【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】经培养的胸腺组织移植促进对同种异体实体器官移植物的供体特异性耐受性
用于在接受来自供体的同种异体实体器官移植物的受体中促进对同种异体实体器官移植物的供体特异性耐受性的方法和组合物。
技术介绍
器官移植需要从供体制备并采集人实体器官，然后移植到受体中。实体器官移植的主要问题是受体对供体不耐受。受体T细胞将排斥器官，而受体B细胞将对器官产生抗体，从而导致器官最终衰竭。实体器官移植的精髓是发展出受体对移植的人体器官的耐受性。据估计，美国每年要进行36,000多例器官移植，并且欧洲和其它主要国家的器官移植数量更多。进一步估计，在美国等待器官移植的患者超过120,000。对健康器官的需求大大超过了合适器官的供应。在2018年，鉴定了约10,000名捐助者。参见https://optn.transplant.hrsa.gov。移植排斥是实体器官移植中的重大挑战。T细胞和B细胞的移植排斥都会导致器官功能的严重并发症，或甚至导致移植失败。例如，心脏移植的5年移植存活率为77.7％，肾脏移植为78.6％，肝脏移植为72.8％并且肺移植为53.4％。通常，已经通过供体和受体的主要组织相容性复合物(MHC)抗原匹配以及通过避免对受体组织类型具有抗体的受体来部分解决了此问题。此外，使用免疫抑制方案来管理移植排斥背后的免疫学反应也得到了改善。但是，尚未实现耐受性，并且许多器官的平均存活期仅为10年。在植入手术之前和期间保持器官生存力是第二个重大挑战。器官的取出、储存和移植可能会深刻影响器官的内部结构和功能，并且会显著影...
【技术保护点】
1.一种用于在需要实体器官移植的受体中促进对获自死亡供体的同种异体实体器官移植物的供体特异性耐受性的方法，所述方法包括以下步骤：/n(a)取出所述受体的胸腺；/n(b)用包括一种或多种免疫抑制剂的诱导免疫抑制方案治疗所述受体，以耗尽所述受体的T细胞和/或抑制所述受体的T细胞排斥移植的实体器官；/n(c)提供来自死亡供体的合适的实体人体器官和胸腺；/n(d)将所述实体人体器官移植到所述受体中；/n(e)用维持性免疫抑制方案治疗所述受体；/n(f)提供同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品，其中从所述实体器官供体的合适的胸腺组织中获得所述同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品；其中对所述供体胸腺组织进行长达21天的预处理方案，以产生同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品；进一步地，其中用于所述供体胸腺组织的所述预处理方案包括在胸腺器官培养基中对所述供体胸腺组织进行无菌处理，以产生部分T细胞耗竭的供体胸腺组织切片；其中所述部分T细胞耗竭的供体胸腺组织切片显示出散布在整个组织中的对细胞角蛋白(CK)(使用抗体AE1/AE3)呈阳性的区域、至少一个赫氏小体(Hassallbody)的存在、...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180223 US 62/634,3771.一种用于在需要实体器官移植的受体中促进对获自死亡供体的同种异体实体器官移植物的供体特异性耐受性的方法，所述方法包括以下步骤：
(a)取出所述受体的胸腺；
(b)用包括一种或多种免疫抑制剂的诱导免疫抑制方案治疗所述受体，以耗尽所述受体的T细胞和/或抑制所述受体的T细胞排斥移植的实体器官；
(c)提供来自死亡供体的合适的实体人体器官和胸腺；
(d)将所述实体人体器官移植到所述受体中；
(e)用维持性免疫抑制方案治疗所述受体；
(f)提供同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品，其中从所述实体器官供体的合适的胸腺组织中获得所述同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品；其中对所述供体胸腺组织进行长达21天的预处理方案，以产生同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品；进一步地，其中用于所述供体胸腺组织的所述预处理方案包括在胸腺器官培养基中对所述供体胸腺组织进行无菌处理，以产生部分T细胞耗竭的供体胸腺组织切片；其中所述部分T细胞耗竭的供体胸腺组织切片显示出散布在整个组织中的对细胞角蛋白(CK)(使用抗体AE1/AE3)呈阳性的区域、至少一个赫氏小体(Hassallbody)的存在、散布在整个组织中的CK14染色以及完整核的存在；以及
