一种氧氟沙星检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及免疫学技术和食品安全检测技术领域，公开了一种氧氟沙星检测试剂盒，所述氧氟沙星试剂盒包含试剂：96孔氧氟沙星酶标板；氧氟沙星标准品：0、0.1、0.25、0.5、1、5ng/mL，回收用100ng/mL；10x氧氟沙星抗体；抗体稀释液；酶标二抗；10x样本提取液；20x浓缩洗液；终止液和TMB底物。本发明专利技术的氧氟沙星检测试剂盒及其检测方法，可用于食品检测行业中氧氟沙星含量的检测，测定准确、灵敏、特异性好、重现性好、操作简单、样本前处理简单、成本低、检测量大、绿色环保、检测速度快并且易于推广，本发明专利技术制备出的氧氟沙星检测试剂盒检测限低，可达0.1ng/mL，灵敏度高，板内和板间变异系数均小于10％，样本添加回收率在89.3％‑114.8％，与其他类似物的交叉反应均较低。

【技术实现步骤摘要】
一种氧氟沙星检测试剂盒及其检测方法
本专利技术涉及免疫学技术和食品安全检测
，具体为一种氧氟沙星检测试剂盒及其检测方法。
技术介绍
氧氟沙星(OFL)是第3代喹诺酮类抗菌药物，具有高效的抗菌作用，左氧氟沙星(LVL)是氧氟沙星的左旋异构体，为半水合物，在水中溶解度为氧氟沙星的十倍，LVL的体外抗菌活性为氧氟沙星的2倍。包括口服吸收好、血药浓度高等优点，具有抗菌谱广，抗菌能力强、毒副作用低、安全性大、作用持久、生物利用度高、组织分布广、临床疗效高和良好的药代动力学性质等特点，在临床用药、兽药和水产养殖中应用较为广泛。氧氟沙星的作用机制是通过抑制细菌的DNA旋转酶的活性，从而抑制细菌DNA合成和复制而导致细菌的死亡，起到快速杀菌的作用。但随着喹诺酮类药物的广泛使用，它在动物源性食品中残留的问题以及残留可能引起的耐药性等问题日益突出并引起广大学者的关注。这种药物作为兽药和饲料添加剂大量用于动物，因此残留在动物源性食品中的可能性很大。这些残留物除直接对人造成危害外，更严重的是含较低浓度氧氟沙星药物的动物源性食品的长期大量使用，会诱使人们对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种氧氟沙星检测试剂盒，其特征在于：所述氧氟沙星试剂盒包含试剂：96孔氧氟沙星酶标板；氧氟沙星标准品：0、0.1、0.25、0.5、1、5ng/mL，回收用100ng/mL；10x氧氟沙星抗体；抗体稀释液；酶标二抗；10x样本提取液；20x浓缩洗液；终止液和TMB底物；/n所述氧氟沙星试剂盒的制备方法包括以下步骤：/n①包被：将包被原用包被液适当稀释，100uL抗原稀释液/孔来包被96孔氧氟沙星酶标板，4℃过夜；/n②洗涤：用浓缩洗液洗板3次，拍干；/n③封闭：用封闭液进行封闭，每孔180uL，37℃封闭1.5h；/n④干燥：取出酶标板，倾去孔内液体，吸水纸上拍干，对酶标板进行真空干燥，贴...

【技术特征摘要】
1.一种氧氟沙星检测试剂盒，其特征在于：所述氧氟沙星试剂盒包含试剂：96孔氧氟沙星酶标板；氧氟沙星标准品：0、0.1、0.25、0.5、1、5ng/mL，回收用100ng/mL；10x氧氟沙星抗体；抗体稀释液；酶标二抗；10x样本提取液；20x浓缩洗液；终止液和TMB底物；
所述氧氟沙星试剂盒的制备方法包括以下步骤：
①包被：将包被原用包被液适当稀释，100uL抗原稀释液/孔来包被96孔氧氟沙星酶标板，4℃过夜；
②洗涤：用浓缩洗液洗板3次，拍干；
③封闭：用封闭液进行封闭，每孔180uL，37℃封闭1.5h；
④干燥：取出酶标板，倾去孔内液体，吸水纸上拍干，对酶标板进行真空干燥，贴好封板膜，便于保存。


2.根据权利要求1所述的一种氧氟沙星检测试剂盒，其特征在于：所述包被液为0.05MPH9.6的碳酸盐缓冲液(CBS)，所述封闭液为1％BSA+10％蔗糖。


3.根据权利要求1所述的一种氧氟沙星检测试剂盒，其特征在于：所述浓缩洗液为1xPBST，所述浓缩洗液含0.05％Tween-20，所述1x样本提取液为10xPBS缓冲液。


4.根据权利要求1所述的一种氧氟沙星检测试剂盒，其特征在于：所述终止液为1M硫酸，所述TMB为四甲基联苯胺。


5.根据权利要求3所述的一种氧氟沙星检测试剂盒，其特征在于：所述PBS缓冲液由二水合磷酸二氢钠0.39g、十二水磷酸氢二钠5.54g、NaCL8.5g和蒸馏水定容至1L而成。


6.一种氧氟沙星检测试剂盒的检测方法，其特征在于：采用间接竞争ELISA法检测，操作步骤如下：
①加入50uL的标准液或样品于所设定的孔中；

【专利技术属性】
技术研发人员：邓兴朝，陈欢，甘筱静，林金昌，曾祥富，
申请(专利权)人：深圳容金科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44