一种基于超高压高效液相色谱串联质谱法测定土壤中的5种硝基酚类化合物的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于超高压高效液相色谱串联质谱法测定土壤中的5种硝基酚类化合物的方法，特点是包括以下步骤：(1)称取待测土壤样品后加入硅藻土，混匀后装入萃取池中，采用由二氯甲烷和正己烷混合溶液作为溶剂进行萃取，收集全部提取液，加入纯水调节至pH>12，充分振荡，静置分层后取上层水相，将下层有机相中加入溶剂，反萃取合并各次萃取所得水相，调节至pH<2后加入溶剂，振荡萃取2次，合并有机相，浓缩并转换溶剂，用甲醇定容至1mL后进样分析；(2)标准曲线制作；(3)采用超高压高效液相色谱串联质谱法进行测定，根据基质标准曲线计算得到待测土壤样品中待测物含量，优点是检测快速快、灵敏度高且准确性好。

【技术实现步骤摘要】
一种基于超高压高效液相色谱串联质谱法测定土壤中的5种硝基酚类化合物的方法
本专利技术涉及一种硝基酚类化合物的检测方法，尤其是涉及一种基于超高压高效液相色谱串联质谱法测定土壤中的5种硝基酚类化合物的方法。
技术介绍
酚类化合物是一种中等强度的化学毒物，长期饮用含酚化合物的饮用水可引起头晕或出疹瘙痒，甚至可以致癌致突变。随着工农业的发展，酚类化合物被广泛应用，造成其在水体及土壤中残留，并且很难降解，造成一定的毒害作用。目前，在国内很多环境卫生标准都已将酚类作为控制监测项目，比如《地表水环境质量标准》(GB3838-2002)就将挥发酚和苦味酸作为监测项目，《土壤环境质量建设用地土壤污染风险管控标准》(GB36600-2018)将2,4-二氯酚、2,4,6-三氯酚、五氯酚列入控制指标；《生活饮用水卫生标准》将三氯酚和五氯酚作为检测项目。土壤中的酚类化合物的提取以索氏提取、快速溶剂提取、超声波提取、微波提取等为主，索氏提取因其试剂耗量较大，提取时间较长，往往需要十几甚至二十几个小时，逐渐被后面几种操作方便、提取率高、提取时间短的方法所代替。而酚类化合物的仪器分析方法中，气相色谱(质谱)法是最为常用的分析方法，但气相色谱法适用于具有较好热稳定性和较好挥发性的目标化合物。而高效液相色谱法适用于分析高沸点、大分子、强极性、热稳定性差的目标化合物，不需要复杂的前处理步骤即可达到较高的灵敏度，所以高效液相色谱法更适合于硝基苯酚类化合物的检测。现有的高效液相色谱法检测硝基苯酚类化合物的检测方法存在土壤基质复杂，干扰多，普通高效液相色谱法对酚类测定选择性差，灵敏度低，难以精确稳定测定土壤中痕量硝基苯酚类。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种检测快速快、灵敏度高且准确性好的基于超高压高效液相色谱串联质谱法测定土壤中的5种硝基酚类化合物的方法。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种基于超高压高效液相色谱串联质谱法测定土壤中的5种硝基酚类化合物的方法，包括以下步骤：(1)前处理条件A.加速溶剂萃取法：称取待测土壤样品后，加入萃取池体积70-90％的硅藻土，混匀后装入萃取池中，采用由二氯甲烷和正己烷按体积比2:1的比例混合而成的混合溶液作为溶剂，在温度100℃，压强10.3MPa下，预热5min，静态提取5min，循环2次，用萃取池体积60％的溶剂快速冲洗萃取池，氮气吹扫60s后，收集全部提取液，待做净化分析；B.