用于预防或治疗类风湿性关节炎的、含线粒体的药物组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种用于预防或治疗类风湿性关节炎的药物组合物，特别是涉及一种含有线粒体作为活性成分，用于预防或治疗类风湿性关节炎的药物组合物。当向类风湿性关节炎患者给药本发明专利技术的含有外源性线粒体的药物组合物时，该患者可减轻水肿和浮肿症状。此外，本发明专利技术的药物组合物能降低患者体内炎性细胞因子IL‑6的表达水平，同时能提高抗炎性细胞因子IL‑10的表达水平。因此，本发明专利技术的药物组合物可以有效预防或治疗类风湿性关节炎。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于预防或治疗类风湿性关节炎的、含线粒体的药物组合物
本专利技术涉及一种用于预防或治疗类风湿性关节炎的药物组合物，特别是涉及一种含有线粒体作为活性成分，用于预防或治疗类风湿性关节炎的药物组合物。
技术介绍
类风湿性关节炎是一种慢性炎症疾病，其会导致关节滑膜增生，并破坏骨骼或软骨。在初始阶段，炎症会发生在连接关节的滑膜上，并逐渐扩散到周围的软骨和骨骼中，导致关节的破坏和变形。此外，类风湿关节炎还可能在各个器官和关节中引起炎症反应，并可能表现出诸如皮下结节、肺纤维化、血管炎、皮肤溃疡、皮疹、体重减轻等症状。目前已知免疫应答是类风湿关节炎病发的主要机制，但是确切病因还尚未发现。目前已使用非甾体抗炎药、类固醇药、抗风湿药和肿瘤坏死因子抑制剂来进行类风湿关节炎治疗。非甾体抗炎药和类固醇药可缓解炎症以减轻病症，但却不能抑制疾病的发展。与非甾体类抗炎药或类固醇药相比，抗风湿药能从根本上改善疾病，但却需要一定的时间(predeterminedtime)才能显示出药效，且几乎没有直接的镇痛作用。目前，为了治疗类风湿关节炎，会将抗风湿药与非甾体抗炎药或类固醇药物一起使用，直到抗风湿药起效。然而，在抗风湿药起效之前，使用非甾体抗炎药可能会引起胃肠道疾病等副作用，以及使用类固醇药可能会引起免疫力降低、耐受性增加和并发症等副作用。另外，抗风湿药侧重于关节炎的治疗，但也可能引起各种副作用。因此，还需要进行定期血液检查等后期观察。肿瘤坏死因子抑制剂已经应用于治疗对抗风湿药无反应的类风湿关节炎患者，其原理是通过阻断肿瘤坏死因子来抑制炎症反应，而肿瘤坏死因子是引起类风湿性关节炎的介质。肿瘤坏死因子抑制剂的优点在于，能使对常规抗风湿药无反应的类风湿关节炎症状减轻70％甚至更多，且比常规治疗剂见效更快。但是，肿瘤坏死因子抑制剂的缺点在于其半衰期短，且并不是从根本原因上来进行治疗。另外，已经有报道指出其存在激活潜伏性结核等副作用。线粒体是真核细胞中的细胞器，能够参与细胞内能源三磷酸腺苷(ATP)的合成和调控，与生物体内的各种代谢途径相关，例如细胞信息传递、细胞分化、细胞凋亡以及细胞周期和细胞生长的控制。关于类风湿性关节炎的发病机理，已有研究报道，关节的滑膜增生会引起线粒体功能障碍，进而增加活性氧的产生，从而诱导产生炎症反应(Fearonetal.,NatRevRheomatoid.,2016,(12):385-397)。
技术实现思路
技术问题目前对治疗风湿性关节炎进行的研究，还存在诸如治疗范围有限或有副作用发生等问题，且尚未开发出创新疗法。因此仍需对安全有效的类风湿性关节炎疗法进行持续的研究和开发。本专利技术的目的是提供一种用于治疗类风湿性关节炎的药物组合物以及使用该药物治疗类风湿性关节炎的方法。技术方案为了解决上述问题，本专利技术提供了一种用于预防或治疗类风湿性关节炎的药物组合物，该药物组合物含有线粒体作为活性成分。本专利技术还提供了一种用于预防或治疗类风湿性关节炎的方法,该方法包含向个体施用所述药物组合物。有益效果当将本专利技术中含有外源性线粒体的药物组合物施用于类风湿性关节炎患者时，可以减轻该患者的肿胀和泛红症状。此外，本专利技术的药物组合物降低患者体内炎性细胞因子IL-6的表达水平，同时能提高抗炎性细胞因子IL-10的表达水平。因此，本专利技术的药物组合物可用于预防或治疗类风湿关节炎。附图说明图1是肉眼能观察到的，比较正常组、对照组以及使用过外源性线粒体的实验组小鼠足部肿胀和发红症状的图片。图2是评估正常组、对照组以及使用过外源性线粒体的实验组小鼠的疾病症状程度的曲线图。图3是正常组、对照组以及使用过外源性线粒体的实验组小鼠的背轴爪厚度测定结果的柱状图。图4是比较正常组、对照组以及使用过外源性线粒体的实验组小鼠的IL-6基因表达水平的柱状图。