一种千里香种子组织培养的方法技术

本发明专利技术公开了一种千里香种子组织培养的方法，包括如下步骤，诱导培养：将一些千里香种子依次进行剥皮工作，剥皮结束后，对剥皮后的千里香种子依次喷洒75%浓度的酒精，然后倒入升汞溶液中进行30s时间的处理，处理结束后再用无菌水冲洗干净，接着将剥皮且消毒后的千里香种子接种于诱导培养基中进行芽诱导培养，增殖培养：将S1中萌发的芽依次接种于增殖培养基A和增殖培养基B上，分化出丛芽，壮苗培养：将步骤2分化出的丛芽接种于壮苗培养基上培养内。该千里香种子组织培养的方法以种子为外植体，诱导萌发芽，先接种至激素浓度高的增殖培养基A，诱导出丛芽，再接种于激素浓度低的增殖培养基B中，完全适合大规模工业化生产。

A method of tissue culture of thymus seed

【技术实现步骤摘要】
一种千里香种子组织培养的方法
本专利技术涉及植物组织培养
，具体为一种千里香种子组织培养的方法。
技术介绍
千里香是一种小乔木，千里香是我们生活中常见的调味料的一种，可去除异味，千里香不仅可作为调味料也可作为观赏植物，千里香四季常青，而且开花时花会有浓香味，果实红艳，南部地区多用作围篱材料，或作花圃及宾馆的点缀品，因此可作为盆栽供室内观赏，同时千里香也具有一定的药用价值，因此千里香被广泛种植，进而千里香种子的组织培养的方法也被广泛的研究；近年来，科研人员对千里香的扦插育苗、嫁接育苗等无性繁殖方式进行了研究，但受季节和材料资源的限制，嫁接苗和扦插苗成活率和出苗率较低，不能高效的进行大规模的繁育，目前关于利用千里香种子为材料进行组织培养的方法还未见报道，为满足千里香种苗的大量需求，适应大规模林业生产，建立成熟的千里香种子组培技术具有极其重要的作用；因此我们便提出了一种千里香种子组织培养的方法，以便于很好的解决上述问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种千里香种子组织培养的方法，以解决上述
技术介绍
中提出受季节和材料资源的限制，嫁接苗和扦插苗成活率和出苗率较低，不能高效的进行大规模的繁育，不能适应大规模林业生产的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种千里香种子组织培养的方法，包括如下步骤，S1：诱导培养：将一些千里香种子依次进行剥皮工作，剥皮结束后，对剥皮后的千里香种子依次喷洒75%浓度的酒精，然后倒入升汞溶液中进行30s时间的处理，处理结束后再用无菌水冲洗干净，接着将剥皮且消毒后的千里香种子接种于诱导培养基中进行芽诱导培养；S2：增殖培养：将S1中萌发的芽依次接种于增殖培养基A和增殖培养基B上，分化出丛芽；S3：壮苗培养：将步骤2分化出的丛芽接种于壮苗培养基上培养内，通过壮苗培养基给丛芽一定的营养成分，使得丛芽长至壮苗；S4：生根培养：先将生根组培苗置于温室中炼苗一段时间，然后开盖取苗，再将壮苗进行洗净，接着用1000倍多菌灵或甲基托布津处理一段时间，然后放入基质中进行栽培，再将壮苗的丛芽切成单株接种于生根培养基中培养，生根后继续培养，得到有根的完整植株的时间为接种到生根培养基上25天后，当生根的苗长至5~8cm，根数3条以上时由此获得牛樟苗，再移栽到室外进行培养。优选的，所述S1中的酒精体积分数为75%，且处理时间为30s，所述升汞处理时间为5~6min，且S1处理时间为20~30s，并且70~75%的酒精具有强渗。优选的，所述S1中的诱导培养千里香种子的子叶萌芽，后展开叶片，且萌发新芽的时间为接种到诱导培养基上7-10天后，并且萌发出新芽后即可接种至S2中的增殖培养基上。优选的，所述S2中增殖培养基A包括MS培养基，6-BA2.0mg/L，IBA0.5mg/L，蔗糖30g/L，卡拉胶6.5g/L，pH值5.8，所述增殖培养基B包括MS培养基，6-BA1.5mg/L，IBA0.05mg/L，蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH值5.8，所述S1、S2和S3中的所有培养条件均为每天光照10~12h，温度为25-30°C。优选的，所述S2中的增殖培养基A培养时间为40-50天（2代）。优选的，所述S2中的增殖培养基B培养时间为180~200天（9~10代）。优选的，所述S1中的诱导培养基包括：MS培养基，6-BA2.0mg/L，IBA0.5mg/L，活性炭0.5g/L，蔗糖30g/L，卡拉胶6.5g/L，pH值5.8。