检测微卫星NR21位点稳定性的引物对、试剂盒及方法技术

本发明专利技术公开了检测微卫星NR21位点稳定性的引物对、试剂盒及方法。本发明专利技术首先提供了检测微卫星NR21位点稳定性的引物对，利用该引物对能够准确、快速、特异地检测微卫星NR21位点的稳定性，与现有片段分析法商品化试剂盒的金标准方法相比，本发明专利技术构建的检测微卫星NR21位点稳定性的方法或试剂盒的检测灵敏度为95.77％、特异性为100％，且对设备的要求也大大降低，无需使用基因分析仪，只需一台带有HRM功能的荧光定量PCR仪即可；另外，本发明专利技术方法或试剂盒的操作程序大大简化，每检测一个样本所需的时间相较金标准方法缩短了约1小时，且成本降低了80％；因此，该方法或试剂盒在检测微卫星NR21位点稳定性中的应用前景良好。

Primer pairs, kits and methods for detecting the stability of microsatellite nr21 locus

【技术实现步骤摘要】
检测微卫星NR21位点稳定性的引物对、试剂盒及方法
本专利技术属于生物
更具体地，涉及检测微卫星NR21位点稳定性的引物对、试剂盒及方法。
技术介绍
结直肠癌(colorectalcancer，CRC)是最常见的恶性肿瘤之一，在世界范围内的恶性肿瘤疾病当中，其发病率高居第3位，死亡率在恶性肿瘤行列高居第2位，在消化道恶性肿瘤中占全球发病和死亡首位，严重威胁着人类的健康与生存。近年来随着中国民众生活方式及饮食结构的变化，它已成为我国消化系统发病率第二，患病率第一位的恶性肿瘤。微卫星不稳定性(microsatelliteinstability，MSI)是结直肠癌发病的重要原因，在预测肠癌患者预后及化疗反应方面也有重要作用，同时对Lynch综合征的诊断具有重要意义。近年来，MSI的相关临床和基础方面研究取得较好的进展，对MSI与CRC的关系取得深入认识。2016年，美国国家癌症综合治疗联盟(NCCN)在《结直肠癌临床实践指南》(2016.V2)指出，Lynch综合征应行MSI或错配修复(mismatchrepair，MMR)检测：1)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.高分辨率熔解曲线法在检测微卫星NR21位点稳定性中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.高分辨率熔解曲线法在检测微卫星NR21位点稳定性中的应用。


2.检测微卫星NR21位点稳定性的引物对，其特征在于，其核苷酸序列如SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示。


3.权利要求2所述引物对在检测微卫星NR21位点稳定性或制备检测微卫星NR21位点稳定性的试剂/试剂盒中的应用。


4.一种检测微卫星NR21位点稳定性的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物对。


5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，还包括饱和荧光染料。


6.一种检测微卫星NR21位点稳定性的方法，其特征在于，利用权利要求2所述引物对进行荧光定量PCR反应并进行HRM分析。


7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)分别以结直肠癌患者肿瘤组织和正常组织的DNA作为模板，利用权利要求2所述引物对进行荧光定量PCR反应和HRM分析，收集荧光信号，绘制熔解曲线；
(2)比较结直肠癌患者肿瘤组织和正常组织的熔解曲线，判断所述结直肠癌患者是否为微卫星NR21位点稳定型患者。

【专利技术属性】
技术研发人员：傅新晖，林汉杰，黄京林，陈志婷，谭小丽，黄艳，汪建平，
申请(专利权)人：中山大学附属第六医院，中山大学，
类型：发明
国别省市：广东;44