获得肝脏细胞的方法和组合物技术

本文提供获得肝脏细胞的方法和组合物。本文提供一种用于从多能干细胞诱导产生肝脏细胞的试剂盒或细胞培养基组合物，所述组合物包含下述诱导剂：(1)Activin A，(2)BMP信号转导途径调节物，(3)FGF信号转导途径调节物，(4)Wnt信号途径调节物，(5)生长因子，(6)TGFβ受体/ALK5抑制剂。本文还提供通过所述试剂盒或细胞培养基组合物制备肝脏细胞的方法、通过所述的方法得到的肝脏细胞，含有所述肝脏细胞的人工肝装置和/或所述肝脏细胞用于制备人工肝装置的用途，以及肝细胞大规模培养方法。

【技术实现步骤摘要】
获得肝脏细胞的方法和组合物专利
本专利技术总体上涉及获得肝脏细胞的方法和组合物。具体而言，本专利技术涉及用于将从诱导多能干细胞获得肝脏细胞的方法和组合物。
技术介绍
(一)诱导多能干细胞多能干细胞可以自我更新并且分化为所有体细胞类型。已经通过向卵母细胞中的核移植或通过限定因子的异位表达将体细胞重编程而成为多能性的。例如，2006年8月，日本京都大学再生医科学研究所教授山中伸弥(Yamanaka)实验室首先宣布在小鼠的成纤维细胞中导入4个基因(Oct4，Sox2，c-Myc和KLF4)成功地将其诱导重编程成为全能性的干细胞，其性质和胚胎干细胞类似。他们发现，仅转导Oct4，Sox2，c-Myc，KLF4就可以诱导的多潜能干细胞(iPS细胞-InducedPluripotentStemCells，即“诱导的多潜能干细胞”)。该IPS细胞拥有正常的核型，表达类似胚胎干细胞的分子标志，可以在体外被诱导分化为内、中、外三个胚层的终末分化的细胞，能够在裸鼠体内形成畸胎瘤，在畸胎瘤中含有内、中、外三个胚层的分化细胞。此外，和胚胎干细胞一样，IPS细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于从多能干细胞诱导产生肝脏细胞的试剂盒或细胞培养基组合物，所述组合物包含下述诱导剂：/n(1)Activin A，/n(2)BMP信号转导途径调节物，/n(3)FGF信号转导途径调节物，/n(4)Wnt信号途径调节物，/n(5)生长因子，/n(6)TGFβ受体/ALK5抑制剂。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于从多能干细胞诱导产生肝脏细胞的试剂盒或细胞培养基组合物，所述组合物包含下述诱导剂：
(1)ActivinA，
(2)BMP信号转导途径调节物，
(3)FGF信号转导途径调节物，
(4)Wnt信号途径调节物，
(5)生长因子，
(6)TGFβ受体/ALK5抑制剂。


2.权利要求1所述的试剂盒或细胞培养基组合物，其还包含下述一种或多种诱导剂：
(7)GSK-3β抑制剂，
(8)cAMP激动剂，和/或
(9)核受体配体，
任选地还包含一种或多种另外的诱导剂，如(10)LPA，(11)S1P，和/或(12)XMU-MP-1。


3.权利要求1或2所述的试剂盒或细胞培养基组合物，其中：
所述(2)BMP信号转导途径调节物包括BMP蛋白如BMP2、BMP4、BMP7，GDF蛋白如GDF7和抗-BMP受体抗体中的一种或多种；
所述(3)FGF信号转导途径调节物包括FGF1、FGF2、FGF4和FGF10中的一种或多种；
所述(4)Wnt信号途径调节物包括Wnt3a，Wnt激动剂，Dkk，R-Spondin中的一种或多种；
所述(5)生长因子包括KGF、IGF、EGF、VEGF中的一种或多种；和/或
所述(6)TGFβ受体/ALK5抑制剂包括SB431542，LY-364947，SB-505，A-83-01中的一种或多种。


4.权利要求2所述的试剂盒或细胞培养基组合物，其中：
所述(7)GSK-3β抑制剂包括CHIR99021，TD114-2，BIO，Kenpaullone，TWS119，CBM1078，SB216763，3F8(TOCRIS)，AR-A014418，FRATide，Indirubin-3′-oxime，L803中的一种或多种；
所述cAMP激活剂包括Forskolin，IBMX，Rolipram，8BrcAMP，ProstaglandinE2(PGE2)，NKH477，dibutyryl-cAMP(DBcAMP)，Sp-8-Br-cAMPs中的一种或多种；和/或
所述(9)核受体配体包括雌二醇，全反式视黄酸，13-顺式视黄酸，地塞米松，氯倍他索，雄激素，甲状腺素，曲格列酮，吡格列酮，前列腺素中的一种或多种。...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓宏魁，时艳，陈思潼，
申请(专利权)人：北京大学，北昊干细胞与再生医学研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11