一种高纯度香叶基黄酮A的分离纯化工艺制造技术

本申请公开了一种制备高纯度香叶基黄酮A的方法，至少包括以下步骤：a)大麻花叶原料前处理；b)将经前处理的大麻花叶原料经溶剂I提取，提取液浓缩，分离得上清液；c)将所述上清液经过大孔吸附树脂吸附，溶剂II洗出，浓缩，得到香叶基黄酮A粗品；d)将所述香叶基黄酮A粗品经溶剂III转溶，分离得不溶物；e)将所述不溶物重结晶，得到香叶基黄酮A初品。该分离纯化工艺，产品转移率较高，且香叶基黄酮A纯度可以达到95％以上。操作中选择以液封膜隔绝空气，快速真空干燥，可保持成品本色。该工艺可以实现生产放大，大孔吸附树脂在合适的再生处理后，可反复使用，有极好的工业化制备前景。

【技术实现步骤摘要】
一种高纯度香叶基黄酮A的分离纯化工艺
本申请涉及一种高纯度香叶基黄酮A的分离纯化工艺，属于化工领域。
技术介绍
汉麻全株已发现化合物共500多种，其中黄酮类化合物已报道的有20多种，常见的有芹黄素，木樨草素，槲皮素，荭草素，芦丁，牡荆素等。另外，香叶基黄酮A(CannflavinA)和香叶基黄酮B(CannflavinB)则为大麻植中特有的两种类黄酮化合物。大麻黄酮类化合物已被证明具有多种药理活性，如Barrett等报道了大麻中的香叶基黄酮A/B可极大强化抗炎作用，并且对类风湿性滑膜细胞中前列腺素E-2的抑制作用是阿司匹林的30倍(Barrett,M.L.,A.M.Scutt,etal.,"CannflavinAandB,prenylatedflavonesfromCannabissativa".Experientia42(4):(1986)452-453)。美国专利US20190083452A1，公开了大麻黄酮及其衍生物用于预防和治疗神经退行性疾病方面的通途。美国专利US20180353462A1，公开了大麻黄酮类衍生物用于治疗和预防癌症方面的用途。但是至今，这一植物源的化合物并没有得到开发应用。工业大麻花叶中的香叶基黄酮A含量约为万分之二，相对的，香叶基黄酮B的含量则低至十万分之一，因而样品大量制备比较困难，目前市面甚至完全没有标准品出售，当前文献中能查到的分离方法，基本都仅限于mg级的植化分离，譬如以氯仿9：1甲醇的提取，或者依次以石油醚正己烷，氯仿，乙酸乙酯甲醇水的提取，再经过硅胶柱层析等手段纯化，只能制备少量样品，不适宜工业化生产。因此，香叶基黄酮A的综合开发利用，首先急需解决制备方法，目前，工业化的制备方案，国内外均未见报道。
技术实现思路
本专利技术提供了一种可工业化制备高纯度香叶基黄酮A的工艺。其中香叶基黄酮A纯度可以达到95％以上。根据本申请的一个方面，提供了一种制备高纯度香叶基黄酮A的方法，其特征在于，至少包括以下步骤：a)大麻花叶原料前处理；b)将经前处理的大麻花叶原料经溶剂I提取，提取液浓缩，分离得上清液；c)将所述上清液经过大孔吸附树脂吸附，溶剂II洗出，浓缩，得到香叶基黄酮A粗品；d)将所述香叶基黄酮A粗品经溶剂III转溶，分离，得到不溶物；e)将所述不溶物重结晶，得到香叶基黄酮A初品。可选地，步骤a)中，所述前处理包括：将大麻花叶粉碎至10-60目。可选地，所述前处理还包括脱脂。可选地，所述脱脂包括：将大麻花叶粉碎后得到的10-60目的大麻花叶原料，经石油醚、正己烷或正庚烷浸提。可选地，所述脱脂包括：将大麻花叶粉碎后得到的10-60目的大麻花叶原料，经石油醚、正己烷或正庚烷浸提2-4h。可选地，步骤a)包括：将大麻花叶粉碎后得到的10-60目的大麻花叶原料，经2-5倍(M/V)量石油醚(或正己烷，正庚烷)浸提2-4h后，烘渣机减压(45-55℃，-0.06～-0.08MPa)烘干，得到前处理后的大麻花叶原料。可选地，步骤a)包括：将大麻花叶，烘烤至水分15％以下(烘烤步骤的作用是易于储存)粉碎至10-60目得到未脱脂的大麻花叶原料；而将此粉碎至10-60目的原料，经2-5倍(M/V)量石油醚(或正己烷，正庚烷)浸提2-4h后，烘渣机减压(45-55℃，-0.06～-0.08MPa)烘干，即得前处理后的大麻花叶原料。通过脱脂可以除去大麻花叶原料中的大部分油脂，减轻后处理压力。可选地，步骤a)中，大麻花叶原料用量在300kg以上。可选地，步骤a)中，大麻花叶原料用量在300kg-1200kg之间。可选地，步骤b)中，所述溶剂I选自甲醇、乙醇、丙酮中的至少一种。可选地，步骤b)中，用以大麻花叶原料质量5-20倍体积(W/V)的65-95wt％溶剂I冷浸或热回流1-3h，提取2-4次，合并浓缩至溶剂I浓度50-70wt％，分离得上清液。可选地，步骤c)中，所述大孔吸附树脂选自HPD系列、ADS系列、HZ系列、XAD系列、SP系列大孔吸附树脂或聚酰胺树脂中的至少一种。可选地，所述大孔吸附树脂选自AB-8、D-101、HPD700、XAD2、XDA-8、LSA-7、D-941、DM-130、ADS600、ADS-17、SP-825、HPD-600和SP825大孔吸附树脂中的至少一种。可选地，所述大孔吸附树脂的用量是所述大麻花叶原料的投料质量的10-75％。可选地，所述大孔吸附树脂的用量是所述大麻花叶原料的投料质量的15-60％。可选地，所述大孔吸附树脂的用量是所述大麻花叶原料的投料质量的18-53％。可选地，所述大孔吸附树脂的用量是所述大麻花叶原料的投料质量的上限选自15％、18％、20％、30％、40％、42.5％、50％、52.7％、53％、60％、70％或75％；下限选自10％、15％、18％、20％、30％、40％、42.5％、50％、52.7％、53％、60％或70％。本申请中，所用大孔吸附树脂具有以下结构特点：1)树脂存在永久性微孔，其大小、孔道的数量和分布情况，可根据需要在制备过程中通过致孔剂和交联度来控制调节，同时，给予了使用者选择空间。例如在实际实验中，发现微孔大小在80-100A°的优于其他规格。(2)由于树脂内部为多孔海绵状，因而表面积极大(大到1000m2/g以上)，可以做规模化处理。(3)在合适的再生处理后，填料可反复使用，极大降低成本消耗。本申请中，使用大孔吸附树脂，可以做规模化处理，在合适的再生处理后，填料可反复使用，极大降低成本消耗。2-5BV(BV指柱床体积，即树脂层实际装柱体积)95wt％乙醇冲柱即可完成再生，反复使用，实验室重复实验考察，可重复50次以上，吸附和解吸不受影响。本申请所用的大孔吸附树脂可以处理大量的经醇提后分离得到的含有香叶基黄酮A的上清液。现有的硅胶柱层析等纯化手段，只能处理极少量的样品，且纯化时间较长。利用大孔吸附树脂，可实现工业级的量的处理，且处理时间周期较短。可选地，步骤c)中，所述溶剂II选自甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮中的至少一种。可选地，步骤c)中，上清液经过大孔吸附树脂，经30～60wt％溶剂II洗出得到香叶基黄酮A粗品。可选地，步骤c)中，上清液经过大孔吸附树脂，70～100wt％溶剂II部分洗出大麻二酚(CBD)为主的大麻素组分。可选地，步骤d)中，所述溶剂III选自非极性烷烃、卤化烷、酯、高级脂肪醇中的至少一种。可选地，所述非极性烷烃选自石油醚、乙醚、正己烷、正庚烷中的至少一种。可选地，所述卤化烷选自二氯甲烷、氯仿中的至少一种。可选地，所述酯选自乙酸乙酯、醋酸丁酯中的至少一种。可选地，所述高级脂肪醇选自正辛醇、仲辛醇、庚醇中的至少一种。本申请中，高级脂肪醇是指“碳原子数为5-10之间的脂肪醇”。可选地，所述溶剂III选自正庚本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备高纯度香叶基黄酮A的方法，其特征在于，至少包括以下步骤：/na)大麻花叶原料前处理；/nb)将经前处理的大麻花叶原料经溶剂I提取，提取液浓缩，分离得上清液；/nc)将所述上清液经过大孔吸附树脂吸附，溶剂II洗出，浓缩，得到香叶基黄酮A粗品；/nd)将所述香叶基黄酮A粗品经溶剂III转溶，分离，得到不溶物；/ne)将所述不溶物重结晶，得到香叶基黄酮A初品。/n

