互作用，这些亚型为由降钙素受体(CTR)和受体修饰蛋白(分别为RAMP1、RAMP2和RAMP3)构成的异源二聚体结构(ChristopoulosG等人，MolPharmacol1999；56:235-42)。CTR与这些RAMP的缔合使得胰淀素亲和力相对于单独的CTR增加，并且为胰淀素(相对于CT)的选择性受体药理学提供了基础(BowerRL和HayDL，BrJPharmacol2016；173:1883-98)。虽然已普遍接受的是，胰淀素参与高亲和力/效能相互作用，特别是与AMY1R和AMY3R的相互作用，但在所有受体亚型处的同时激动可能不一定是药理有益效果所必需的。(HayDL等人，BrJPharmacol2018；175:3-17；HayDL,Headache2017；57:89-96)。人胰淀素(也称为胰岛淀粉样多肽(IAPP))具有使其不适合用作药剂的若干物理化学特性，包括最值得注意的是其低水溶性以及自聚集并粘附于表面的趋势。普兰林肽，一种等效胰淀素类似物，其通过将三个特定残基突变(A25P、S28P和S29P)掺入到胰淀素序列中而开发(YoungAA等人，DrugDevRes1996；37:231-48)。这些突变使得相对于胰淀素的物理化学特性改善(减少聚集倾向)。普兰林肽减少肥胖受试者的食物摄取(SmithSR等人，AAmJPhysiolEndocrinolMetab2007；293:E620-7)和体重(AronneL等人，JClinEndocrinMetab2007；92:2977-83)。其被批准作为胰岛素的辅助疗法用于治疗患有1型糖尿病的成人患者，以及作为单独胰岛素的辅助疗法或与二甲双胍和/或磺酰脲类药物同时治疗的辅助疗法用于患有2型糖尿病的成人患者(PullmanJ等人，VascHealthRiskManag2006；2:203-12)。达瓦林肽是长度为32个氨基酸的相关合成肽，其结构是普兰林肽和鲑降钙素初级序列的嵌合体。因此，其缺乏人胰淀素的淀粉样基因残基(WestermarkP等人，ProcNatlAcadSciUSA1990；87:5036-40)。它是胰淀素和降钙素受体两者的高效激动剂，在减少大鼠的食物摄取和体重方面，其展示出比天然(大鼠)胰淀素更强的药理学特性(MackCM等人，IntJObes2010；34:385-95)。胰淀素、普兰林肽和达瓦林肽各自具有极短的体内半衰期(<0.75h)，这限制了它们的实际治疗效用(RothJD等人，ImmunEndocMetabAgentsinMedChem2008；8:317-24；MackCM等人，DiabetesObesMetab2011；13:1105-13)。就普兰林肽而言，该短半衰期需要每日多次施用的方案来实现临床效果。因此，期望获得具有改善的代谢稳定性和药代动力学特征的胰淀素激动肽或其衍生物。用于延长这些肽的半衰期的一种技术涉及缀合至生物载体，诸如白蛋白、合适的mAb或其抗原结合片段、或者mAb衍生的结晶片段域(Fc)蛋白。此类生物缀合化学通过生物载体分子上的选择性反应性巯基官能团与工程化到感兴趣的肽中的互补亲电位点的反应来进行。虽然掺入到肽分子上的马来酰亚胺官能团已充当用于生物缀合化学的合适亲电体，但所得的生物缀合物可在体内经历反向缀合反应(反向迈克尔反应)，从而导致肽从生物载体丢失。因此，通过偶联到反应性卤代乙酰胺衍生的肽而形成的更稳定的硫代乙酰胺键用于避免这种反向缀合的可能性。然而，由于无阻碍二硫环的反应性，溴乙酰胺缀合反应所需的条件不能成功地与其选择性生物缀合的含二硫键的胰淀素类似物一起使用。此类尝试的化学导致伴随的开环和相关的复杂副反应。早已认识到，完整的二硫环是受体激活和生物学功能所需的关键分子特征(RobertsAN等人，ProcNatlAcadSciUSA1989；86:9662-9666；CornishJ等人，Am.J.Physiol.1998；274:E827-E833；BowerRL和HayDL.,Br.J.Pharmacol.2016；173:1883-1898)。本文中，鉴定出了用于普兰林肽和达瓦林肽的二硫半胱氨酸连接的N末端环状硫醚替换物，其出乎意料地维持了胰淀素受体激动剂活性并且对于生物缀合反应化学是稳定的。
技术实现思路
在一个总的方面，本专利技术涉及新型胰淀素模拟物化合物。本文还提供了普兰林肽或达瓦林肽的胰淀素模拟物衍生物及其缀合物，所述胰淀素模拟物衍生物及其缀合物包含偶联到胰淀素模拟肽的单克隆抗体或其抗原结合片段。在一个方面，本专利技术由以下表示：式I的化合物或其衍生物(SEQIDNO:53)其中n为1或2；Z2为直接键、丝氨酸或甘氨酸；Z4为T或Z5为A、β-丙氨酸、Z6为T或Z10为Q或E；Z11为R或K，其中所述K的ε-胺任选地被–C(＝NH)NH2取代；Z12为L或Z16为L或Z25为P或K，其中所述K的ε-胺任选地被–C(＝O)CH3、-C(O)CH2CH＝CH2、取代，其中所述mAb任选地通过另一个硫醚键取代到第二式I的化合物，使得所述mAb上存在两个相同的式I的化合物；Z26为I或K，其中所述K的ε-胺任选地被–C(＝O)CH3、-C(O)CH2CH＝CH2、取代，其中所述mAb任选地通过另一个硫醚键取代到第二式I的化合物，使得所述mAb上存在两个相同的式I的化合物；X为ATZ10Z11Z12ANFZ16VHSSNNFGZ25Z26LPZ29TNVGZ34(SEQIDNO:54)或VLGRLSQELHRLQTY本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种式I的化合物(SEQ ID NO:53)/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180425 US 62/6624921.一种式I的化合物(SEQIDNO:53)



