抗S-tag鼠源单克隆抗体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了抗S‑tag鼠源单克隆抗体及其制备方法和应用，用KLH‑S‑tag融合蛋白免疫小鼠，制备出的抗S‑tag单克隆抗体与S‑tag的亲和力特异性较好，将其与琼脂糖凝胶偶联可用于纯化S‑tag标记的蛋白，HRP标记的抗S‑tag单克隆抗体可直接检测含S‑tag的多种蛋白。

【技术实现步骤摘要】
抗S-tag鼠源单克隆抗体及其制备方法和应用
本专利技术属于生物
，具体涉及抗S-tag鼠源单克隆抗体及其制备方法和应用。
技术介绍
S-tag是一段来源于胰腺核糖核酸酶(RNaseA)N末端的短肽。使用枯草杆菌蛋白酶消化RNaseA后，其中的一个肽键裂解，裂解产物即为RNaseS。RNaseS由两个片段S-多肽(N末端1-20氨基酸)和S-蛋白(N末端21-124氨基酸)组成，这两个片段之间具有相互作用力。研究发现S-多肽的前15个氨基酸(S-tag)就可以与S-蛋白产生相互结合作用，因此，S-tag可代替S-多肽。S-tag氨基酸序列为：KETAAAKFERQHMDS。S-tag具有丰富的带电和极性氨基酸残基，与蛋白连接时，可很好的改善连接蛋白的溶解性，因而S-tag常用于与蛋白进行融合表达。一直以来，蛋白的检测、固定化与纯化都是比较困难的，将目标蛋白与标签多肽融合表达的蛋白，然后利用标签多肽的蛋白纯化试剂、免疫检测试剂则可以很好的解决这个问题。目前，市面上针对S-tag的蛋白纯化试剂主要为S-蛋白琼脂糖凝胶，利用的是本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.抗S-tag鼠源单克隆抗体，其特征在于，由下述方法制备而成：/n(1)通过合成的KLH-S-tag融合蛋白免疫小鼠；/n(2)取小鼠脾脏制成脾细胞悬液，随后与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合制备杂交瘤细胞，通过合成的融合蛋白BSA-S-tag进行杂交瘤细胞的筛选，筛选出表达稳定分泌抗S-tag的单克隆抗体的杂交瘤细胞株；/n(3)将筛选出的杂交瘤细胞注射至石蜡油致敏的小鼠腹腔中，一周左右后取小鼠腹水，腹水抗体经纯化后即为抗S-tag的单克隆抗体。/n

【技术特征摘要】
1.抗S-tag鼠源单克隆抗体，其特征在于，由下述方法制备而成：
(1)通过合成的KLH-S-tag融合蛋白免疫小鼠；
(2)取小鼠脾脏制成脾细胞悬液，随后与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合制备杂交瘤细胞，通过合成的融合蛋白BSA-S-tag进行杂交瘤细胞的筛选，筛选出表达稳定分泌抗S-tag的单克隆抗体的杂交瘤细胞株；
(3)将筛选出的杂交瘤细胞注射至石蜡油致敏的小鼠腹腔中，一周左右后取小鼠腹水，腹水抗体经纯化后即为抗S-tag的单克隆抗体。

【专利技术属性】
技术研发人员：严兵，
申请(专利权)人：武汉科源安博生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42