一种PBMC和DC加载肿瘤细胞抗原肽免疫共培养的方法和应用技术

技术编号:45533815 阅读:8 留言:0更新日期:2025-06-13 17:34
本发明专利技术公开了一种PBMC和自体DC加载患者来源的肿瘤细胞抗原肽免疫共培养的方法和应用,包括从患者来源肿瘤类器官(PDO)中提取肿瘤相关抗原肽,通过IFN‑γ预处理和冻融循环纯化;从PBMC中分离CD14+单核细胞,采用两阶段培养法诱导成熟DC并加载抗原;将PBMC和加载抗原的DC共培养,培养48小时后检测IFN‑γ表达。该方法显著提高免疫反应的灵敏度和一致性,缩短实验周期,适用于个体化药物筛选及肿瘤免疫研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学,具体涉及一种pbmc和dc加载肿瘤细胞抗原肽免疫共培养的方法和应用。


技术介绍

1、患者来源肿瘤类器官(pdo)作为一种体外三维培养模型,能够高度模拟患者体内肿瘤的生物学特性,已被广泛用于药物筛选和免疫研究。外周血单核细胞(pbmc)包含多种免疫细胞,与pdo共培养可模拟体内免疫微环境,用于研究免疫反应。然而,现有技术中,pbmc与pdo的共培养体系存在实验周期长、灵敏度低和一致性差等问题。

2、专利文献cn119410741a公开了一种基于肿瘤类器官进行新抗原功能验证的方法,通过新抗原多肽加载树突状细胞(dc),刺激cd8+t细胞生成杀伤性t细胞(ctl)并验证其杀伤活性。然而,该方法未涉及从肿瘤类器官中提取抗原的具体步骤,且共培养体系仅限于类器官与ctl,未能优化整个免疫反应的灵敏度和一致性。

3、此外,现有文献中虽有pbmc与pdo共培养的研究,但未见从患者来源pdo提取抗原并结合dc优化的系统性方法。因此,亟需开发一种共培养技术,以提高培养体系的灵敏度、一致性和应用价值。

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【技术保护点】

1.一种PBMC和DC加载肿瘤细胞抗原肽免疫共培养的方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述PBMC和DC加载肿瘤细胞抗原肽免疫共培养的方法,其特征在于,步骤S1中所述提取肿瘤相关抗原肽的步骤包括:

3.根据权利要求1所述PBMC和DC加载肿瘤细胞抗原肽免疫共培养的方法,其特征在于,步骤S2中所述采用两阶段培养法诱导CD14+单核细胞分化为成熟DC的步骤包括:

4.根据权利要求1所述PBMC和DC加载肿瘤细胞抗原肽免疫共培养的方法,其特征在于,步骤S3中所述将PBMC与加载了肿瘤相关抗原肽的成熟DC共培养的细胞数比为10:1。

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【技术特征摘要】

1.一种pbmc和dc加载肿瘤细胞抗原肽免疫共培养的方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述pbmc和dc加载肿瘤细胞抗原肽免疫共培养的方法,其特征在于,步骤s1中所述提取肿瘤相关抗原肽的步骤包括:

3.根据权利要求1所述pbmc和dc加载肿瘤细胞抗原肽免疫共培养的方法,其特征在于,步骤s2中所述采用两阶段培养法诱导cd14+单核细胞分化为成熟dc的步骤包括:

4.根据权利要求1所述pbmc和dc加载肿瘤细胞抗原肽免疫共培养的方法,其特征在于,步骤s3中所述将pbmc与加载了肿瘤相关抗原肽的成熟dc共培养的细胞数比为10:1。

5.根据权利要求1所述pbmc和dc加载肿瘤细胞抗原肽免疫共培养的方法,其特征在于,步骤s3中所述共培养,还包括患者来...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘青马启旺邱源张鑫宋越奇
申请(专利权)人:创芯国际生物科技广州有限公司
类型:发明
国别省市:

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