无血清Vero细胞固定床生物反应器高密度培养工艺制造技术

本发明专利技术公开了一种无血清Vero细胞固定床生物反应器高密度培养工艺，属于细胞培养领域。本发明专利技术的培养工艺包括如下步骤：1)将无血清培养基培养的Vero细胞接种到固定床生物反应器，待溶液清澈；2)接种后12～24h内，在不灌流条件下设置如下参数进行培养：温度37.0±0.2℃、pH 7.20±0.1、溶氧60±20％、转速90～110rpm；3)接种后12～24h开始灌流培养。本发明专利技术的方法可培养得到高密度Vero细胞，且不涉及牛血清及动物胰酶的使用，大大提高了Vero细胞所得生物制品的安全性。

【技术实现步骤摘要】
无血清Vero细胞固定床生物反应器高密度培养工艺
本专利技术属于细胞培养领域。
技术介绍
细胞的培养是病毒性疫苗以及其他大部分生物制品必不可少的前提条件，高密度、高质量的细胞能够使产品收率大大的提升。Vero细胞是一种非洲绿猴(Cercopithecusaethiops)肾细胞，由日本千叶大学(Chiba)的Yasumura和Kawakita于1962年3月27日建立细胞系。该Vero细胞系于1964年6月15日由B.Simizu博士带到美国的热带病毒学实验室(laboratoryoftropicalvirology)、国立变态反应和传染病研究所(NIAID)、国立卫生研究院(NIH)，此时细胞的传代水平是第93代。于第113代传代水平时，再提交给美国典型培养物典藏中心(ATCC)，在ATCC培养传代至第121代，并且建库，此细胞库编号为ATCCCCL-81TM。无血清Vero细胞(Vero-SF-ACF)是2011年ATCC从CCL-81TM(Lot58954145)经无血清、无动物源性培养基驯化得到，ATCC编号为CCL-8本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种无血清Vero细胞固定床生物反应器高密度培养工艺，其特征在于，包括如下步骤：/n1)将无血清培养基培养的Vero细胞接种到固定床生物反应器，待溶液清澈；/n2)接种后12～24h内，在不灌流条件下设置如下参数进行培养：温度37.0±0.2℃、pH7.20±0.1、溶氧60±20％、转速90～110rpm；/n3)接种后12～24h开始灌流培养；/n上述各步骤中均使用如下配方的无血清培养基：15.0～17.6g/L，谷丙二肽2～4mmol/L，果糖0.5～2.0g/L，Tricine 0.5～2.0g/L；/n灌流时，通过控制培养基的灌流速度，保证培养基内葡萄糖的浓度不低于1.0g/L。...

【技术特征摘要】
1.一种无血清Vero细胞固定床生物反应器高密度培养工艺，其特征在于，包括如下步骤：
1)将无血清培养基培养的Vero细胞接种到固定床生物反应器，待溶液清澈；
2)接种后12～24h内，在不灌流条件下设置如下参数进行培养：温度37.0±0.2℃、pH7.20±0.1、溶氧60±20％、转速90～110rpm；
3)接种后12～24h开始灌流培养；
上述各步骤中均使用如下配方的无血清培养基：15.0～17.6g/L，谷丙二肽2～4mmol/L，果糖0.5～2.0g/L，Tricine0...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁智杰，黄林，崔利凯，陈坤，李高军，
申请(专利权)人：成都柏奥特克生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51