一种低成本小鼠肠类器官培养基及培养方法技术

本发明专利技术涉及一种低成本小鼠肠类器官培养基及培养方法，属于细胞生物技术领域。本发明专利技术的小鼠肠类器官的培养基，主要包括基础培养基、293T‑HA‑Rspo1‑Fc细胞上清及添加剂。小鼠肠类器官的培养方法包括以下步骤：小鼠肠预处理制备细胞团；用小鼠肠类器官培养基与基质胶混合液重悬细胞团；将细胞团接种到培养基中进行培养。本发明专利技术培养基中添加的细胞因子均为鼠源，更接近体内正常生长状态，有利于类器官的生长于形态结构维持。此外，使用了293T‑HA‑Rspo1‑Fc细胞上清代替昂贵的细胞因子R‑Spondin 1，成本低廉，便于大规模生产。

【技术实现步骤摘要】
一种低成本小鼠肠类器官培养基及培养方法
本专利技术属于细胞生物
，具体涉及一种低成本小鼠肠类器官培养基及培养方法。
技术介绍
人类应用小鼠模型进行生物学医学研究已有超过一百多年的历史。小鼠体型小、繁殖周期短、产仔数量多、容易饲养、遗传资源丰富；小鼠的基因与人类相似度达95％，拥有人类相似的免疫系统及易于进行基因工程与细胞工程的改造，这些优点决定了小鼠模型在生物学医学研究中心得天独厚的优势。然而，即便小鼠动物模型有诸多的优势，却依然存在建模流程繁杂、建模时间长、操作难度大、硬件要求高和建模成本高昂等缺点。类器官是衍生于干细胞的体外3D培养物。类器官在细胞成分和组织架构上与对应器官高度相似，并具备相应的功能学特征。与常规细胞培养在二维环境中培养单一细胞类群不同，类器官培养是在三维环境中培养出特定组织器官包含的多种细胞类群，其培养体系与体内微环境更为相似。因此，在各种器官生理病理的基础研究、精准医疗、药物筛选和开发、基因治疗、再生医学等方面，显示出巨大的应用前景。类器官作为一种新的研究模型，可操作性好、适宜高通量筛选、培养成本低，能够在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种低成本小鼠肠类器官培养基，其特征在于，包含基础培养基和293T-HA-Rspo1-Fc细胞上清。/n

【技术特征摘要】
1.一种低成本小鼠肠类器官培养基，其特征在于，包含基础培养基和293T-HA-Rspo1-Fc细胞上清。


2.根据权利要求1所述小鼠肠类器官培养基，其特征在于，所述基础培养基为DEME/F12培养基。


3.根据权利要求1所述小鼠肠类器官培养基，其特征在于，所述基础培养基与293T-HA-Rspo1-Fc细胞上清的重量比为70～95:5～30。


4.根据权利要求1所述小鼠肠类器官培养基，其特征在于，还包含以下成分：
无维生素A型B272％～10％；
乙酰半胱氨酸酰胺0.2～5μmol/L；
前列腺素E20.1～1μmol/L；
小鼠表皮生长因子10～100ng/mL；
选择性小分子抑制剂A83-011～10mol/L；
ROCK抑制剂Y276325～50μmol/L；
胃泌素I5～50ng/mL；
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【专利技术属性】
技术研发人员：黄敏，徐丛，李刚，
申请(专利权)人：创芯国际生物科技广州有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44