角蛋白1在异位妊娠中的应用和产品制造技术

本发明专利技术公开了角蛋白1在异位妊娠中的应用和产品，属于生物技术和临床医学检测技术领域。在本发明专利技术中，以角蛋白1作为检测指标，并应用于制备检测异位妊娠的产品中；产品包括用于检测角蛋白1浓度的试剂；本产品具有灵敏度高、特异性高、准确度高、精确度高、操作简单及能批量快速检测等特点。

【技术实现步骤摘要】
角蛋白1在异位妊娠中的应用和产品
本专利技术涉及角蛋白1在异位妊娠中的应用和产品，尤其涉及以角蛋白1为检测指标并在异位妊娠中的应用和产品，属于生物技术和临床医学检测

技术介绍
异位妊娠，俗称“宫外孕”，是指受精卵种植并发育在子宫体腔以外的器官或组织，例如：输卵管、卵巢、腹腔、子宫颈、子宫角、阔韧带或剖宫产瘢痕部位等，其中，输卵管妊娠最为常见，约占95%。异位妊娠是妇产科常见的急腹症，发病率为2-3%，是早期妊娠孕妇死亡的主要原因，其中，异位妊娠的典型临床表现为停经、腹痛和阴道流血。目前，临床上主要的辅助检查手段包括血HCG测定和超声检查，但由于血HCG浓度随孕周变化而不断变化，因此无法成为独立预测指标；而超声检查虽然有助于明确异位妊娠的部位和大小，但却无法发现早期肿块较小的异位妊娠。CN109971847A中公开了Calponin-h2作为诊断异位妊娠的标记物的应用，其中，揭示了CNN2可以作为异位妊娠早期诊断的特异性血清标记物，提高异位妊娠的早期诊断率。
技术实现思路
专利技术人在长期的研究中发现，正常怀孕女性子宫腔内角蛋白1浓度显著低于异位妊娠女性子宫腔内角蛋白1浓度，因此，基于这一研究结果，角蛋白1可作为异位妊娠的诊断指标并应用于的检测产品中。本专利技术针对现有技术的不足，而提出了角蛋白1在异位妊娠中的应用和产品。在本技术方案中，以角蛋白1为检测指标，通过定量的检测角蛋白1浓度，从而准确的判断异位妊娠，完成异位妊娠确诊和治疗的前期工作。为了实现上述技术目的，提出如下的技术方案：本专利技术首次将角蛋白1作为检测指标，特定的应用于异位妊娠检测的产品中，通过定量检测受试者的角蛋白1浓度，而作为异位妊娠检测的依据。进一步的，所述检测是针对受试者的生物样本进行，生物样本选自血清或血浆或全血。进一步的，所述生物样本来自怀孕4周以上的女性。进一步的，所述用于检测角蛋白1指标的试剂是用于在蛋白水平上检测角蛋白1的试剂。进一步的，所述产品以检测生物样本中的角蛋白1浓度为检测指示，当生物样本中的角蛋白1浓度高于或等于28.76pg/mL时，判定生物样本呈阳性，即为异位妊娠；当生物样本中的角蛋白1浓度低于28.76pg/mL时，判定生物样本呈阴性，即为宫内正常早孕。针对该研究结果，本专利技术另提出角蛋白1在异位妊娠中应用的产品，所述产品包括用于检测角蛋白1浓度的试剂。进一步的，所述试剂在蛋白水平上检测角蛋白1浓度的方法包括免疫层析法、免疫荧光分析法、ELISA、生物芯片法及电化学发光法。进一步的，所述产品包括检测试剂盒，检测试剂盒包括：（1）包被有鼠抗人角蛋白1单克隆抗体的酶标板；（2）标记有生物素的兔抗人角蛋白1多克隆抗体检测液；（3）角蛋白1标准品；（4）亲和素-辣根过氧化物酶；（5）显色底物3',3',5,5'-四甲基联苯胺；（6）标准品稀释液、洗涤缓冲液及终止液。采用本技术方案，带来的有益技术效果为：1）在本专利技术中，基于检测角蛋白1作为检测指标，应用于异位妊娠检测的产品中，实现灵敏度高、特异性高、准确度高、精确度高、操作简单、能批量快速检测等目的；2）本专利技术通过研究首次发现，正常怀孕女性子宫腔内角蛋白1浓度显著低于异位妊娠女性子宫腔内角蛋白1浓度，因此，基于这一研究结果，首次将角蛋白1为异位妊娠的检测指标，并应用于检测产品中。