样品净化与浓缩：取步骤(1)所得的提取液中加入提取液体积2倍的纯水，用氢氧化钠溶液调节至pH>12，充分振荡，静置分层后取上层水相，将下层有机相中加入水相体积1/2的由二氯甲烷和正己烷等体积混合而成的溶剂，反萃取2～3次后弃去有机相，合并各次萃取所得水相，用盐酸溶液调节至pH<2后，加入水相体积1/2的由二氯甲烷和乙酸乙酯按体积比4：1混合而成的溶剂，振荡萃取2次，合并有机相，在自动浓缩仪上浓缩并转换溶剂，用甲醇定容至1mL后进样分析；(2)标准曲线制作硝基酚类化合物包括4-硝基酚，2,4-二硝基酚，2-甲基-4,6-二硝基酚，地乐酚和消螨酚5种，浓度均为10mg/L，将硝基酚混合标准溶液用由甲醇和水等体积混合而成的溶液稀释，配制成系列浓度为10、50、100、250、500μg/L的标准工作溶液，在空白土壤中分别加入上述混合标准溶液，以浓度为横坐标，仪器响应值(响应值＝标准品峰面积/标准品质量)为纵坐标，做基质加标标准曲线，作为试样处理液中待测物浓度定量的依据；(3)色谱-质谱分析条件色谱条件：色谱柱：thermoacquityUPLCBEHC18柱；流动相A：甲醇；流动相B：pH＝4.0的0.01mol/L甲酸铵-甲酸水溶液；梯度洗脱：0～0.2min，20％流动相A；0.2～3min，20％流动相A～60％流动相A；3～5min，90％流动相A；5～6min，20％流动相A，流速0.4mL/min；柱温30℃；进样量5μL；质谱采用电喷雾负离子电离模式、多反应监测模式进行检测，质谱离子化参数：喷雾电压3200V，鞘气流量800L/h，辅助气流量6L/min，毛细管温度350℃；(4)浓度计算方法土壤样品中待测物的含量根据如下计算公式(1)得到：式中：X－试样中待测物含量，单位为μg/kg；C－试样处理液中待测物浓度，根据基质标准曲线计算得到，单位为μg/LV—定容体积，单位为mL；m－试样体积或质量，单位为g。Wdm－样品干物质含量，％。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：本专利技术一种基于超高压高效液相色谱串联质谱法测定土壤中的5种硝基酚类化合物的方法，采用二氯甲烷和正己烷的混合溶剂提取土壤中的4-硝基酚，2,4-二硝基酚，2-甲基-4,6-二硝基酚，地乐酚，消螨酚等5种硝基酚类化合物，建立了萃取-酸碱净化-超高压液相色谱串联质谱测定土壤中这5种硝基酚类化合物的方法。样品提取后能够在5min内完成仪器分析，准确定量具体的5种污染物，方法检出限达到0.002-0.008μg/kg。超高压高效液相色谱串联质谱法具备快速简便，定性准确，灵敏度高等优点，能够满足土壤、地面沉积物等环境样品中痕量硝基酚类污染物检测的要求。附图说明图1为5种硝基酚类在流动相甲醇—水体系pH7.0中的色谱图；图2为5种硝基酚类在流动相甲醇—甲酸/甲酸铵体系pH4.0中的色谱图。具体实施方式以下结合附图实施例对本专利技术作进一步详细描述。一、具体实施例1、仪器与试剂超高压液相色谱-三重四级杆质谱联用仪(WatersAcquityTMH-classUPLC-TQD)、自动固相萃取浓缩仪、快速溶剂萃取仪(ThermoASE350)；乙腈(CH3CN)、甲醇(CH3OH)、甲酸(HCOOH)和甲酸铵(CH3COONHd4)均为色谱纯(FisherChemical)；超纯水(电阻率满足18.25MΩ·cm)；滤膜(0.22μm，聚醚砜或醋酸纤维滤膜)；0.22μm的聚四氟乙烯滤膜(津隆公司)2、基于超高压高效液相色谱串联质谱法测定土壤中的5种硝基酚类化合物2.1模拟土壤样品的制备按照实验方法进行大量试验，选取其中5种硝基酚类化合物(4-硝基酚，2,4-二硝基酚，2-甲基-4,6-二硝基酚，地乐酚，消螨酚)含量低于实验方法检出限的土壤样品作为空白土壤样品。取空白土壤样品冷冻干燥后，再在内烘箱120℃条件下，加热4h，放入干燥器，备用。在空白土壤样品中加入5种硝基酚类化合物混合标准溶液，作为模拟土壤样品；2.2前处理条件2.2.1加速溶剂萃取法准确称取10g制备好的土壤样品、加入萃取池体积70-90％的硅藻土，混匀后装入34mL的萃取池中，所用溶剂为二氯甲烷和正己烷(2：1，v/v)的混合溶剂，温度100℃，压强10.3MPa，预热5min，静态提取5min，循环2次本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于超高压高效液相色谱串联质谱法测定土壤中的5种硝基酚类化合物的方法，其特征在于包括以下步骤：/n(1)前处理条件/nA.