图5是比较正常组、对照组以及使用过外源性线粒体的实验组小鼠的IL-10基因表达水平的柱状图。图6是在经过外源性线粒体给药的类风湿关节炎小鼠体内，其外源性线粒体的分布状态照片。图7是根据外源性线粒体给药，评估类风湿性关节炎的严重性的组织状态照片。图8显示在LPS存在的状态下，通过外源性线粒体给药使巨噬细胞增殖。图9显示在LPS存在的状态下，通过外源性线粒体给药使TNF-α分泌水平降低。图10显示在LPS存在的状态下，通过外源性线粒体给药使IL-6分泌水平降低。本专利技术最佳实施方式在下文中将详述本专利技术。一方面本专利技术提供了一种用于预防或治疗类风湿性关节炎的药物组合物，其中含有线粒体作为活性成分。在本文中，除非特别指出，术语“活性成分”是指单独或与自身不具有活性的辅助剂(载体)组合显示出活性的成分。所述线粒体可以获取自哺乳动物或人。具体而言，所述线粒体可以分离自细胞或组织，例如体细胞、生殖细胞或干细胞。另外，还可以是从线粒体生物学活性正常的细胞中获得的正常线粒体。并且，也可以在体外培养所述线粒体。另外，所述线粒体可以获取于自体、同种异体或异种。具体来讲，术语“自体线粒体”是指从同一个体的组织或细胞获得的线粒体。另外，术语“同种异体线粒体”是指，从与要应用线粒体的个体属于同一物种，但等位基因的基因型不同的个体中获得的线粒体。另外，术语“异种线粒体”是指从与要应用线粒体的个体属于不同物种的个体中获得的线粒体。具体来讲，所述体细胞可以是肌肉细胞、肝细胞、神经元、成纤维细胞、上皮细胞、脂肪细胞、骨细胞、白细胞、淋巴细胞、血小板或粘膜细胞。另外，所述生殖细胞是经历减数分裂和有丝分裂的细胞，可以是精子或卵细胞。所述干细胞可以为选自由间充质干细胞、成体干细胞、诱导多能干细胞、胚胎干细胞、骨髓干细胞、神经干细胞、角膜缘干细胞和组织来源的干细胞中的任何一种。所述间充质干细胞可以选自脐带、脐带血、骨髓、脂肪、肌肉、神经、皮肤、羊膜和胎盘构成的群组中的任何一种。同时，在从特定细胞分离线粒体时，可以通过各种已知方法分离线粒体，例如使用特定的缓冲溶液或使用电势差和磁场。考虑到维持线粒体活性，可以通过破碎和离心细胞的方式来实现线粒体的分离。在一个实施方案中，线粒体的分离可以通过以下方式进行：先进行细胞培养，然后对含有所培养细胞的药物组合物进行第一次离心以产生沉淀；在缓冲溶液中将沉淀重悬并均质化化沉淀；对均质溶液进行第二次离心以产生上清液；然后对上清液进行第三次离心以纯化线粒体。在此方案中，考虑到维持细胞活性，优选调整第二次离心时间，使其比第一次和第三次离心时间短，并且从第一次到第三次离心，可以提高离心速度。具体来讲，第一至第三次离心可在0-10℃下进行，优选3-5℃的温度下进行。另外，离心时间可以在1-50分钟之间，并且可以根据离心分离次数、样品含量等适当地调节离心时间。另外，第一次离心可以以100-1000g、200-700g或300-450g的速度进行；第二次离心可以以1-2000g、25-1800g或50本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于预防或治疗类风湿性关节炎的药物组合物，所述组合物含有线粒体作为活性成分。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180202 KR 10-2018-00132781.用于预防或治疗类风湿性关节炎的药物组合物，所述组合物含有线粒体作为活性成分。


2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述线粒体是从细胞或组织中分离得到。


3.如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述细胞为选自由体细胞、生殖细胞、干细胞及其组合构成的群组中的任意一种。


4.如权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述体细胞为选自由肌肉细胞、肝细胞、神经元、成纤维细胞、上皮细胞、脂肪细胞、骨细胞、白细胞、淋巴细胞、血小板、粘膜细胞及其组合构成的群组中的任意一种。


5.如权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述生殖细...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔容秀，黄晶煜，韩圭范，金天炯，
申请(专利权)人：白雁生物技术公司，
类型：发明
国别省市：韩国;KR