一种金钗石斛种苗快繁用培养基及其快繁方法技术

本发明专利技术提供了一种金钗石斛种苗快繁用培养基及其快繁方法，属于植物种苗培育技术领域。本发明专利技术提供的金钗石斛种苗快繁用培养基，包括以下质量体积浓度的组分：2.35～2.68g/L N6基本培养基、1.0～1.5mg/L 6‑BA、0.3～0.5mg/L 2,4‑D、30～60g/L土豆汁、130～160g/L香蕉汁、20～30g/L蔗糖和6～7g/L琼脂；所述培养基的pH值为5.6～5.8。本发明专利技术提供的金钗石斛种苗快繁用培养基培养金钗石斛种苗时无需转接，一次成苗，避免了频繁转接造成的污染，降低了污染率，而且大大节约了育苗成本。

A medium for rapid propagation of Dendrobium nobile seedlings and its rapid propagation method

【技术实现步骤摘要】
一种金钗石斛种苗快繁用培养基及其快繁方法
本专利技术属于植物种苗培育
，尤其涉及一种金钗石斛种苗快繁用培养基及其快繁方法。
技术介绍
金钗石斛(DendrobiumnobiLeLindL)为兰科石斛属多年生附生草本植物，含有石斛碱、石斛多糖、多酚类、菲类和联苄类等多种药效成分，具有抑制肿瘤、抗衰老、提高人体免疫力、补五脏虚劳等功效，是我国传统的名贵中药。目前，石斛育苗主要通过植物组织培养获取，虽然现有组织培养技术已经不断改进，并已形成了以种子为外植体的三步成苗的技术即种子萌发培养2～3个月后转接到增殖壮苗培养基中，培养3～4个月后再转接到生根培养基中培养2～3个月，但是三步成苗法依旧繁琐，需要多次换瓶转接，不仅浪费人力、财力、物力，而且增加了组培苗的污染率，从而导致组培苗数量减少，试管苗损失。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提供了一种金钗石斛种苗快繁用培养基及其快繁方法。本专利技术提供的金钗石斛种苗快繁用培养基培养金钗石斛种苗时无需转接，一次成苗，避免了频繁转接造成的污染，降低了污染率，而且大大节约了育苗成本。为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：本专利技术提供了一种金钗石斛种苗快繁用培养基，包括以下质量体积浓度的组分：2.35～2.68g/LN6基本培养基、1.0～1.5mg/L6-BA、0.3～0.5mg/L2,4-D、30～60g/L土豆汁、130～160g/L香蕉汁、20～30g/L蔗糖和6～7g/L琼脂；所述培养基的pH值为5.6～5.8。本专利技术提供了一种金钗石斛种苗快繁的方法，包括如下步骤：1)将金钗石斛种子用无菌水悬浮，得到种子悬浮液；2)将种子悬浮液接种到培养基上，接种后进行暗培养，暗培养结束后采用光照培养，形成金钗石斛种苗；步骤1)所述种子悬浮液的浓度为80～100个/mL。优选的，步骤1)所述金钗石斛种子由果实饱满、无病虫害和无破裂的金钗石斛蒴果获得。优选的，所述金钗石斛蒴果获得种子前，包括将金钗石斛蒴果进行消毒，所述消毒的方法包括如下步骤：将金钗石斛蒴果在流水下冲洗60～70min；冲洗后的金钗石斛蒴果用洗衣粉浸泡20～25min后用流水冲洗干净；将洗衣粉浸泡后的金钗石斛蒴果用乙醇消毒30～40s后用无菌水冲洗；再采用升汞消毒8～10min，得消毒后的金钗石斛蒴果。优选的，步骤1)所述种子悬浮液的接种量为300～350μL/组培瓶。优选的，步骤2)所述暗培养为无光照培养，所述暗培养的温度为23～25℃，所述暗培养的湿度为75％～85％，所述暗培养的时间为20～30d。优选的，步骤2)所述光照培养的光照强度为2000～2500Lx，光照时间为14～16h/d，所述光照培养的温度为23～25℃，所述光照培养的湿度为75％～85％，所述光照培养的时间为200～270d。有益效果本专利技术提供了一种金钗石斛种苗快繁用培养基，包括以下质量体积浓度的组分：2.35～2.68g/LN6基本培养基、1.0～1.5mg/L6-BA、0.3～0.5mg/L2,4-D、30～60g/L土豆汁、130～160g/L香蕉汁、20～30g/L蔗糖和6～7g/L琼脂；所述培养基的pH值为5.6～5.8。本专利技术培养基以N6培养基提供基本营养物质，6-BA促进石斛种子萌发，2,4-D促进原球茎分化和壮苗，土豆和香蕉作为天然有机物可提供更加丰富的营养，可同时满足金钗石斛萌发、原球茎分化、壮苗和生根的营养需求，不需转接即可实现金钗石斛一步成苗，简化了种苗培育步骤；同时降低了多次转接导致的感染率增加，从而减少试管苗损失，提高成苗率，大大节约了育苗成本。进一步的，本专利技术提供了一种金钗石斛种苗快繁的方法，本专利技术将金钗石斛种子制成种子悬浮液，起到了稀释种子的作用，有效解决了由于种子数目过多造成的萌发率低，种苗生长不良的问题，为使金钗石斛一步成苗打下了基础。