(g)在预处理方案的12到21天后，将所述同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品植入所述受体中，其中所述胸腺组织切片的剂量为约1,000–20,000mm2胸腺组织表面积/m2受体身体表面积，并且进一步地，其中所述植入的同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品在所述受体中诱导胸腺生成和耐受性。
2.根据权利要求1所述的方法，其中通过外科手术取出所述受体的胸腺。
3.根据权利要求2所述的方法，其中通过机器人手术取出所述受体的胸腺。
4.根据权利要求2所述的方法，其中通过胸腔镜手术取出所述受体的胸腺。
5.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括以下步骤：冷冻保存来自所述死亡供体的外周血单核细胞，以备将来在混合淋巴细胞反应中使用，以证明细胞耐受性。
6.根据权利要求5所述的方法，其中在按照步骤(g)植入同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品后，使用来自所述受体的外周血单核细胞和来自所述供体的冷冻保存的外周血单核细胞进行所述混合淋巴细胞反应，以证明细胞耐受性。
7.根据权利要求6所述的方法，其中在植入同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品后约6个月到12个月，用来自所述受体的外周血单核细胞和来自所述供体的冷冻保存的外周血单核细胞进行所述混合淋巴细胞反应，以证明细胞耐受性。
8.根据权利要求7所述的方法，其中在原初T细胞构成所述受体中总T细胞的约10％之后，用来自所述受体的外周血单核细胞和来自所述供体的冷冻保存的外周血单核细胞进行所述混合淋巴细胞反应，以证明细胞耐受性。
9.根据权利要求1所述的方法，其中在植入同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品后12个月内，所述植入的同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品在所述受试者中诱导胸腺生成。
10.根据权利要求1所述的方法，其中所述供体胸腺在采集之日表明>50％的区域对具有花边染色图案的角蛋白呈阳性、存在赫氏小体、CK14以花边图案染色并且>90％的核是完整的。
11.根据权利要求1所述的方法，其中通过体液免疫的发展和不存在针对供体MHC的供体反应性抗体来确定体液耐受性。
12.根据权利要求1所述的方法，其中所述诱导免疫抑制方案包括选自由以下组成的组的免疫抑制剂：糖皮质激素、抗胸腺细胞球蛋白(兔)、抗胸腺细胞球蛋白(马)和阿仑单抗。
13.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二免疫抑制方案包括施用糖皮质激素。
14.根据权利要求13所述的方法，其中所述糖皮质激素包括甲基泼尼松龙琥珀酸钠。
15.根据权利要求14所述的方法，其中在植入同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品后，以不超过4mg/kg/天的剂量静脉内施用所述甲基泼尼松龙琥珀酸钠。
16.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二免疫抑制方案包括施用糖皮质激素加他克莫司或环孢霉素，并进一步施用吗替麦考酚酯、吗替麦考酚酯等效物或硫唑嘌呤。
17.根据权利要求1所述的方法，其中所述实体器官是整个器官的一部分。
18.根据权利要求1所述的方法，其中所述实体器官移植物是心脏移植物、肾脏移植物、肝脏移植物、肺移植物、心脏/肺移植物、胰腺移植物、肠移植物、胃移植物、腹壁移植物、颅面移植物、头皮移植物、阴茎移植物、子宫移植物、单侧或双侧上肢移植物、单侧血管化复合同种异体移植物或其组合。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述实体器官移植物是心脏移植物。
20.根据权利要求19所述的方法，其中所述实体器官移植物是小儿心脏移植物。
21.根据权利要求18所述的方法，其中所述实体器官移植物是成人心脏移植物。
