一种基于URA3基因的表达载体及其构建方法技术

本申请提供了一种基于URA3基因的表达载体及其构建方法，所述载体依次包括URA3同源臂、强启动子、多克隆位点、终止子、URA3同源臂或URA3启动子或URA3终止子，所述构建方法包括提取目标物种DNA；设计引物对其扩增获得URA3同源臂、强启动子、终止子、URA3同源臂或URA3启动子元件或URA3终止子元件；获得其他元件；重组酶连接多个元件一步获得完整载体。

Construction of gene expression vector based on URA3

【技术实现步骤摘要】
一种基于URA3基因的表达载体及其构建方法
本专利技术属于分子生物学中的表达载体领域，具体地，本申请提供了一种基于URA3基因的快速构建表达载体及其构建方法。
技术介绍
表达载体(Expressionvectors)是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件如启动子、终止子等，使目的基因能够在宿主里表达的载体，表达载体是基因工程中必不可少的工具。市面上已经有多种商品化的表达载体可供选购，例如novagenCorporation的用于大肠杆菌蛋白表达的pET系列载体、InvitrogenCorporation的用于毕赤酵母蛋白表达的pPICZ系列载体、CLONTECHLaboratories,Inc的用于哺乳类动物细胞的pDsRed1、pEYFP系列载体等等，这些表达载体的主要问题在于其只适用于少数常见物种细胞，一旦遇到不常见的物种没有相应的商品化表达载体时就必须采用传统的载体构建方法专门构建载体。传统的载体构建方法在使多个DNA元件片段按照一定的顺序拼接成为完整载体时，需要小心选择酶切位点，还要经过繁复多次酶切、连接DNA片段的操作，有时本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于URA3基因的表达载体，其依次包括URA3同源臂或URA3启动子、强启动子、多克隆位点、终止子、URA3同源臂或URA3终止子。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于URA3基因的表达载体，其依次包括URA3同源臂或URA3启动子、强启动子、多克隆位点、终止子、URA3同源臂或URA3终止子。


2.根据权利要求1的基于URA3基因的表达载体，其依次包括URA3同源臂或URA3启动子、强启动子、多克隆位点、终止子、URA3同源臂或URA3终止子、大肠杆菌复制原点、抗性基因。


3.根据权利要求1或2的基于URA3基因的表达载体，其中URA3同源臂或URA3终止子或URA3启动子、强启动子、终止子来源于含有URA3的生物物种。


4.根据权利要求3的基于URA3基因的表达载体，所述含有URA3的生物物种为乳酸克鲁维酵母。


5.根据权利要求4的基于URA3基因的表达载体，强启动子和终止子为LAC4启动子和LAC4终止子。


6.根据权利要求1-5任一项的基于URA3基因的表达载体的构建方法，包括：提取目标物种DNA；设计引物对其扩增获得URA3同源臂、强启动子、终止子...

【专利技术属性】
技术研发人员：李芳红，梁志成，赵子建，梁秀怡，邓木兰，
申请(专利权)人：广州华真医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44