进一步的，本专利技术以种子悬浮液形式进行接种，调控接种量再配合特定的培养基和培养条件，进一步确保一次成苗，提高萌发率和成活率。附图说明图1为实施例1金钗石斛点播30d种子萌发情况；图2为实施例1金钗石斛点播90d种子萌发情况；图3为实施例1金钗石斛点播120d种苗生长情况；图4为实施例1金钗石斛点播180d种苗生长情况；图5为实施例1金钗石斛点播240d试管苗生长情况。具体实施方式本专利技术提供了一种金钗石斛种苗快繁用培养基，包括以下质量体积浓度的组分：2.35～2.68g/LN6基本培养基、1.0～1.5mg/L6-BA、0.3～0.5mg/L2,4-D、30～60g/L土豆汁、130～160g/L香蕉汁、20～30g/L蔗糖和6～7g/L琼脂；所述培养基的pH值为5.6～5.8。在本专利技术中，所述N6基本培养基的质量体积浓度为2.35～2.68g/L，进一步优选为2.47g/L；所述6-BA的质量体积浓度为1.0～1.5mg/L，进一步优选为1.0mg/L；所述2,4-D的质量体积浓度为0.3～0.5mg/L，进一步优选为0.3mg/L；所述土豆汁的质量体积浓度为30～60g/L，进一步优选为45g/L；所述香蕉汁的质量体积浓度为130～160g/L，进一步优选为145g/L；所述蔗糖的质量体积浓度为20～30g/L，进一步优选为25g/L；所述琼脂的质量体积浓度为6～7g/L，进一步优选为6.5g/L。在本专利技术中，所述培养基的pH为5.6～5.8，进一步优选为5.7。在本专利技术中，所述土豆汁、香蕉汁优选采用榨汁机制备得到，土豆汁和香蕉汁更有利于材料吸收营养物质。本专利技术所述培养基配制完成后，优选进行高压灭菌，所述高压灭菌的条件优选为121℃20min。本专利技术培养基以N6培养基提供基本营养物质，6-BA促进石斛种子萌发，2,4-D促进原球茎分化和壮苗，土豆和香蕉作为天然有机物可提供更加丰富的营养，可同时满足金钗石斛萌发、原球茎分化、壮苗和生根的营养需求，不需转接即可实现金钗石斛一步成苗，简化了种苗培育步骤；同时降低了多次转接导致的感染率增加，从而减少试管苗损失，提高成苗率，大大节约了育苗成本。本专利技术提供了一种金钗石斛种苗快繁的方法，包括如下步骤：1)将金钗石斛种子用无菌水悬浮，得到种子悬浮液；2)将种子悬浮液接种到培养基上，接种后进行暗培养，暗培养结束后采用光照培养，形成金钗石斛种苗；步骤1)所述种子悬浮液的浓度为80～100个/mL。本专利技术所述金钗石斛种子优选由果实饱满、无病虫害和无破裂的金钗石斛蒴果获得。所述金钗石斛蒴果优选在中午进行采摘，晴天中午温度高，采摘的金钗石斛蒴果露水少，携带的病菌少，利于组培苗建立无菌系，降低污染率。在本专利技术中，所述金钗石斛蒴果获得种子前，优选包括将金钗石斛蒴果进行消毒，所述消毒优选包括以下步骤：将金钗石斛蒴果在流水下冲洗60～70min，进一步优选为65min；将冲洗后的金钗石斛蒴果用洗衣粉浸泡20～25min，进一本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种金钗石斛种苗快繁用培养基，其特征在于，包括以下质量体积浓度的组分：2.35～2.68g/LN6基本培养基、1.0～1.5mg/L 6-BA、0.3～0.5mg/L2,4-D、30～60g/L土豆汁、130～160g/L香蕉汁、20～30g/L蔗糖和6～7g/L琼脂；所述培养基的pH值为5.6～5.8。/n

【技术特征摘要】
1.一种金钗石斛种苗快繁用培养基，其特征在于，包括以下质量体积浓度的组分：2.35～2.68g/LN6基本培养基、1.0～1.5mg/L6-BA、0.3～0.5mg/L2,4-D、30～60g/L土豆汁、130～160g/L香蕉汁、20～30g/L蔗糖和6～7g/L琼脂；所述培养基的pH值为5.6～5.8。


2.一种金钗石斛种苗快繁的方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)将金钗石斛种子用无菌水悬浮，得到种子悬浮液；
2)将种子悬浮液接种到权利要求1所述的培养基上，接种后进行暗培养，暗培养结束后采用光照培养，形成金钗石斛种苗；
步骤1)所述种子悬浮液的浓度为80～100个/mL。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1)所述金钗石斛种子由果实饱满、无病虫害和无破裂的金钗石斛蒴果获得。


4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述金钗石斛蒴果获得种子前，包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：向增旭，张成才，覃芳，罗丽娜，张子璇，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32