一种突变的高丝氨酸激酶及其应用制造技术

技术编号:26365277 阅读:37 留言:0更新日期:2020-11-19 23:34
本发明专利技术涉及氨基酸技术领域,具体公开了一种突变的高丝氨酸激酶及其应用。本发明专利技术所述突变的高丝氨酸激酶第195位氨基酸发生突变。本发明专利技术通过诱变筛选获得了苏氨酸产量较佳的菌株,通过验证获得了高丝氨酸激酶R195Q突变对于苏氨酸以及异亮氨酸的合成是有效位点的结论,其编码基因被转导的微生物中苏氨酸以及异亮氨酸产生能力得到显著改善,同时能够更好的解除苏氨酸的反馈抑制作用。

【技术实现步骤摘要】
一种突变的高丝氨酸激酶及其应用
本专利技术涉及氨基酸修饰
,更具体的说是涉及一种突变的高丝氨酸激酶及其应用。
技术介绍
L-苏氨酸和L-异亮氨酸,均是人体必需氨基酸。广泛应用于食品、饲料、化妆品与医药等行业。两者均是使用通过高丝氨酸激酶从高丝氨酸产生的高丝氨酸磷酸。因此,为了经由发酵方法产生氨基酸,必须将生物合成途径中使用的酶的活性保持在一定水平或更高水平,并且已经对其进行了深入研究。L-苏氨酸合成途径中有3个关键酶受到反馈抑制作用,分别是天冬氨酸激酶(AK),高丝氨酸脱氢酶(HD),高丝氨酸激酶(HK)。异亮氨酸是苏氨酸的下游产物,所以对于异亮氨酸的合成路径来说,除上述3种酶之外,还有苏氨酸脱氢酶(TD)和乙酰羟丁酸合成酶(AHAS)。其中高丝氨酸激酶,编码基因为thrB,以竞争性抑制机制被L-苏氨酸抑制。这使得解除苏氨酸对高丝氨酸激酶的反馈抑制变得困难。最近,已有关于thrB对L-苏氨酸的反馈抑制的脱敏的报道。在2018年,Choong-MinKang发表了一篇在thrB基因中引入突变位点A20G解除苏氨酸对thrB基因的反馈本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种突变的高丝氨酸激酶,其特征在于,第195位氨基酸发生突变。/n

【技术特征摘要】
1.一种突变的高丝氨酸激酶,其特征在于,第195位氨基酸发生突变。


2.根据权利要求1所述突变的高丝氨酸激酶,其特征在于,第195位氨基酸由精氨酸突变为谷氨酰胺。


3.根据权利要求2所述突变的高丝氨酸激酶,其特征在于,蛋白序列如SEQIDNO:3所示。


4.权利要求1-3任意一项所述突变的高丝氨酸激酶的编码基因。


5.根据权利要求4所述编码序列,其特征在于,所述编码基因的序列如SEQIDNO:2所示。


6.权利要求1-3任意一项所述突变的高丝氨酸激酶或权利要求4-5任意一项所述编码基因在生产苏氨酸和/或异亮氨酸中的应用。


7.权利要求1-3任意一项所述突变的高丝氨酸激酶或权利要求4-5任意一项所述编码基因在构建生产苏氨酸和/或异亮氨酸的工程菌中的应用。


8.根据权利要求7所述应用,其特征在于,所述工程菌为棒状杆菌属。


9.一种生产苏氨酸和/或异亮氨酸的工程菌,其特征在于,高丝氨酸激酶第195位氨基酸发生突变或转化有编码表达第195位氨基酸发生突变的高丝氨酸的表达载体。


10.根据权利要求9所述工程菌,其特征在于,高丝氨酸激酶第195位氨基酸由精氨酸...

【专利技术属性】
技术研发人员:张晓云程江红吴涛赵津津李岩
申请(专利权)人:廊坊梅花生物技术开发有限公司
类型:发明
国别省市:河北;13

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