优选的，所述S3中的壮苗培养基包括：MS培养基，蛋白胨1.0mg/L，蔗糖30g/L，卡拉胶6.5g/L，pH值5.8。优选的，所述S4中的生根培养基包括：1/2MS培养基，IBA1.0mg/L，活性炭1.5g/L，蔗糖30g/L，卡拉胶6.5g/L，pH值5.8。优选的，所述S4中的炼苗天数为10~15天，且S4中的壮苗通过1000倍多菌灵或甲基托布津处理10-15min，并且S4中的基质为泥炭土和珍珠岩按体积比2：1混合所得。优选的，所述S1、S2和S3中的所有培养条件均为每天光照10~12h，温度为25-30°C。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：该千里香种子组织培养的方法：（1）本专利技术以种子为外植体，诱导萌发芽，先接种至激素浓度高的增殖培养基A，诱导出丛芽，再接种于激素浓度低的增殖培养基B中，分化出大量正常的丛芽，月繁殖系数达到3-4倍，完全适合大规模工业化生产，以便于很好的进行种子组织培养；（2）本专利技术的方法有效解决了千里香扦插和嫁接苗繁殖效率低的问题；（3）本专利技术可快速批量地生产种苗，为中药材生产和药剂加工提供了充足的材料。具体实施方式下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术提供一种技术方案：一种千里香种子组织培养的方法，包括如下步骤，S1：诱导培养：将一些千里香种子依次进行剥皮工作，剥皮结束后，对剥皮后的千里香种子依次喷洒75%浓度的酒精，然后倒入升汞溶液中进行30s时间的处理，处理结束后再用无菌水冲洗干净，接着将剥皮且消毒后的千里香种子接种于诱导培养基中进行芽诱导培养；S2：增殖培养：将S1中萌发的芽依次接种于增殖培养基A和增殖培养基B上，分化出丛芽；S3：壮苗培养：将步骤2分化出的丛芽接种于壮苗培养基上培养内，通过壮苗培养基给丛芽一定的营养成分，使得丛芽长至壮苗；S4：生根培养：先将生根组培苗置于温室中炼苗一段时间，然后开盖取苗，再将壮苗进行洗净，接着用1000倍多菌灵或甲基托布津处理一段时间，然后放入基质中进行栽培，再将壮苗的丛芽切成单株接种于生根培养基中培养，生根后继续培养，得到有根的完整植株的时间为接种到生根培养基上25天后，当生根的苗长至5~8cm，根数3条以上时由此获得牛樟苗，再移栽到室外进行培养。本专利技术经过实验研究发现，用增殖培养基A培养一段时间后，腋芽萌发伸长快，且能分化出的大量的芽，后几代转接于增殖培养基B中培养，激素浓度降低，利于芽体生长正常，月繁殖系数达到3~4倍。本专利技术首次建立了一套高效的千里香种子组织培养的方法，为具有极高药用价值的千里香种苗生产奠定基础。S1中的酒精体积分数为75%，且处理时间为30s，升汞处理时间为5~6min，且S1处理时间为20~30s，并且70~75%的酒精具有强渗。S1中的诱导培养千里香种子的子叶萌芽，后展开叶片，且萌发新芽的时间为接种到诱导培养基上7-10天后，并且萌发出新芽后即可接种至S2中的增殖培养基上。S2中增殖培养基A包括MS培养基，6-BA2.0mg/L，IBA0.5mg/L，蔗糖30g/L，卡拉胶6.5g/L，pH值5.8，增殖培养基B包括MS培养基，6-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种千里香种子组织培养的方法，其特征在于，包括如下步骤：/nS1：诱导培养：将一些千里香种子依次进行剥皮工作，剥皮结束后，对剥皮后的千里香种子依次喷洒75%浓度的酒精，然后倒入升汞溶液中进行30s时间的处理，处理结束后再用无菌水冲洗干净，接着将剥皮且消毒后的千里香种子接种于诱导培养基中进行芽诱导培养；/nS2：增殖培养：将S1中萌发的芽依次接种于增殖培养基A和增殖培养基B上，分化出丛芽；/nS3：壮苗培养：将步骤2分化出的丛芽接种于壮苗培养基上培养内，通过壮苗培养基给丛芽一定的营养成分，使得丛芽长至壮苗；/nS4：生根培养：先将生根组培苗置于温室中炼苗一段时间，然后开盖取苗，再将壮苗进行洗净，接着用1000倍多菌灵或甲基托布津处理一段时间，然后放入基质中进行栽培，再将壮苗的丛芽切成单株接种于生根培养基中培养，生根后继续培养，得到有根的完整植株的时间为接种到生根培养基上25天后，当生根的苗长至5~8cm，根数3条以上时由此获得牛樟苗，再移栽到室外进行培养。/n

