一种产L-赖氨酸的重组菌株及其构建方法与应用技术

本发明专利技术提供一种对谷氨酸棒杆菌中NCgl2176基因编码序列引入点突变或改善其表达的方法，所述方法可以使带有所述突变的菌株提高L‑赖氨酸的发酵产量。所述点突变是使NCgl2176基因序列第528位碱基由胸嘌呤(A)突变为胞嘧啶(C)，是编码的相应氨基酸序列第176位赖氨酸(K)被天冬酰胺(N)所取代。

【技术实现步骤摘要】
一种产L-赖氨酸的重组菌株及其构建方法与应用
本专利技术属于基因工程和微生物
，具体涉及一种具有增强的L-赖氨酸生产能力的棒杆菌属的菌株及其构建方法与应用。
技术介绍
L-赖氨酸具有促进发育、增强免疫力和提高中枢神经组织功能等生理功效，是人体和动物不能自身合成且生长必需的8种基本氨基酸之一。目前，L-赖氨酸是世界上的第二大氨基酸品种，主要生产方法是发酵法，其中谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutamicum)是赖氨酸的重要生产菌株。L-赖氨酸工业产量的约90％用作饲料工业中的营养强化剂，10％用作食品工业中的鲜味剂和甜味剂，以及医药行业中的药物中间体。对发酵法生产L-赖氨酸的改进可以涉及发酵技术如搅拌和供应氧气；或涉及营养培养基的组成，例如发酵过程中的糖浓度；或涉及将发酵液加工成合适的产品形式，例如通过干燥和造粒发酵液或离子交换色谱；或可以涉及相关微生物本身的固有性能性质。用于改善这些微生物的性能性质的方法包括诱变、突变体的选择和筛选。以这种方式获得的菌株对抗代谢物具有抗性或对于具有调节重要性的代谢物是营养本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生成L-赖氨酸的属于棒杆菌属的微生物，其特征在于，具有编码SEQ ID NO:3的氨基酸序列的多核苷酸的改善的表达；/n优选，所述改善的表达是编码SEQ ID NO:3的氨基酸序列的多核苷酸的表达增强，或者编码SEQ ID NO:3的氨基酸序列的多核苷酸具有点突变，或者编码SEQ ID NO:3的氨基酸序列的多核苷酸具有点突变且表达是增强的。/n

【技术特征摘要】
1.一种生成L-赖氨酸的属于棒杆菌属的微生物，其特征在于，具有编码SEQIDNO:3的氨基酸序列的多核苷酸的改善的表达；
优选，所述改善的表达是编码SEQIDNO:3的氨基酸序列的多核苷酸的表达增强，或者编码SEQIDNO:3的氨基酸序列的多核苷酸具有点突变，或者编码SEQIDNO:3的氨基酸序列的多核苷酸具有点突变且表达是增强的。


2.如权利要求1所述的微生物，其特征在于，编码SEQIDNO:3的氨基酸序列的多核苷酸的点突变，使得SEQIDNO:3的氨基酸序列的第176位赖氨酸被不同的氨基酸所取代；优选第176位赖氨酸被天冬酰胺所取代。


3.如权利要求1-2任一项所述的微生物，其特征在于，编码SEQIDNO:3的氨基酸序列的多核苷酸包含SEQIDNO:1的核苷酸序列。


4.如权利要求1-3任一项所述的微生物，其特征在于，所述具有点突变的多核苷酸序列是由SEQIDNO:1所示多核苷酸序列第528位碱基发生突变而形成的；
优选，所述突变包括SEQIDNO:1所示多核苷酸序列第528位碱基由腺嘌呤(A)突变为胞嘧啶(C)；
优选，所述具有点突变的多核苷酸序列包括SEQIDNO:2所示的多核苷酸序列。

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【专利技术属性】
技术研发人员：孟刚，魏爱英，贾慧萍，马风勇，周晓群，赵春光，郭小炜，田斌，
申请(专利权)人：黑龙江伊品生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23