杂合调控元件制造技术

本发明专利技术涉及驱动基因表达的杂合转录调控元件，特别是杂合启动子，所述杂合转录调控元件通过具有不同组织选择性的至少两个转录调控元件例如以组织选择性方式在不同组织中驱动表达的两个启动子的融合来设计。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】杂合调控元件
本专利技术涉及驱动基因表达的杂合转录调控元件，特别是杂合启动子，所述杂合转录调控元件通过具有不同组织选择性的至少两个转录调控元件、例如以组织选择性方式在不同组织中驱动表达的两个启动子的融合来设计。
技术介绍
基因疗法具有提供遗传疾病的持续治疗性校正的潜力，目前已在许多临床试验中进行试验。然而，对于许多疾病来说，在所需靶组织中转入基因的表达不足和抗转入基因免疫仍然是获得成功的基因疗法的重要障碍。这对于由遍在表达或在身体的多个组织(例如肝、肌肉和中枢神经系统(CNS))中表达的基因的突变引起的疾病的治疗来说尤其重要。这些疾病的实例包括：i.溶酶体贮积病[(LSD)，例如庞贝氏病(PD)、I型至VII型黏多糖贮积症(MPSI-VII)、Sandhoff和Tay-Sachs病]；ii.代谢疾病[例如枫糖尿病(MSUD)、甲基丙二酸血症(MMA)、I型和III型糖原贮积病(GSDI、III)、尼曼-皮克病(NPC)、卡纳万病、苯丙酮尿症(PKU)]；和iii.神经肌肉疾病[例如脊髓性肌肉萎缩症(SMA)和弗里德希氏共济失调(FA)]。到目前本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸序列，其包含：/n(i)能够在第一组织中驱动或增强组织选择性表达的第一转录调控元件；和/n(ii)能够在第二组织中驱动或增强组织选择性表达的第二转录调控元件；/n其中所述第一转录调控元件和第二转录调控元件被融合在一起；并且/n其中所述第一转录调控元件和第二转录调控元件中的至少一者是组织选择性启动子。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180314 EP 18161872.9;20180620 EP 18178853.0;20181.一种核酸序列，其包含：
(i)能够在第一组织中驱动或增强组织选择性表达的第一转录调控元件；和
(ii)能够在第二组织中驱动或增强组织选择性表达的第二转录调控元件；
其中所述第一转录调控元件和第二转录调控元件被融合在一起；并且
其中所述第一转录调控元件和第二转录调控元件中的至少一者是组织选择性启动子。


2.根据权利要求1所述的核酸序列，其中：
(i)所述第一转录调控元件是能够在第一组织中驱动组织选择性表达的组织选择性启动子；并且
(ii)所述第二转录调控元件是组织选择性启动子。


3.根据权利要求1或2所述的核酸序列，其中一个转录调控元件选自肝选择性启动子、肌肉选择性启动子和神经元选择性启动子，特别是肝选择性启动子；并且
其中具体来说，
(a)当所述转录调控元件是肝选择性启动子时，所述转录调控元件优选地选自α-1抗胰蛋白酶启动子(hAAT)、ApoE增强子与hAAT启动子的组合、甲状腺素转运蛋白启动子、白蛋白启动子、甲状腺素结合球蛋白(TBG)启动子和LSP启动子；
(b)当所述转录调控元件是肌肉选择性启动子时，所述转录调控元件优选地选自spC5.12启动子、MHCK7启动子、E-syn启动子、肌肉肌酸激酶肌球蛋白轻链(MLC)启动子、肌球蛋白重链(MHC)启动子、结蛋白启动子、心肌肌钙蛋白C启动子、肌钙蛋白I启动子、myoD基因家族启动子、α肌动蛋白启动子、β肌动蛋白启动子、γ肌动蛋白启动子、位于眼型Pitx3的内含子1内的肌肉选择性启动子和CK6启动子；和/或
(c)当所述转录调控元件是神经元选择性启动子时，所述转录调控元件优选地选自突触蛋白-1(Syn)启动子、神经元特异性烯醇化酶(NSE)启动子、神经丝轻链基因启动子、神经元特异性vgf基因启动子、突触蛋白-2启动子、酪氨酸羟化酶启动子、多巴胺β-羟化酶启动子、次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶启动子、低亲和性NGF受体启动子、胆碱乙酰基转移酶启动子、降钙素基因相关肽(CGRP)启动子、Hb9启动子、GFAP启动子、钙结合蛋白2启动子、Mnx1启动子、巢蛋白启动子、小清蛋白启动子、生长抑素启动子和Plp1启动子。


