NPY作为长期低剂量电离辐射暴露诊断的分子标记物的用途制造技术

本发明专利技术提供了NPY作为长期低剂量电离辐射暴露诊断的分子标记物的用途，属于分子诊断技术领域。本发明专利技术确定了人体血清中NPY蛋白表达水平与长期低剂量电离辐射暴露紧密相关，血清中NPY蛋白表达水平高低可以区分长期低剂量电离辐射暴露人群，因此血清中NPY蛋白可以作为长期低剂量电离辐射暴露诊断的分子标记物，检测NPY蛋白的试剂及试剂盒，可应用于长期低剂量电离辐射暴露检测。检测NPY蛋白的方式简便，可以采用芯片或其他蛋白分析技术开展大规模、高通量的人群筛查，具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
NPY作为长期低剂量电离辐射暴露诊断的分子标记物的用途
本专利技术属于分子诊断
，具体涉及NPY作为长期低剂量电离辐射暴露诊断的分子标记物的用途。
技术介绍
电离辐射可对机体在分子、细胞、组织和器官等不同水平上发生影响，使机体产生不同程度的生物效应。高、低剂量(<100mGy)的辐射生物效应不尽相同。低剂量电离辐射对放射职业人群和公众的影响更为普遍，其生物效应更加复杂。电离辐射引发的细胞突变、染色体畸变和基因表达等等不同水平的规律性变化，可以作为辐射生物标志物，应用于受照剂量评估、辐射分子流行病学调查等等。辐射分子流行病学将传统流行病学研究和分子生物学技术相结合，从分子水平探讨电离辐射对机体的影响。辐射分子流行病学调查对于评估辐射易感性、维护人群健康、建立合理而有效的辐射防护策略等有着重要的应用价值。辐射分子流行病学研究中最重要的内容是辐射生物标志物，可以包括DNA、RNA、蛋白质、酶、代谢产物、其他生化分子，等等。目前常用的微核分析、染色体畸变等检测方法只能够反映细胞水平的生物效应，并且在低剂量条件下响应不足。免疫组化、原位杂交、实时荧光定量PCR、生物芯片、代谢组学等技术的发展为研究辐射标志物提供了更多可能。酶联免疫吸附(ELISA)技术利用抗体分子能与抗原分子特异性结合的特点，捕获目标蛋白并对其定性或定量分析。抗体芯片将ELISA高度集成，形成一种微型、高通量化的蛋白质分析技术，用于检测相关蛋白的表达丰度。辐射分子流行病学研究的关键是适合的辐射生物标志物，目前有研究趋势利用组学技术(基因组学、蛋白组学、代谢组学)寻找一系列分子标识形成辐射生物效应的“指纹图谱”。但开发长期低剂量辐射生物标志物依然是一项挑战，其主要原因包括：低剂量辐射引发的生物效应不够明显，分子变化敏感性较低；许多辐射效应受到半衰期和接触时间的限制，随时间恢复或消失，分子变化具有时效性。神经肽Y(neuropeptideY，NPY)普遍存在于哺乳动物，是生物体内重要的神经递质。其生理功能主要包括：促进摄食行为、调控机体能量平衡；直接对下丘脑活动产生作用，影响许多因子与激素的合成和分泌；调节血管的收缩，增强血管紧张、收缩血并抑制舒血管物质的作用；与免疫功能有密切关系，调控炎性因子、趋化因子等诸多细胞因子。神经肽Y蛋白的UniProtKB编号为P01303。尚未见到NPY与低剂量辐射生物效应的相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供NPY作为长期低剂量电离辐射暴露诊断的分子标记物的用途。本专利技术提供了NPY作为长期低剂量电离辐射暴露诊断的分子标记物的用途。进一步地，所述NPY为人血清中的NPY蛋白。本专利技术还提供了检测NPY蛋白的试剂在制备诊断长期低剂量电离辐射暴露的试剂盒中的用途。进一步地，所述检测NPY蛋白的试剂为酶联免疫吸附试验用试剂或酶联免疫分析试剂。进一步地，所述检测NPY蛋白的试剂为westernblot试剂或蛋白芯片检测方法用试剂。进一步地，所述检测NPY蛋白的试剂为检测人血清中NPY蛋白的试剂。本专利技术还提供了一种诊断长期低剂量电离辐射暴露的试剂盒，它包括用于检测NPY蛋白的试剂。进一步地，所述检测NPY蛋白的试剂为酶联免疫吸附试验用试剂或酶联免疫分析试剂。进一步地，所述检测NPY蛋白的试剂为westernblot试剂或蛋白芯片检测方法用试剂。进一步地，所述检测NPY蛋白的试剂为检测人血清中NPY蛋白的试剂。本专利技术中NPY是指人血清中的NPY蛋白；血清NPY水平是指人血清中NPY蛋白的表达水平。