一种防掉片细胞DNA定量染色液及其制备方法技术

技术编号:26221105 阅读:85 留言:0更新日期:2020-11-04 10:49
本发明专利技术提供了一种防掉片细胞DNA定量染色液及其制备方法,优选硫堇‑亚硫酸盐染色,易溶于热水,并有显著的因光异色作用,最大吸收波长(水中)602.5nm,适用于高特异性细胞核DNA定量染色,弥补了Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)共染带来的背景杂乱,特异性不高的缺点。本发明专利技术适用于各类细胞核DNA染色,尤其适用于细胞DNA定量染色分析;可与其余多种细胞质/蛋白染色方法联用,适用性广,商业用途价值高。

【技术实现步骤摘要】
一种防掉片细胞DNA定量染色液及其制备方法
本专利技术涉及一种细胞DNA定量检测的染色方法,尤其涉及一种防掉片细胞DNA定量染色液及其制备方法。
技术介绍
脱氧核糖核酸(DNA)染色方法有Feulgen法、甲基绿-派洛宁法、吖啶橙荧光法等,其中最经典的是Feulgen法,Feulgen染色由Feulgen和Rossenbeck在1924年发现的一种细胞核内DNA染色技术。该法是一种经典的酶组织化学法。LeageneFeulgenstain原理在于:DNA经弱酸(1mol/LHCl)水解后,嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff(无色品红亚硫酸溶液)试剂结合,形成紫红色化合物,使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌基(醌基是一个具有颜色的发色团),所以凡含有DNA的部位,就呈紫红色。而RNA用此法处理后则分解。Feulgen染色使DNA特异性着色。其染色的深浅与DNA的含量或倍体成正比。细胞DNA定量分析技术主本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种防掉片细胞DNA定量染色液,包括:/n试剂A,包括:硫堇、染色助剂和水;/n试剂B,选自甲醇、叔丁醇、乙醇、乙二醇、盐酸、磷酸中的一种或多种;/n试剂C,包括:亚硫酸盐和超纯水;/n所述试剂A、试剂B和试剂C的体积比为5:1:4。/n

【技术特征摘要】
1.一种防掉片细胞DNA定量染色液,包括:
试剂A,包括:硫堇、染色助剂和水;
试剂B,选自甲醇、叔丁醇、乙醇、乙二醇、盐酸、磷酸中的一种或多种;
试剂C,包括:亚硫酸盐和超纯水;
所述试剂A、试剂B和试剂C的体积比为5:1:4。


2.根据权利要求1所述的一种防掉片细胞DNA定量染色液,其特征在于,所述试剂A中,按重量份计,包括:硫堇50-150份,染色助剂20-50份,蒸馏水50-250份。


3.根据权利要求1所述的一种防掉片细胞DNA定量染色液,其特征在于,所述试剂B选自甲醇、叔丁醇、乙醇、乙二醇中的一种或多种,或者甲醇、叔丁醇、乙醇、乙二醇中的一种或多种与盐酸和/或磷酸的混合物。


4.根据权利要求3所述的一种防掉片细胞DNA定量染色液,其特征在于,甲醇、叔丁醇、乙醇、乙二醇中的一种或多种与盐酸和/或磷酸的体积比为7:1。


5.根据权利要求1所述的一种防掉片细胞DNA定量染色液,其特征在于,所述试剂C中,按重量份计,包括:亚硫酸盐20-50份和超纯水50-150份。


6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员:贺权源刘朝前谢凯
申请(专利权)人:湖南品胜生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:湖南;43

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