4.根据权利要求1或2所述的核酸序列，其中一个转录调控元件选自肝选择性启动子、肌肉选择性启动子和神经元选择性启动子，特别是肝选择性启动子；并且
其中具体来说：
(a)当所述转录调控元件是肝选择性启动子时，所述转录调控元件优选地选自α-1抗胰蛋白酶启动子(hAAT)、ApoE增强子与hAAT启动子的组合、甲状腺素转运蛋白启动子、白蛋白启动子、甲状腺素结合球蛋白(TBG)启动子和LSP启动子；
(b)当所述转录调控元件是肌肉选择性启动子时，所述转录调控元件优选地选自spC5.12启动子、MHCK7启动子、E-syn启动子、肌肉肌酸激酶肌球蛋白轻链(MLC)启动子、肌球蛋白重链(MHC)启动子、心肌肌钙蛋白C启动子、肌钙蛋白I启动子、myoD基因家族启动子、α肌动蛋白启动子、β肌动蛋白启动子、γ肌动蛋白启动子、位于眼型Pitx3的内含子1内的肌肉选择性启动子和CK6启动子；和/或
(c)当所述转录调控元件是神经元选择性启动子时，所述转录调控元件优选地选自突触蛋白-1(Syn)启动子、神经元特异性烯醇化酶(NSE)启动子、神经丝轻链基因启动子、神经元特异性vgf基因启动子、突触蛋白-2启动子、酪氨酸羟化酶启动子、多巴胺β-羟化酶启动子、次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶启动子、低亲和性NGF受体启动子、胆碱乙酰基转移酶启动子、降钙素基因相关肽(CGRP)启动子、Hb9启动子、GFAP启动子、钙结合蛋白2启动子、Mnx1启动子、巢蛋白启动子、小清蛋白启动子、生长抑素启动子和Plp1启动子。


5.根据权利要求3所述的核酸序列，其中：
-所述肌肉选择性启动子选自spC5.12、结蛋白和肌肉肌酸激酶(MCK)启动子；和/或
-所述神经元选择性启动子是Syn启动子。


6.根据权利要求3所述的核酸序列，其中：
-所述肌肉选择性启动子选自spC5.12和肌肉肌酸激酶(MCK)启动子；和/或
-所述神经元选择性启动子是Syn启动子。


7.根据权利要求1至4中的任一项所述的核酸序列，其中所述核酸序列：
(i)是ApoE增强子与hAAT启动子的组合，并且(ii)是spC5.12启动子；或
(i)是ApoE增强子与hAAT启动子的组合，并且(ii)是Syn启动子；或
(i)是ApoE增强子，并且(ii)是spC5.12启动子。


8.一种表达盒，其包含根据权利要求1至7中的任一项所述的核酸序列和感兴趣的转入基因，特别是感兴趣的治疗性转入基因，特别是包含酸性α-葡萄糖苷酶(GAA)作为所述感兴趣的治疗性转...

【专利技术属性】
技术研发人员：费德里克·敏果兹，帕斯夸利纳·科莱拉，
申请(专利权)人：吉尼松公司，法国国家卫生及研究医学协会，索邦大学，埃夫里瓦尔德艾松大学，肌肉学研究协会，
类型：发明
国别省市：法国;FR