加速溶剂萃取法：称取待测土壤样品后，加入萃取池体积70-90％的硅藻土，混匀后装入萃取池中，采用由二氯甲烷和正己烷按体积比2:1的比例混合而成的混合溶液作为溶剂，在温度100℃，压强10.3MPa下，预热5min，静态提取5min，循环2次，用萃取池体积60％的溶剂快速冲洗萃取池，氮气吹扫60s后，收集全部提取液，待做净化分析；/nB.样品净化与浓缩：取步骤(1)所得的提取液中加入提取液体积2倍的纯水，用氢氧化钠溶液调节至pH>12，充分振荡，静置分层后取上层水相，将下层有机相中加入水相体积1/2的由二氯甲烷和正己烷等体积混合而成的溶剂，反萃取2～3次后弃去有机相，合并各次萃取所得水相，用盐酸溶液调节至pH<2后，加入水相体积1/2的由二氯甲烷和乙酸乙酯按体积比4：1混合而成的溶剂，振荡萃取2次，合并有机相，在自动浓缩仪上浓缩并转换溶剂，用甲醇定容至1mL后进样分析；/n(2)标准曲线制作/n硝基酚类化合物包括4-硝基酚，2,4-二硝基酚，2-甲基-4,6-二硝基酚，地乐酚和消螨酚5种，浓度均为10mg/L，将硝基酚混合标准溶液用由甲醇和水等体积混合而成的溶液稀释，配制成系列浓度为10、50、100、250、500μg/L的标准工作溶液，在空白土壤中分别加入上述混合标准溶液，以浓度为横坐标，仪器响应值(响应值＝标准品峰面积/标准品质量)为纵坐标，做基质加标标准曲线，作为试样处理液中待测物浓度定量的依据；/n(3)色谱-质谱分析条件/n色谱条件：色谱柱：thermo acquity UPLC BEH C18柱；流动相A：甲醇；流动相B：pH＝4.0的0.01mol/L甲酸铵-甲酸水溶液；梯度洗脱：0～0.2min，20％流动相A；0.2～3min，20％流动相A～60％流动相A；3～5min，90％流动相A；5～6min，20％流动相A，流速0.4mL/min；柱温30℃；进样量5μL；/n质谱采用电喷雾负离子电离模式、多反应监测模式进行检测，质谱离子化参数：喷雾电压3200V，鞘气流量800L/h，辅助气流量6L/min，毛细管温度350℃；/n(4)浓度计算方法/n土壤样品中待测物的含量根据如下计算公式(1)得到：/n...

【技术特征摘要】
1.一种基于超高压高效液相色谱串联质谱法测定土壤中的5种硝基酚类化合物的方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)前处理条件
A.加速溶剂萃取法：称取待测土壤样品后，加入萃取池体积70-90％的硅藻土，混匀后装入萃取池中，采用由二氯甲烷和正己烷按体积比2:1的比例混合而成的混合溶液作为溶剂，在温度100℃，压强10.3MPa下，预热5min，静态提取5min，循环2次，用萃取池体积60％的溶剂快速冲洗萃取池，氮气吹扫60s后，收集全部提取液，待做净化分析；
B.样品净化与浓缩：取步骤(1)所得的提取液中加入提取液体积2倍的纯水，用氢氧化钠溶液调节至pH>12，充分振荡，静置分层后取上层水相，将下层有机相中加入水相体积1/2的由二氯甲烷和正己烷等体积混合而成的溶剂，反萃取2～3次后弃去有机相，合并各次萃取所得水相，用盐酸溶液调节至pH<2后，加入水相体积1/2的由二氯甲烷和乙酸乙酯按体积比4：1混合而成的溶剂，振荡萃取2次，合并有机相，在自动浓缩仪上浓缩并转换溶剂，用甲醇定容至1mL后进样分析；
(2)标准曲线制作
硝基酚类化合物包括4-硝基酚，2,4-二硝基酚，2-甲基-4,6-二硝基酚，地乐酚和消螨酚5种，浓度均为10mg/L，将硝基酚混合标准溶液用由甲醇和水等体积混合而成的溶液稀释...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾以律，包晓丽，徐呈祥，陈冰慧，
申请(专利权)人：浙江宏盛科技信息服务有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33