一种鸡卵泡颗粒的体外培养方法技术

本发明专利技术属于细胞培养领域，具体涉及一种鸡卵泡颗粒的体外培养方法。具体技术方案为：一种细胞培养基，在M199基础培养基中，添加1wt％的双抗，1wt％的复合维生素、1wt％的非必需氨基酸、5wt％的鸡血清。本发明专利技术提供了一种新的、针对鸡卵颗粒细胞的培养基，并进一步提供了培养方法。使用该培养基和培养方法，可有效增强鸡颗粒细胞在体外培养下的贴壁能力和增殖能力。

A culture method of chicken follicular granules in vitro

【技术实现步骤摘要】
一种鸡卵泡颗粒的体外培养方法
本专利技术属于细胞培养领域，具体涉及一种鸡卵泡颗粒的体外培养方法。
技术介绍
颗粒细胞在禽类卵泡生长发育中具有重要作用，且为影响产蛋性能的关键因素。因此，建立高效的家禽颗粒细胞体外培养体系，对研究卵泡发育及其调控机制具有重要意义，是提高家禽产蛋性能研究的必要条件。另外，鸡高强度重复排卵对卵巢肿瘤的影响，与妇女卵巢肿瘤具有显著的相似性。因此，鸡颗粒细胞培养还可为人类卵巢癌的相关研究提供有价值的动物模型。目前，颗粒细胞体外培养普遍面临传代困难及无法长时间培养的问题，使得利用原代细胞开展基因功能的相关研究受到阻碍。因此，延长鸡颗粒细胞在体外培养时间，对于研究颗粒细胞参与鸡产蛋调控以及人类卵巢肿瘤发生的分子机制具有重要意义。在颗粒细胞体外培养过程中，颗粒细胞会出现贴壁难、停止生长，急速死亡等问题。细胞基质作为一种细胞支持物，是构成细胞微环境的重要组成部分，其包被在培养皿表面后能改善细胞生长特性，促进细胞贴壁、增殖和分化。不同细胞对细胞基质的种类存在一定的选择性；尚未有相关研究表明，何种细胞基质适合用于鸡颗粒本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞培养基，其特征在于：在M199基础培养基中，添加1wt％的双抗，1wt％的复合维生素、1wt％的非必需氨基酸、5wt％的鸡血清。/n

【技术特征摘要】
1.一种细胞培养基，其特征在于：在M199基础培养基中，添加1wt％的双抗，1wt％的复合维生素、1wt％的非必需氨基酸、5wt％的鸡血清。


2.根据权利要求1所述的细胞培养基，其特征在于：所述双抗为青霉素、链霉素。


3.根据权利要求1所述的细胞培养基，其特征在于：所述非必需氨基酸包括：L-丙氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-甘氨酸、L-丝氨酸、L-脯氨酸和L-谷氨酸。


4.权利要求1～3所述细胞培养基在培养禽类颗粒细胞中的应用。


5.根据权利要求4所述细胞培养基在培养禽类颗粒细胞中的应用，其特征在于：包括如下步骤：
(1)获得颗粒细胞；
(2)在培养容器内铺设细胞基质；
(3)使用所述细胞培养基对颗粒细胞重悬，将重悬后的颗粒细胞接种到培养容器中。


6.根据权利要求5所述细胞培养基在培养禽类颗粒细胞中的应用，其特征在于：步骤(1)所述获得颗粒细胞的方法包括如下步骤：
(1.1)无菌取出直径为6～8mm的小黄卵泡，洗净；
(1.2)在卵泡膜上切口，漏掉卵黄后翻转卵泡膜，使内膜的颗粒细胞层暴露于外；
(1.3)使颗粒细胞层从复合层上脱落，收...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏泽辉，王丹，李鹏程，祝梦琦，董小琳，贾存灵，徐坤，张智英，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61