一种食品基质中高氯酸盐的体内生物利用率评价方法技术

本发明专利技术提供一种食品基质中高氯酸盐的体内生物利用率评价方法，以不同的食品基质为原料，采用高氯酸盐溶液进行加标，制备不同的饲料喂养ICR小鼠，进行饮食暴露后，利用色谱质谱联用技术测定不同实验组、对照组的小鼠的血液、组织器官和尿液粪便中的高氯酸盐的含量，计算小鼠的高氯酸盐体内蓄积率和高氯酸盐生物利用率。本发明专利技术通过体内动物模型有效模拟评估高氯酸盐经人体膳食暴露后的生物利用率的情况，能够减小传统体外细胞模型生物利用率评价机体作用造成的差异，也可为食品中其他有毒有害污染物的体内生物利用率评估提供技术指导。

【技术实现步骤摘要】
一种食品基质中高氯酸盐的体内生物利用率评价方法
本专利技术属于食品安全中有毒有害物质的生物利用率评价领域，是一种食品基质中高氯酸盐的体内生物利用率评价方法。
技术介绍
高氯酸盐(ClO4-)是一种新型的持久性污染物，由于能竞争性抑制甲状腺对碘的吸收，而导致人类长期接触可能潜在的健康风险。近年来对于高氯酸盐在各种食品及人群的暴露评估时有报道，但大多数风险评估都是基于试验溶媒介质中高氯酸盐总浓度进行评估，即假设能被检测到的所有高氯酸盐都能被人体吸收，这种方式扩大了污染物的生物有效剂量，影响了风险评估的准确性。由于生物体内消化过程十分复杂，高氯酸盐进入体内后被机体吸收往往还伴随着毒性作用的影响，仅通过体外细胞模拟实验并不能完全真实反应生物体内的一系列生理生化过程，而采用动物模型可以在一定程度上可以解决这一问题，体内动物模型能有效模拟评估高氯酸盐人体经膳食暴露后的生物利用率。食品种类繁多而不同食品基质中污染物在体内的释放程度又不尽相同，因此探究不同食品中高氯酸盐生物利用率可为污染物安全限量标准的制定提供重要的科学依据。专本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种食品基质中高氯酸盐的体内生物利用率评价方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)食品基质的前处理：以不同的食品基质为原料，经过熟化、粉碎、均质处理后得到食品基质粉末；/n(2)高氯酸盐标准溶液配制：以高氯酸钠为原料，加入超纯水配置成一定浓度的高氯酸盐标准溶液；/n(3)食品基质加标：称取步骤(1)所得的不同食品基质，按不同食品基质的高氯酸盐含量的本底值加入适量步骤(2)配制得到的高氯酸盐标准溶液使食品基质的高氯酸盐含量达到预定浓度；/n(4)饲料配制：在基础饲料粉中加入适量步骤(2)配制得到的高氯酸盐标准溶液，混匀制备加标的基础饲料，将步骤(3)所得的加标的食品基质和步骤(1)所得的未...

【技术特征摘要】
1.一种食品基质中高氯酸盐的体内生物利用率评价方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)食品基质的前处理：以不同的食品基质为原料，经过熟化、粉碎、均质处理后得到食品基质粉末；
(2)高氯酸盐标准溶液配制：以高氯酸钠为原料，加入超纯水配置成一定浓度的高氯酸盐标准溶液；
(3)食品基质加标：称取步骤(1)所得的不同食品基质，按不同食品基质的高氯酸盐含量的本底值加入适量步骤(2)配制得到的高氯酸盐标准溶液使食品基质的高氯酸盐含量达到预定浓度；
(4)饲料配制：在基础饲料粉中加入适量步骤(2)配制得到的高氯酸盐标准溶液，混匀制备加标的基础饲料，将步骤(3)所得的加标的食品基质和步骤(1)所得的未加标的食品基质分别与基础饲料混合，制成加标的混合饲料和未加标的混合饲料，真空封袋后辐照杀菌；
(5)动物分组实验：以未加标的基础饲料和未加标的混合饲料喂养的小鼠为对照组，以加标的基础饲料和步骤(4)所得的加标的混合饲料喂养的小鼠为实验组进行小鼠饲养，自由进食和饮用不含高氯酸盐的超纯水，每天定时收集尿液和粪便，饲养一段时间后，小鼠被禁食一晚，称重，眼眶取血后股动脉放血处死，收集并分析小鼠的血液和组织器官；
(6)高氯酸盐的含量测定和分析：将步骤(4)的加标的基础饲料和未加标的基础饲料，步骤(5)收集的血液、组织器官和尿液及粪便样品进行测定的前处理，然后采用LC-MS/MS进行高氯酸盐的含量测定，最后通过计算高氯酸盐摄入量与粪便排出量的差值得出肠道的表观吸收量，再计算小鼠身体各部分以及尿液中高氯酸盐含量的总和即为小鼠的高氯酸盐吸收量，吸收量与摄入量的比值即为小鼠体内高氯酸盐的生物利用率，
高氯酸盐体内蓄积率％＝(组织器官中高氯酸盐含量μg+血液中高氯酸盐含量μg)/高氯酸盐摄入量μg×100％
高氯酸盐生物利用率％＝(高氯酸盐体内蓄积量μg+尿液排出量μg)/高氯酸盐摄入量μg×100％。


2.根据权利要求1所述的食品基质中高氯酸盐的体内生物利用率评价方法，其特征在于：所述步骤(1)中的食品基质选自大米、生菜、大豆、猪肉或奶粉中的任意一种或几种。


3.根据权利要求2所述的食品基质中高氯酸盐的体内生物利用率评价方法，其特征在于：所述步骤(1)中的大米、生菜、大豆、猪肉均需采用超纯水清洗干净，再煮熟，然后将熟化后的样品分别冷却至室温，再放入冰箱冷冻，待其凝固后，将其冷冻干燥，最后粉碎机碾磨过筛，得到食品基质冻干粉末，奶粉则无需碾磨，于4℃密封干燥保存。


4.根据权利要求1所述的食品基质中高氯酸盐的体内生物利用率评价方法，其特征在于：所述步骤(3)的食品基质加标的具体步骤为：将高氯酸盐标准溶液与步骤(1)所得的食品基质粉末混匀后超声处理，再将其置于恒温摇床中低温振荡均匀，随后将加标的液体样本转移至培养皿中，残留在瓶内的液体用超纯水冲洗至培养皿中，置于冰箱冷冻，待其凝固后，真空冷冻干燥，将干燥后的样品磨碎后，装入密闭容器内4℃干燥保存，得到加标的食品基质粉末。


5.根据权利要求1所述的食品基质中高氯酸盐的体内生物利用率评价方法，其特征在于：所述步骤(6)中加标基础饲料和未加标基础饲料的前处理方式为：依次称取2.0g加标饲...

【专利技术属性】
技术研发人员：柳鑫，张虎，田一媚，许琳，宫智勇，方敏，吴永宁，
申请(专利权)人：武汉轻工大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42