【技术特征摘要】
1.一种千里香种子组织培养的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：诱导培养：将一些千里香种子依次进行剥皮工作，剥皮结束后，对剥皮后的千里香种子依次喷洒75%浓度的酒精，然后倒入升汞溶液中进行30s时间的处理，处理结束后再用无菌水冲洗干净，接着将剥皮且消毒后的千里香种子接种于诱导培养基中进行芽诱导培养；
S2：增殖培养：将S1中萌发的芽依次接种于增殖培养基A和增殖培养基B上，分化出丛芽；
S3：壮苗培养：将步骤2分化出的丛芽接种于壮苗培养基上培养内，通过壮苗培养基给丛芽一定的营养成分，使得丛芽长至壮苗；
S4：生根培养：先将生根组培苗置于温室中炼苗一段时间，然后开盖取苗，再将壮苗进行洗净，接着用1000倍多菌灵或甲基托布津处理一段时间，然后放入基质中进行栽培，再将壮苗的丛芽切成单株接种于生根培养基中培养，生根后继续培养，得到有根的完整植株的时间为接种到生根培养基上25天后，当生根的苗长至5~8cm，根数3条以上时由此获得牛樟苗，再移栽到室外进行培养。


2.根据权利要求1所述的一种千里香种子组织培养的方法，其特征在于：所述S1中的酒精体积分数为75%，且处理时间为30s，所述升汞处理时间为5~6min，且S1处理时间为20~30s，并且70~75%的酒精具有强渗。


3.根据权利要求1所述的一种千里香种子组织培养的方法，其特征在于：所述S1中的诱导培养千里香种子的子叶萌芽，后展开叶片，且萌发新芽的时间为接种到诱导培养基上7-10天后，并且萌发出新芽后即可接种至S2中的增殖培养基上。


4.根据权利要求1所述的一种千里香种子组织培养的方法，其特征在于：所述S2中增殖培养基A包括MS培养基，6-BA2.0mg/L...

【专利技术属性】
技术研发人员：黎莹，俞冠江，魏富军，黄瑞礼，郭建章，黎宗浩，陈宁，李栋宇，
申请(专利权)人：广东粤恬生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44