一种解脂耶氏酵母表面展示方法技术

本发明专利技术提供了一种解脂耶氏酵母细胞表面展示方法，涉及生物化工技术领域，以解脂耶氏酵母菌为底盘细胞，以pYCSD为载体，使用XPR2 pre分泌信号肽引导目的蛋白质向胞外分泌，使用解脂耶氏酵母内源的YlCWP1(110)作为细胞表面锚定信号，使用柔性连接肽(G4S)2连接目的基因和YlCWP1(110)，从而减少对目的蛋白表达和折叠的影响。将目的基因克隆到pYCSD的克隆位点，转化解脂耶氏酵母，实现目的蛋白在解脂耶氏酵母细胞的表面展示。

【技术实现步骤摘要】
一种解脂耶氏酵母表面展示方法
本专利技术属于生物化工领域，具体涉及一种解脂耶氏酵母表面展示的方法及其应用。
技术介绍
近年来，多肽、蛋白质递呈技术被广泛应用于生物化学、免疫学、蛋白质工程等生命科学领域，随之出现了一系列的表面展示技术，如：噬菌体、核糖体、酵母菌、杆状病毒等多种表面展示系统。酵母作为具有细胞壁的真核生物，具有真核细胞蛋白质折叠、mRNA加工、蛋白水解、糖基化和异构化等功能，是目前应用最广泛的表面展示宿主。酵母表面展示技术作为真核展示系统并随着该技术的不断完善，它已逐渐成为现代生命科学领域一种十分有效的展示技术，在蛋白质文库筛选、蛋白质定向进化、高亲和性抗体分选、抗原/抗体库构建、亲和力成熟、疫苗的生产、免疫生物催化和生物传感器等多个领域得到发展和应用。近几年来，酵母表面展示技术在微生物酶生产应用中也发挥越来越重要的作用。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种解脂耶氏酵母细胞表面展示的方法，从而实现以解脂耶氏酵母为底盘，对任意目的蛋白进行细胞表面展示。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种解脂耶氏酵母表面展示方法，其特征在于，所述表面展示方法以解脂耶氏酵母菌为底盘细胞，以pYCSD为表面展示载体，将目的蛋白展示在解脂耶氏酵母细胞表面。/n

【技术特征摘要】
1.一种解脂耶氏酵母表面展示方法，其特征在于，所述表面展示方法以解脂耶氏酵母菌为底盘细胞，以pYCSD为表面展示载体，将目的蛋白展示在解脂耶氏酵母细胞表面。


2.根据权利要求1所述的表面展示方法，其特征在于，所述目的基因为任何需要进行表面展示的蛋白的编码基因。


3.根据权利要求1所述的表面展示载体pYCSD，其特征在于使用XPR2pre分泌信号肽引导蛋白质向胞外分泌。


4.根据权利要求1所述的表面展示载体pYCSD，其特征在于使用解脂耶氏酵母的糖基磷脂酰肌醇(Glycosylphosphatidylinositol,GPI)-细胞壁蛋白的C端110个氨基酸(YlCWP1(110)...

【专利技术属性】
技术研发人员：许敬亮，吕永坤，张辉，应汉杰，熊文龙，阿拉牧，赵云晨，宋艳慧，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：河南;41