本发明专利技术公开了一种用于ELISA试剂盒的含蔗糖的生物制品稳定剂，本发明专利技术先将碳酸钾和二氧化钛经混合煅烧，酸化后制得四钛酸，再用柠檬酸和二乙烯三胺改性壳聚糖，制得改性壳聚糖，然后用环氧大豆油改性羟乙基纤维素，制得改性羟乙基纤维素，最后，将蔗糖与海藻糖混合，并加入吐温‑30，生物防腐剂Proclin 300，双蒸水，四钛酸，1改性壳聚糖和改性羟乙基纤维素，搅拌反应后，在加入催化剂，继续反应后，用银离子洗涤后，去除沉淀，得含蔗糖的生物制品稳定剂。本发明专利技术制备的含蔗糖的生物制品稳定剂具有较好的稳定性，可延长生物制品的储存时间，并减少金属离子对生物制品的影响。
【技术实现步骤摘要】
用于ELISA试剂盒的含蔗糖的生物制品稳定剂
本专利技术涉及生物材料保存
，具体是一种用于ELISA试剂盒的含蔗糖的生物制品稳定剂。
技术介绍
随着生物技术的不断发展，生物制品在疾病的诊断、治疗，以及人类对生命本质的追寻等领域发挥了主要作用，但是一些常规蛋白、抗原、抗体、生物检测诊断试剂盒等生物制品容易受外界因素的影响而失去活性，这就需要一种优良的保护剂降低外界环境变化对这类生物制品的影响。蛋白质作为“中心法则”的最后一环，是生物体最为重要的结构物质也是各种生命活动的基础。目前对于生命活动微观领域的研究，主要还是以研究蛋白质的结构和功能为主；但是有些蛋白在体外环境分子结构不稳定，容易被破坏而丧失生物活性，这就需要一种稳定剂来保持蛋白结构的稳定性，维持其原有活性。抗体作为医学诊断、治疗、检测领域应用最为广泛的蛋白产品，也是最具有市场价值前景的蛋白产品之一。ELISA(酶联免疫吸附试验)技术是抗体在诊断和检测领域应用最为成功的技术，目前广泛用于临床疾病的诊断以及生物学基础研究。目前市场上一般的ELISA试剂盒，在排除人为操作以及原材料造成的影响外，普遍存在稳定性差、检测结果不准确等问题。而造成这些问题的绝大多数原因是试剂盒中包含的抗体、抗原等物质由于受外界金属离子、pH变动、温度变化等的影响而导致的活性或者结合能力下降。稳定剂的使用可以明显提高蛋白的稳定性，从而增加ELISA试剂盒的检测稳定性。传统的ELISA试剂盒稳定剂通常包含海藻糖、BSA等物质，这些稳定剂存在价格昂贵，配制过程繁琐，并且适用范围有限等缺陷。例如：对于含有小牛血清蛋白成分的ELISA试剂盒，一方面不能用于牛以及与其亲缘关系较近物种的ELISA检测，另一方面可能存在疯牛病病原体，具有潜在的生物危险性。因此，需要研究和开发一种具有较好稳定性能，且价格较低的生物制品稳定剂。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种用于ELISA试剂盒的含蔗糖的生物制品稳定剂及其制备方法，以解决现有技术中的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种用于ELISA试剂盒的含蔗糖的生物制品稳定剂，所述含蔗糖的生物制品稳定剂主要包括以下重量份数的原料组分：10～12份蔗糖，10～15份海藻糖，3～5份表面活性剂和120～200份双蒸水；海藻糖和双蒸水的为产品的基本配方，在加入产品中后提高产品的实用性。一种用于ELISA试剂盒的含蔗糖的生物制品稳定剂，所述含蔗糖的生物制品稳定剂还包括以下重量份数的原料组分：4～8份四钛酸，10～12份改性壳聚糖和8～15份改性羟乙基纤维素，四钛酸的加入，可提高产品中和金属离子的能力，提高产品的稳定性，改性壳聚糖和改性羟乙基纤维素的加入可在产品中形成微交联的网络结构，从而使产品在使用过程中形成保护网络，在提高产品对金属离子的吸附性的同时可提高从产品的抗菌性，提高产品使用后生物制品的稳定性。作为优化，所述表面活性剂为吐温-20或吐温-30中任意一种。