溶瘤病毒在葡萄膜黑色素瘤治疗上的应用、治疗效果的标记物及其检测试剂制造技术

本发明专利技术公开了一种用于治疗、预防和/或减缓葡萄膜黑色素瘤的制剂，该制剂包括能够表达胞嘧啶脱氨酶基因的溶瘤性1型单纯疱疹病毒以及5‑氟胞嘧啶，二者联用能够显著地减少葡萄膜黑色素瘤体积并改善受试者生存期。本发明专利技术还公开了一种用于评价葡萄膜黑色素瘤通过前述制剂治疗效果的标记物，该标记物选自能够表征上皮间质转化程度的标记物，主要包括IL‑6、DPD、TWIST1、ZEB1、CD44和CDH1。

Application of oncolytic virus in the treatment of uveal melanoma

【技术实现步骤摘要】
溶瘤病毒在葡萄膜黑色素瘤治疗上的应用、治疗效果的标记物及其检测试剂
本专利技术属于医药领域，涉及一种用于评价葡萄膜黑色素瘤治疗效果的标记物及其检测制剂，特别涉及用于评价含有胞嘧啶脱氨酶基因的溶瘤性单纯疱疹病毒联合5-FC治疗葡萄膜黑色素瘤的治疗效果的标记物及其检测制剂以及相应的包含该标记物或检测制剂的试剂盒。
技术介绍
溶瘤病毒作为一种新兴的、重要的肿瘤治疗方法，可以选择性的对肿瘤细胞进行杀伤和破坏。可选择性复制并引起肿瘤细胞直接裂解的多种溶瘤性RNA和DNA病毒已被广泛报道[1,2]。大多数临床研究集中在腺病毒，痘病毒，1型单纯疱疹病毒(oHSV-1)，麻疹和呼肠孤病毒。葡萄膜黑色素瘤(UM)是成年人中最常见的原发性眼内恶性肿瘤[3]。它通过眼球摘除，放射性敷贴治疗和其他方法治疗，使患者5年生存率分布在25％到66％[4,5]。由于有限的疗法可用于治疗这种化学耐药性肿瘤，15年内发生转移并导致约90％的患者死亡[6]。然而，在保守治疗和手术治疗之间没有观察到死亡率的差异。在一些研究中已经报道了用于治疗UM的溶瘤腺病毒治疗[7]本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于评价葡萄膜黑色素瘤治疗效果的标记物，所述治疗为向所述葡萄膜黑色素瘤个体的瘤细胞或瘤组织、体外葡萄膜黑色素瘤组织、或体外葡萄膜黑色素瘤细胞施用溶瘤性单纯疱疹病毒，所述标记物选自能够表征上皮间质转化程度的标记物。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于评价葡萄膜黑色素瘤治疗效果的标记物，所述治疗为向所述葡萄膜黑色素瘤个体的瘤细胞或瘤组织、体外葡萄膜黑色素瘤组织、或体外葡萄膜黑色素瘤细胞施用溶瘤性单纯疱疹病毒，所述标记物选自能够表征上皮间质转化程度的标记物。


2.如权利要求1所述的标记物，其特征在于，所述溶瘤性单纯疱疹病毒为溶瘤性1型单纯疱疹病毒；
优选地，所述体外葡萄膜黑色素瘤细胞选自MUM2B细胞系，92.1细胞系和MP41细胞系；
优选地，所述葡萄膜黑色素瘤个体为异种移植肿瘤动物，或者患有葡萄膜黑色素瘤的人或动物；
优选地，所述异种移植肿瘤动物为将人葡萄膜黑色素瘤细胞移植到小鼠体内形成的异种移植肿瘤动物；
优选地，在所述治疗中，向所述葡萄膜黑色素瘤个体的瘤细胞或瘤组织、所述体外葡萄膜黑色素瘤组织、或所述体外葡萄膜黑色素瘤细胞施用肿瘤化疗药物前体5-氟胞嘧啶；
优选地，所述溶瘤性单纯疱疹病毒含有能够将肿瘤化疗药物前体5-氟胞嘧啶转化为肿瘤化疗药物的编码胞嘧啶脱氨酶的基因；
优选地，所述溶瘤性单纯疱疹病毒是γ134.5缺失、ICP47缺失和糖蛋白US11的存在，且编码胞嘧啶脱氨酶的基因插入γ134.5位置的重组溶瘤性1型单纯疱疹病毒；
优选地，编码所述胞嘧啶脱氨酶的基因为大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶基因；
优选地，所述胞嘧啶脱氨酶基因所编码的氨基酸序列如SEQIDNO.14所示；
优选地，所述胞嘧啶脱氨酶基因的核酸序列如SEQIDNO.13所示；
优选地，所述标记物为IL-6信号传导途径的标记物、STAT3信号传导途径的标记物和/或TGFbeta信号传导途径的标记物；
更优选地，所述标记物选自：DPD、TWIST1、ZEB1、CD44、CDH1、IL-6、TS、p-STAT3、CDH2、波形蛋白中的任1-10种。


3.一种用于检测权利要求1或2所述标记物的试剂，所述试剂为用于检测所述标记物的mRNA表达量的试剂和/或用于检测所述标记物的蛋白表达量的试剂。


4.如权利要求3所述的试剂，其特征在于，用于检测所述标记物的mRNA表达量的试剂包括使用定量PCR方法检测所述标记物表达量的试剂，使用基因芯片方法检测所述标记物表达量的试剂，或者使用高通量测序方法检测所述标记物表达量的试剂；
优选地，所述使用定量PCR方法检测所述标记物表达量的试剂包括检测所述标记物的定量PCR引物对；
优选地，检测所述标记物的定量PCR引物对选自检测DPD的定量PCR引物对、检测TWIST1的定量PCR引物对、检测ZEB1的定量PCR引物对、检测CD44的定量PCR引物对、检测CDH1的定量PCR引物对、检测IL-6的定量PCR引物对、检测TS的定量PCR引物对、检测p-STAT3的定量PCR引物对、检测CDH2的定量PCR引物对、检测波形蛋白的定量PCR引物对中的任1-10对；
优选地，所述检测DPD的定量PCR引物对的特异性序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示；
所述检测TWIST1的定量PCR引物对的特异性序列如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示；
所述检测ZEB1的定量PCR引物对的特异性序列如SEQIDNO.5和SEQIDNO.6所示；
所述检测CD44的定量PCR引物对的特异性序列如SEQIDNO.7和SEQIDNO.8所示；和/或
所述检测CDH1的定量PCR引物对的特异性序列如SEQIDNO.9和SEQIDNO.10所示；
优选地，所述用于检测所述标记物的mRNA表达量的试剂还包括使用定量PCR方法检测内参基因表达量的试剂；
优选地，所述内参基因选自GAPDH、β-Actin或其组合。
优选地，所述检测内参...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘福生，刘思思，张俊文，
申请(专利权)人：北京市神经外科研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11