NPY蛋白的UniProtKB编号为P01303。本专利技术的目的在于针对电离辐射分子流行病学调查的需求，提供一种新型电离辐射生物标志物，用于长期低剂量电离辐射暴露诊断。本专利技术的关键在于，确定了人体血清中NPY蛋白表达水平与长期低剂量电离辐射受照人群显著相关，血清中NPY蛋白表达水平高低可以区分长期低剂量电离辐射暴露人群，因此可以通过检测人体血清中NPY作为辐射分子流行病调查的生物标志物，即血清中NPY蛋白可以作为长期低剂量电离辐射暴露诊断的分子标记物。本专利技术实施例具体采用抗体芯片和酶联免疫分析(ELISA)方法进行检测人体血清中NPY，但不仅仅限于该手段，可以采用现有蛋白分析技术公开的各种手段，即任何能够检测NPY的方法均可用。NPY可作为长期低剂量电离辐射暴露诊断的分子标记物，检测NPY蛋白的试剂及试剂盒，可应用于长期低剂量电离辐射暴露检测。检测NPY蛋白的方式简便，可以采用芯片或其他蛋白分析技术开展大规模、高通量的人群筛查，具有良好的应用前景。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1为抗体芯片一次性筛查16个样本中的蛋白因子示意图。图2为抗体芯片检测放射组(R，×)与对照组(C，●)的NPY水平差异(n＝8；**p<0.01)，纵坐标为芯片信号值，芯片信号值越大说明NPY水平越高。图3为放射组(R，×)与对照组(C，●)人血清NPY水平差异(n＝20；**p<0.01)。图4为放射组(R，空心点)与对照组(C，实心点)的血液细胞检验差异：■□，白细胞；●○，红细胞；▲△，血红蛋白；▼▽，血小板(n＝20；*p>0.05)。图5为放射组(R，空心点)与对照组(C，实心点)的生化免疫检验差异：◆◇肌酐；▼▽，尿酸；■□，葡萄糖；●○，总胆固醇；▲△，甘油三脂(n＝20；*p>0.05)。具体实施方式本专利技术具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。实施例1、抗体芯片初筛血清NPY水平与长期低剂量电离辐射暴露的关系选取放射职业人员(工作年限为10～30年，即长期低剂量电离辐射暴露)和非放射职业人员(非长期低剂量电离辐射暴露)各8名男性，分别作为放射组和对照组。采集空腹晨间静脉血，置于高速冷冻离心机(贝克曼，JXN-30)迅速离心(3000rpm，15min)分离获得血清1mL，保存于-80℃冰箱(赛默飞，TSE240V-ULTS)。采用广州瑞博奥(RayBiotech)公司的高密度抗体筛选芯片HumanArrayL-1000(试剂盒)，对每个血清样品可检测包括NPY在内的1000个细胞因子。1、试剂盒内容包括：玻璃芯片——Biotinlabel-basedhumanantibodyarray1and2，ItemE；标记试剂——LabelingReagent，ItemB，1张玻片配1管；终止液——StopSolution，ItemD，50本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.NPY作为长期低剂量电离辐射暴露诊断的分子标记物的用途。/n

【技术特征摘要】
1.NPY作为长期低剂量电离辐射暴露诊断的分子标记物的用途。


2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述NPY为人血清中的NPY蛋白。


3.检测NPY蛋白的试剂在制备诊断长期低剂量电离辐射暴露的试剂盒中的用途。


4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于：所述检测NPY蛋白的试剂为酶联免疫吸附试验用试剂或酶联免疫分析试剂。


5.根据权利要求3所述的用途，其特征在于：所述检测NPY蛋白的试剂为westernblot试剂或蛋白芯片检测方法用试剂。


6.根据权利要求3～5任一项所述的用...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘樱，程梦茜，雷巧，陈珊，任晓慧，熊忠华，
申请(专利权)人：中国工程物理研究院材料研究所，
类型：发明
国别省市：四川;51