【技术特征摘要】
1.一种制备高纯度香叶基黄酮A的方法，其特征在于，至少包括以下步骤：
a)大麻花叶原料前处理；
b)将经前处理的大麻花叶原料经溶剂I提取，提取液浓缩，分离得上清液；
c)将所述上清液经过大孔吸附树脂吸附，溶剂II洗出，浓缩，得到香叶基黄酮A粗品；
d)将所述香叶基黄酮A粗品经溶剂III转溶，分离，得到不溶物；
e)将所述不溶物重结晶，得到香叶基黄酮A初品。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤a)中，所述前处理包括：将大麻花叶粉碎至10-60目；
优选地，所述前处理还包括脱脂；
所述脱脂包括：将大麻花叶粉碎后得到的10-60目的大麻花叶原料，经石油醚、正己烷或正庚烷浸提。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤b)中所述溶剂I选自甲醇、乙醇、丙酮中的至少一种。


4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤b)中，用以大麻花叶原料质量5-20倍体积的65-95wt％溶剂I冷浸或热回流1-3h，提取2-4次，合并浓缩至溶剂I浓度50-70wt％，分离得上清液。


5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤c)中，所述大孔吸附树脂选自HPD系列、ADS系列、HZ系列、XAD系列、SP系列大孔吸附树脂或聚酰胺树脂中的至少一种；
优选地，所述大孔吸附树脂选自AB-8、D-101、HPD700、XAD2、XDA-8、LSA-7、D-941、DM-130、ADS600、ADS-17、SP-825、HPD-600和SP825大孔吸附树脂中的至少...

【专利技术属性】
技术研发人员：柳旭，高伟博，李惠龙，赵丽梅，常坦然，李如彦，李庆中，
申请(专利权)人：云南汉盟制药有限公司，
类型：发明
国别省市：云南;53