目前，尚未发现以血液样本中的角蛋白1作为异位妊娠检测指标的报道，也未发现以血液样本中的角蛋白1为检测指标的检测产品（比如：试剂盒）及其制备方法的相关报道；3）本专利技术将检测角蛋白1浓度的试剂用于制备检测异位妊娠的产品，如检测试剂盒等，操作方法简单，以血液为检测样品，可实现快速、批量的检测，角蛋白1可通过现有免疫层析法进行定性粗筛选后，再利用免疫荧光分析法、ELISA、生物芯片法或电化学发光法等方法进行定量浓度的测定，具有高灵敏度、高特异性、高准确度以及高精确度的特点；4）在本专利技术中，检测指标角蛋白1在怀孕4周即可出现差异性改变，能够早期为异位妊娠检测提供理论依据；5）在本专利技术中，设置检测试剂盒的KRT1浓度检测限为28.76pg/mL，具有高灵敏度（84.38%）和高特异性（80%），进而提高检测产品的可利用性。附图说明图1为本专利技术的实施例4中A450值-KRT1浓度标准曲线。具体实施方式下面通过对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1本实施例基于“正常怀孕女性子宫腔内角蛋白1浓度显著低于异位妊娠女性子宫腔内角蛋白1浓度”这一研究结果，将角蛋白1作为检测指标，特定的应用于异位妊娠检测的产品中，通过定量检测受试者的角蛋白1浓度，而作为异位妊娠检测的依据。其中，所涉及检测是针对受试者的生物样本进行，生物样本选自全血；其中，所涉及生物样本来自怀孕4周以上的女性；其中，所涉及用于检测角蛋白1指标的试剂是用于在蛋白水平上检测角蛋白1的试剂；以检测生物样本中的角蛋白1浓度为检测指示，当生物样本中的角蛋白1浓度高于或等于28.76pg/mL时，判定生物样本呈阳性，即为异位妊娠；当生物样本中的角蛋白1浓度低于28.76pg/mL时，判定生物样本呈阴性，即为宫内正常早孕。实施例2本实施例基于“正常怀孕女性子宫腔内角蛋白1浓度显著低于异位妊娠女性子宫腔内角蛋白1浓度”这一研究结果，另提出角蛋白1在异位妊娠中应用的产品，该产品包括用于检测角蛋白1浓度的试剂。其中，试剂在蛋白水平上检测角蛋白1浓度的方法包括免疫层析法、免疫荧光分析法、ELISA、生物芯片法及电化学发光法。实施例3本实施例基于实施例1-2，提供一种以角蛋白1为指标的检测试剂盒，具体包括：（1）包被有鼠抗人角蛋白1单克隆抗体的酶标板；（2）标记有生物素的兔抗人角蛋白1多克隆抗体检测液；（3）角蛋白1标准品；（4）亲和素-辣根过氧化物酶；（5）显色底物3',3',5,5'-四甲基联苯胺；（6）标准品稀释液、洗涤缓冲液及终止液。实施例4本实施例基于实施例3，以来自四川大学华西第二医院急诊和门诊的七十二个样本为例，对本技术方案做进一步说明，具体包括如下步骤：一、前处理标准品（KRT1蛋白标准品，）准备：用标准品稀释液（0.1MPBS，pH7.3-7.4）将KRT1蛋白标准品（购自Abcam公司，ab114282；或，Abbexa公司，abx067601）分别稀释成浓度为10ng/mL、5ng/mL、2.5ng/mL、1.25ng/mL、0.63ng/mL、0.31ng/本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.角蛋白1在异位妊娠中的应用，其特征在于，包括以角蛋白1作为检测指标在制备检测异位妊娠的产品中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.角蛋白1在异位妊娠中的应用，其特征在于，包括以角蛋白1作为检测指标在制备检测异位妊娠的产品中的应用。


2.根据权利要求1所述的角蛋白1在异位妊娠中的应用，其特征在于，所述检测是针对受试者的生物样本进行，生物样本选自血清或血浆或全血。


3.根据权利要求2所述的角蛋白1在异位妊娠中的应用，其特征在于，所述生物样本来自怀孕4周以上的女性。


4.根据权利要求1所述的角蛋白1在异位妊娠中的应用，其特征在于，所述用于检测角蛋白1指标的试剂是用于在蛋白水平上检测角蛋白1的试剂。


5.根据权利要求1-4中任意一项所述的角蛋白1在异位妊娠中的应用，其特征在于，所述产品以检测生物样本中的角蛋白1浓度为检测指示，当生物样本中的角蛋白1浓度高于或等于28.76pg/mL时，判定生物样本呈阳性；当生物样本中的角...

【专利技术属性】
技术研发人员：高林波，张林，王涛，唐林，周文杰，肖啸，车光璐，
申请(专利权)人：四川大学华西第二医院，
类型：发明
国别省市：四川;51