作为优化，所述四钛酸由碳酸钾和二氧化钛经混合煅烧，酸化后制得；所述改性壳聚糖有壳聚糖经柠檬酸和二乙烯三胺改性制得；所述改性羟乙基纤维素由羟乙基纤维素经环氧大豆油改性制得。作为优化，所述含蔗糖的生物制品稳定剂包括以下重量份数的原料组分：10份蔗糖，15份海藻糖，4份吐温-30，2份生物防腐剂Proclin300，160份双蒸水，5份四钛酸，10份改性壳聚糖和12份改性羟乙基纤维素。作为优化，一种用于ELISA试剂盒的含蔗糖的生物制品稳定剂的制备方法主要包括以下步骤：(1)将碳酸钾与二氧化钛混合研磨后，煅烧，再进行酸处理，过滤，洗涤，干燥；(2)将壳聚糖与柠檬酸混合，并加入二乙烯三胺，搅拌反应后，旋蒸浓缩；(3)将羟乙基纤维素与环氧大豆油混合反应后，旋蒸浓缩；(4)将蔗糖与双蒸水混合，并加入表面活性剂，步骤(1)所得物质，步骤(2)所得物质和步骤(3)所得物质，搅拌反应后，再加入催化剂，继续反应后，洗涤；(5)将步骤(4)所得物质与海藻糖混合，并加入生物防腐剂Proclin300，搅拌混合；(6)对步骤(5)所得物质进行指标分析。作为优化，一种用于ELISA试剂盒的含蔗糖的生物制品稳定剂的制备方法主要包括以下步骤：(1)将碳酸钾与二氧化钛按质量比1：3～1：4混合研磨10～12h后，于温度为800～1000℃的条件下煅烧1～3h，得四钛酸钾，将四钛酸钾与质量分数为10～15％的盐酸溶液按质量比1：10～1：12混合，于功率为800～1000w的微波条件下反应2～4h后，过滤，洗涤，干燥；(2)将壳聚糖与柠檬酸按质量比3：1～4：1混合于烧杯中，并向烧杯中加入壳聚糖质量10～18倍的质量分数为2％的醋酸溶液，壳聚糖质量0.2～0.5倍的二乙烯三胺，于频率为45～55kHz的条件下超声分散20～30min后，得壳聚糖混合溶液，将壳聚糖混合溶液与石蜡按体积比3：1混合于烧瓶中，并向烧瓶中加入壳聚糖混合溶液体积0.02～0.10倍的司盘-80和壳聚糖混合溶液体积0.04～0.08倍的戊二醛，调节烧瓶内物料的pH至8.5～10.0，于温度为70～75℃，转速为250～320r/min的条件下搅拌反应2～3h后，于温度为60～90℃，转速为120～140r/min，压力为500～600kPa的条件下旋蒸浓缩至含水率为0.01％；(3)将羟乙基纤维素与环氧大豆油按质量比1：1混合于三口烧瓶中，并向三口烧瓶中加入羟乙基纤维素质量40～50倍的二甲基亚砜和羟乙基纤维素质量1～5倍的四氯化锡溶液，于温度为40～60℃，转速为300～320r/min的条件下混合反应30～40min后，于温度为60～90℃，转速为120～140r/min，压力为500～600kPa的条件下旋蒸浓缩至含液率为0.1～0.2％；(4)将蔗糖与双蒸水按质量比1：10～1：15混合于反应釜中，并向反应釜中依次加入蔗糖质量0.2～0.3倍的吐温-30，蔗糖质量0.4～0.6倍的步骤(1)所得物质，蔗糖质量0.9～1.1倍的步骤(2)所得物质和蔗糖质量0.7～1.0倍的步骤(3)所得物质，于温度为30～45℃，转速为300～380r/min的条件下搅拌混合30～40min后，再向反应釜中加入蔗糖质量0.1～0.2倍的催化剂，于温度为60～80℃，转速为280～350r/min的条件下，继续反应2～4h后，得预处理坯料，将预处理坯料与质量分数为5～8％的银离子溶液按质量比3：1混合，于温度为50～80℃，转速为260～350r/min的条件下搅拌反应2～3h后，过滤，去除滤渣；(5)将步骤(4)所得物质与海藻糖按质量比15：1～20：1混合，并加入步骤(4)所得物质0.01～0.02倍的生物防腐剂Proclin300，搅拌混合；(6)对步骤(5)所得物质进行指标分析。