其中
n为1或2；
Z2为直接键、丝氨酸或甘氨酸；
Z4为T或
Z5为A、β-丙氨酸、
Z6为T或
Z10为Q或E；
Z11为R或K，其中所述K的ε-胺任选地被–C(＝NH)NH2取代；
Z12为L或
Z16为L或
Z25为P或K，其中所述K的ε-胺任选地被–C(＝O)CH3、-C(O)CH2CH＝CH2、取代，其中所述mAb任选地通过另一个硫醚键取代到第二式I的化合物，使得所述mAb上存在两个相同的式I的化合物；
Z26为I或K，其中所述K的ε-胺任选地被–C(＝O)CH3、-C(O)CH2CH＝CH2、取代，其中所述mAb任选地通过另一个硫醚键取代到第二式I的化合物，使得所述mAb上存在两个相同的式I的化合物；
X为ATZ10Z11Z12ANFZ16VHSSNNFGZ25Z26LPZ29TNVGZ34(SEQIDNO:54)或VLGRLSQELHRLQTYPRTNTGS(SEQIDNO:55)；
Z29为P或K，其中所述K的ε-胺任选地被–C(＝O)CH3、-C(O)CH2CH＝CH2、取代，其中所述mAb任选地通过另一个硫醚键取代到第二式I的化合物，使得所述mAb上存在两个相同的式I的化合物；
Z34为S或K，其中所述K的ε-胺任选地被–C(＝O)CH3、-C(O)CH2CH＝CH2、取代，其中所述mAb任选地通过另一个硫醚键取代到第二式I的化合物，使得所述mAb上存在两个相同的式I的化合物；
以及其药学上可接受的盐。


2.根据权利要求1所述的化合物，其中：
Z2为直接键；
Z5为β-丙氨酸、
Z6为T；
以及其药学上可接受的盐。


3.根据权利要求1所述的化合物，其中：
Z16为L；
Z25为P或K，其中所述K的ε-胺任选地被–C(＝O)CH3、-C(O)CH2CH＝CH2、取代，其中所述mAb任选地通过另一个硫醚键取代到第二式I的化合物，使得所述mAb上存在两个相同的式I的化合物；
Z26为I或K，其中所述K的ε-胺任选地被–C(＝O)CH3、-C(O)CH2CH＝CH2、取代，其中所述mAb任选地通过另一个硫醚键取代到第二式I的化合物，使得所述mAb上存在两个相同的式I的化合物；
Z29为P或K，其中所述K的ε-胺任选地被–C(＝O)CH3、-C(O)CH2CH＝CH2、取代，其中所述mAb任选地通过另一个硫醚键取代到第二式I的化合物，使得所述mAb上存在两个相同的式I的化合物；
Z34为S或K，其中所述K的ε-胺任选地被–C(＝O)CH3、-C(O)CH2CH＝CH2、取代，其中所述mAb任选地通过另一个硫醚键取代到第二式I的化合物，使得所述mAb上存在两个相同的式I的化合物；
以及其药学上可接受的盐。


4.根据权利要求3所述的化合物，其中：
Z2为直接键；
Z5为β-丙氨酸、
Z6为T；
以及其药学上可接受的盐。


5.根据权利要求3所述的化合物，其中：
Z11为R或K，其中所述K的ε-胺被–C(＝NH)NH2取代；
Z25为P或K，其中所述K的ε-胺被–C(＝O)CH3或取代，其中所述mAb通过另一个硫醚键取代到第二式I的化合物，使得所述mAb上存在两个...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·欣克，W·简，R·帕奇，R·张，S·郑，
申请(专利权)人：詹森药业有限公司，
类型：发明
国别省市：比利时;BE