【技术实现步骤摘要】
一种烟草或烟草制品中生物碱的手性分析方法
本专利技术属于烟草化学分析
，具体涉及一种烟草或烟草制品中生物碱的手性分析方法。
技术介绍
烟草生物碱是指一类存在于烟草中的含有氮杂环的有机化合物(蛋白质、钛类、氨基酸、氨、氨基糖、核苷酸、核酸除外)，一般具有碱性并表现出生理活性。生物碱在烟草及其制品中具有特殊的地位，是烟草重要的品质因素。烟草生物碱大多有一个手性中心，因此，烟草生物碱大多有一对对映异构体，主要包括烟碱、可替宁、新烟草碱、降烟碱、N-甲基假木贼碱等。对映异构体的代谢机理和生物活性一般具有较大差异，因此，建立烟草生物碱的高通量、高灵敏度、高选择性的手性分离方法对生物碱的代谢、积累及吸烟与健康研究具有重要意义。目前，烟碱的手性分离的方法主要有液相色谱(LC)法、超临界流体色谱(SFC)法、气相色谱(GC)法、毛细管电泳(CE)法等，对于其他烟草生物碱的研究相对较少。液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)具有快速、灵敏、重现性好、通量高等优点，在生物碱手性分离方面有广阔的应用前景，但相关研究很少。例如，20...
【技术保护点】
1.一种烟草或烟草制品中生物碱的手性分析方法，该方法包括如下步骤：/n(1)称取烟草或烟草制品，加入内标溶液和乙酸铵水溶液，振荡混匀后，超声萃取，滤液过滤后，加入甲醇，振荡，离心，得上清液；/n(2)取步骤(1)得到的上清液进行高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析；/n(3)计算样品中目标物的含量。/n
【技术特征摘要】
1.一种烟草或烟草制品中生物碱的手性分析方法，该方法包括如下步骤：
(1)称取烟草或烟草制品，加入内标溶液和乙酸铵水溶液，振荡混匀后，超声萃取，滤液过滤后，加入甲醇，振荡，离心，得上清液；
(2)取步骤(1)得到的上清液进行高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析；
(3)计算样品中目标物的含量。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述内标溶液为麦斯明-d4的甲醇溶液，浓度为8μg/mL；
优选地，在步骤(1)中，所述乙酸铵水溶液的浓度为0.05～2mol/L，优选为0.1mol/L；
优选地，在步骤(1)中，所述超声萃取的时间为30～60min，优选为30min；
优选地，在步骤(1)中，所述离心的速度为10000～15000rpm。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述高效液相色谱-串联质谱分析的色谱条件包括：色谱柱为ChiralpakIG-3色谱柱(250×4.6mm×3μm)；柱温为20℃；流动相为质量分数为0.2％的甲酸铵/甲醇溶液。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述高效液相色谱-串联质谱分析的色谱条件还包括：梯度洗脱程序为：初始流速0.4mL/min，保持12min，13min时流速升至0.8mL/min，保持17min，运行总时间为30min；进样体积为5μL。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，质谱条件为：离子源：电喷雾离子源；离子化方式：ESI(+)；检测模式：MRM模式；离子源温度(TEM)：550℃；电喷雾电压(IS)：5500V；碰撞气(CAD)：4.8×104Pa；气帘气(CUR)：2.8×105Pa；离子源气流(GS1)：3.8×105Pa；离子源气流(GS2)：4.1×105Pa；入口电压(EP)：10V；射出电压(CXP)：10V；
优选地，在步骤(2)中，目标化合物和内标的MRM质谱检测参数如下：
注：“*”表示定量离子。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤(3)中，根据采用内标标准曲线法定量计算样品中目标物的含量，所述内标标准曲线法为：配制含有目标物的系列标准工作溶液，加入内标(麦斯明-d4)，以各标准工作溶液中目标物与内标物的定量离子峰面积比为纵坐标，以各标准工作溶液中目标物的含量为横坐标制作标准工作曲线；将步骤(2)的分析结果代入标准工作曲线中，得到待测溶液中的目标物含量，再进一步计算得到样品中各目标物的含量...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈欢，韩书磊，金光祥，王红娟，付亚宁，刘彤，郭溪香，侯宏卫，胡清源，
申请(专利权)人：国家烟草质量监督检验中心，
类型：发明
国别省市：河南;41
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