作为优化，步骤(3)所述四氯化锡溶液为将四氯化锡与二甲基亚砜按质量比1：6～1：8混合，得四氯化锡溶液。<本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于ELISA试剂盒的含蔗糖的生物制品稳定剂，其特征在于：按重量份数计，主要包括以下重量份数的原料组分：10份蔗糖，15份海藻糖，4份吐温-30，2份生物防腐剂Proclin 300，160份双蒸水，5份四钛酸，10份壳聚糖和12份改性羟乙基纤维素；/n生物制品稳定剂的制备具体包括以下步骤：/n(1)将碳酸钾与二氧化钛按质量比1：3～1：4混合研磨12h后，于温度为800℃的条件下煅烧2h，得四钛酸钾，将四钛酸钾与质量分数为15％的盐酸溶液按质量比1：12混合，于功率为8000w的微波条件下反应3h后，过滤，得滤饼，将滤饼用去离子水洗涤3次后，于温度为80℃的条件下干燥2h；/n(2)将羟乙基纤维素与环氧大豆油按质量比1：1混合于三口烧瓶中，并向三口烧瓶中加入羟乙基纤维素质量50倍的二甲基亚砜和羟乙基纤维素质量4倍的四氯化锡溶液，于温度为50℃，转速为320r/min的条件下混合反应40min后，于温度为80℃，转速为140r/min，压力为600kPa的条件下旋蒸浓缩至含液率为0.2％；/n(3)将蔗糖与双蒸水按质量比1：15混合于反应釜中，并向反应釜中依次加入蔗糖质量0.3倍的吐温-30，蔗糖质量00.6倍的步骤(1)所得物质，蔗糖质量1.1倍的壳聚糖和蔗糖质量1.0倍的步骤(2)所得物质，于温度为45℃，转速为350r/min的条件下搅拌混合40min后，再向反应釜中加入蔗糖质量0.2倍的催化剂，于温度为80℃，转速为350r/min的条件下，继续反应4h后，得预处理坯料，将预处理坯料与质量分数为6％的银离子溶液按质量比3：1混合，于温度为80℃，转速为350r/min的条件下搅拌反应3h后，过滤，去除滤渣；/n(4)将步骤(3)所得物质与海藻糖按质量比18：1混合，并加入步骤(3)所得物质0.02倍的生物防腐剂Proclin 300，于温度为30℃，转速为300r/min的条件下搅拌混合2h；/n(5)对步骤(4)所得物质进行指标分析；/n步骤(2)所述四氯化锡溶液为将四氯化锡与二甲基亚砜按质量比1：8混合，得四氯化锡溶液；步骤(3)所述催化剂为氯化镁。/n...
【技术特征摘要】
1.一种用于ELISA试剂盒的含蔗糖的生物制品稳定剂，其特征在于：按重量份数计，主要包括以下重量份数的原料组分：10份蔗糖，15份海藻糖，4份吐温-30，2份生物防腐剂Proclin300，160份双蒸水，5份四钛酸，10份壳聚糖和12份改性羟乙基纤维素；
生物制品稳定剂的制备具体包括以下步骤：
(1)将碳酸钾与二氧化钛按质量比1：3～1：4混合研磨12h后，于温度为800℃的条件下煅烧2h，得四钛酸钾，将四钛酸钾与质量分数为15％的盐酸溶液按质量比1：12混合，于功率为8000w的微波条件下反应3h后，过滤，得滤饼，将滤饼用去离子水洗涤3次后，于温度为80℃的条件下干燥2h；
(2)将羟乙基纤维素与环氧大豆油按质量比1：1混合于三口烧瓶中，并向三口烧瓶中加入羟乙基纤维素质量50倍的二甲基亚砜和羟乙基纤维素质量4倍的四氯化锡溶液，于温度为50℃，转速为320r/min的条件下混合反应40min后，于温度为80℃，转速为140r/min，压力为600kPa的条件下旋蒸浓缩至含液率为0...
【专利技术属性】
技术研发人员：裴广华，
申请(专利权)人：裴广华，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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