22.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括在移植所述实体器官之前，评估所述受体的HLAI类或HLAII类群体反应性抗体(“PRA”)评分。
23.根据权利要求1所述的方法，其中具有HLA抗体的受体与潜在的供体交叉匹配。
24.根据权利要求23所述的方法，其中具有HLA抗体的受体虚拟地与UNET交叉匹配。
25.根据权利要求22所述的方法，其中如果记录了PRA评分>20％的虚拟交叉匹配，则所述方法将进一步包括以下步骤：在所述受体进行实体器官移植时在手术室中进行血浆置换。
26.根据权利要求22所述的方法，其中如果记录了PRA评分>70％的虚拟交叉匹配，则所述方法将进一步包括以下步骤：执行实际的预期供体交叉匹配，并在所述受体进行实体器官移植时在手术室中进行血浆置换。
27.根据权利要求1所述的方法，其中所述实体器官是HLA错配的。
28.根据权利要求27所述的方法，其中通过在所述供体和所述受体中对HLA等位基因HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DRB1、HLA-DQB1、HLA-DRB3、HLA-DRB4、HLA-DRB5、HLA-DQA1、HLA-DPB1、HLA-DPA1进行分型来确定HLA错配。
29.根据权利要求28所述的方法，其中HLA错配包括HLA等位基因HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DRB1、HLA-DQB1、HLA-DRB3、HLA-DRB4、HLA-DRB5、HLA-DQA1、HLA-DPB1、HLA-DPA1中的至少一个等位基因在所述供体和所述受体之间不同。
30.根据权利要求1所述的方法，其中将所述同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品的一部分通过外科手术植入所述受体的股四头肌大腿肌肉中。
31.根据权利要求30所述的方法，其中将所述同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品的剩余部分冷冻保存在液氮中，以备将来移植到所述受体中。
32.根据权利要求1所述的方法，其中所述预处理方案持续约12天到约21天。
33.根据权利要求32所述的方法，其中所述预处理方案持续约12天。
34.根据权利要求32所述的方法，其中所述预处理方案持续约13天。
35.根据权利要求32所述的方法，其中所述预处理方案持续约14天。
36.根据权利要求32所述的方法，其中所述预处理方案持续约15天。
37.根据权利要求32所述的方法，其中所述预处理方案持续约16天。
38.根据权利要求32所述的方法，其中所述预处理方案持续约17天。
39.根据权利要求32所述的方法，其中所述预处理方案持续约18天。
40.根据权利要求32所述的方法，其中所述预处理方案持续约19天。
41.根据权利要求32所述的方法，其中所述预处理方案持续约20天。
42.根据权利要求32所述的方法，其中所述预处理方案持续约21天。
43.根据权利要求12所述的方法，其中所述诱导免疫抑制方案包括兔来源的抗胸腺细胞球蛋白。
44.根据权利要求43所述的方法，其中以约1.5mg/kg/天的剂量静脉内施用所述兔来源的抗胸腺细胞球蛋白，持续约3天到7天。
45.根据权利要求44所述的方法，其中通过静脉内施用以约15mg/kg/天的剂量每天施用所述抗胸腺细胞球蛋白，持续3-14天。
46.根据权利要求12所述的方法，其中所述诱导免疫抑制方案包括阿仑单抗。
47.根据权利要求46所述的方法，其中以约0.25mg/kg的剂量向体重小于35kg的受体静脉内施用所述阿仑单抗，持续4天。
48.根据权利要求46所述的方法，其中以约3到20mg的剂量向体重超过35kg的受体静脉内施用所述阿仑单抗，持续4天。
49.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二免疫抑制方案包括一种或多种选自由以下组成的组的免疫抑制剂：钙调神经磷酸酶抑制剂和肌苷单磷酸脱氢酶抑制剂或硫唑嘌呤。
50.根据权利要求49所述的方法，其中所述免疫抑制剂是钙调神经磷酸酶抑制剂。
51.根据权利要求49所述的方法，其中所述免疫抑制剂是肌苷单磷酸脱氢酶抑制剂。
52.根据权利要求51所述的方法，其中所述肌苷单磷酸脱氢酶抑制剂是吗替麦考酚酯。
53.根据权利要求52所述的方法，其中口服或静脉内施用所述吗替麦考酚酯。
54.根据权利要求53所述的方法，其中以约15到约25mg/kg的剂量每天两次到三次施用所述吗替麦考酚酯。
55.根据权利要求49所述的方法，其中所述肌苷单磷酸脱氢酶抑制剂是麦考酚酸。
56.根据权利要求55所述的方法，其中以约25到约50mg/kg的剂量按每天2个或3个剂量施用所述麦考酚酸。
57.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二免疫抑制方案进一步包括糖皮质激素，所述糖皮质激素选自由甲基泼尼松龙、泼尼松和泼尼松龙组成的组。
58.根据权利要求57所述的方法，其中以递减的剂量施用所述糖皮质激素，并将所述剂量保持在4mg/kg/天或低于4mg/kg/天。
59.根据权利要求49所述的方法，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂是他克莫司。
60.根据权利要求49所述的方法，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂是环孢霉素A。
61.根据权利要求1所述的方法，其中在原初T细胞达到总T细胞的10％之后，舍弃所述第二免疫抑制方案中的所述一种或多种免疫抑制剂的施用。
62.根据权利要求1所述的方法，其中在植入后2到12个月对所述植入的同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品进行活检，以通过免疫化学评估胸腺生成的证据。
63.一种同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品，其用于植入接受实体器官移植物的受试者中，所述产品通过以下来制备：从供体获得合适的胸腺组织，其中对所述供体胸腺组织进行长达21天的预处理方案；进一步地，其中用于所述供体胸腺组织的所述预处理方案包括在胸腺器官培养基中对所述供体胸腺组织进行无菌处理，以产生部分T细胞耗竭的供体胸腺组织切片；其中在采集后第5天和第9天之间，所述供体胸腺组织切片显示出散布在整个组织中的对角蛋白AE1/AE3呈阳性的区域、至少一个赫氏小体的存在、散布在整个组织中的CK14染色以及完整核的存在；回收所述部分T细胞耗竭的供体胸腺组织切片，作为同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品。
64.根据权利要求63所述的同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品，其中所述胸腺在采集之日表明>50％的区域对具有花边染色图案的角蛋白呈阳性、存在赫氏小体、CK14以花边图案染色并且>90％的核是完整的。
65.将所述同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品保持在液氮中并冷冻保存，以备将来使用。
66.一种冷冻保存的同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品，其通过包括以下步骤的方法制备：
(a)从供体获得合适的胸腺组织；
(b)对以下HLA等位基因进行分型：HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DRB1、HLA-DQB1、HLA-DRB3、HLA-DRB4、HLA-DRB5、HLA-DQA1、HLA-DPB1、HLA-DPA1；
(c)对所述胸腺组织进行长达12天的预处理方案；其中用于所述供体胸腺组织的所述预处理方案包括在胸腺器官培养基中对所述供体胸腺组织进行无菌处理，以产生部分T细胞耗竭的供体胸腺组织切片；进一步地，其中在完成所述预处理方案后，所述供体胸腺组织切片在第5天到第9天显示出散布在整个组织中的对角蛋白AE1/AE3呈阳性的区域、至少一个赫氏小体的存在、散布在整个组织中的CK14染色以及完整核的存在；
(d)采集所述部分T细胞耗竭的供体胸腺组织切片，作为同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产物；
(e)在液氮中冷冻保存所述同种异体经培养的出生后胸腺组织来源的产品；以及
(f)...
【专利技术属性】
技术研发人员：M·L·马克特，
申请(专利权)人：杜克大学医学中心，
类型：发明
国别省市：美国;US
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。