microRNA-200簇微小RNA在促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的应用制造技术

本发明专利技术提供了miRNA‑200簇的微小RNA在促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的应用。具体地，本发明专利技术提供了一种活性成分的用途，所述的活性成分选自miRNA‑200簇的微小RNA、前体miRNA、多核苷酸、表达载体、miRNA‑200簇的微小RNA的激动剂。本发明专利技术的miRNA‑200簇的微小RNA能够上调MSC的BMP‑2基因和蛋白表达，特别是能够促进间充质干细胞向成骨细胞的分化，增强碱性磷酸酶活性和钙沉积，从而达到促进成骨细胞，促进骨形成、修复骨缺损或治疗骨坏死及骨质疏松等疾病的效果。

【技术实现步骤摘要】
microRNA-200簇微小RNA在促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的应用
本专利技术属于生物领域。具体地，涉及microRNA-200微小RNA在促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的应用。
技术介绍
老年骨质疏松发病率高，临床并发症多，致死率致残率高，引起的骨痛、骨折、骨骼畸形、骨坏死和骨不连接等并发症治疗困难棘手，一直是困扰临床医生和病人的问题。相对于绝经后骨质疏松，老年性骨质疏松的特点为成骨细胞功能降低，骨质量受损，骨骼强度发生不可逆转的改变，但目前临床上治疗老年性骨质疏松缺乏有效手段，治疗药物非常有限，因为不能有效提高骨强度，所以往往不能从本质上改善病情。研究发现，增龄相关的成骨细胞功能减退主要原因为，骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨分化减少，而向脂肪细胞分化增加，导致老年人的骨髓腔中红骨髓减少，取而代之的是大量脂肪组织形成的黄骨髓。所以，提高老年成骨细胞功能，增加骨质形成的关键在于促进间充质干细胞向成骨细胞的分化，减少其向脂肪细胞的分化。MSC向成骨细胞分化是目前研究热点,已有大量文献报道骨形态发生蛋白(Bone本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种活性成分的用途，所述的活性成分选自下组：/n(a).miRNA-200簇的微小RNA，/n其中，所述miRNA-200簇的微小RNA选自下组：/n(a1)miRNA-200类微小RNA，所述的miRNA-200类微小RNA选自下组:miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-141和miR-429；/n(a2)经修饰的miRNA-200类微小RNA衍生物；或核心序列为AAUACUG、长度为2-8nt、功能与miRNA-200类微小RNA相同或基本相同的微小RNA或经修饰的miRNA衍生物；/n(b).前体miRNA，所述的前体miRNA能在宿主内加工成(a)中所述的m...

【技术特征摘要】
1.一种活性成分的用途，所述的活性成分选自下组：
(a).miRNA-200簇的微小RNA，
其中，所述miRNA-200簇的微小RNA选自下组：
(a1)miRNA-200类微小RNA，所述的miRNA-200类微小RNA选自下组:miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-141和miR-429；
(a2)经修饰的miRNA-200类微小RNA衍生物；或核心序列为AAUACUG、长度为2-8nt、功能与miRNA-200类微小RNA相同或基本相同的微小RNA或经修饰的miRNA衍生物；
(b).前体miRNA，所述的前体miRNA能在宿主内加工成(a)中所述的miRNA-200簇的微小RNA；
(c).多核苷酸，所述的多核苷酸能被宿主转录形成(b)中所述的前体miRNA，并加工形成(a)中所述的微小RNA；
(d).表达载体，所述表达载体含有(a)中所述的miRNA-200簇的微小RNA、或(b)中所述的前体miRNA、或(c)中所述的多核苷酸；
(e).(a)中所述的微小RNA的激动剂；
其中，所述的活性成分用于制备一药物组合物，所述药物组合物用于治疗/预防成骨功能低下疾病。


2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述成骨功能低下疾病选自下组：老年性骨质疏松症、糖皮质激素性骨质疏松、骨折不愈合或延迟愈合、骨不连接、骨坏死、糖尿病合并骨质疏松、HIV合并骨质疏松、或其组合。


3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(a)中所述经修饰的miRNA衍生物是具有式I所示结构的化合物单体或其多聚体：
(X)n-(Y)m(I)
式中，
各X为(a)中所述的微小RNA；
各Y独立地为促进微小RNA施药稳定性的修饰物；
Y连接于X的左侧、右侧或中间；
n为1-100的(较佳地1-20)正整数(较佳地n为1、2、3、4或5)；
m为1-1000的(较佳地1-200)正整数；
各“-”表示接头、化学键、或共价键。


4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(b)所述的前体miRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.:6所示。


5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(c)中所述的多核苷酸具有式II所示的结构：
Seq正向-X-Seq反向
式II，
式II中，
Seq正向为能在宿主中被加工成所述的微小RNA核苷酸序列；
Seq反向为与Seq正向基本上互补或完全互补的核苷酸序列；
X为位于Seq正向和Seq反向之间的间隔序列，并且所述间隔序列与Seq正向和Seq反向不互补；
并且式II所示的结构在转入宿主细胞后，形成式III所示的二级结构：



式III中，Seq正向、Seq反向和X的定义如上述，
||表示在Seq正向和Seq反向之间形成的碱基互补配对关系。


6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(e)中所述miRNA-200簇的微小RNA的激动剂选自下组：促进miRNA-200簇的微小RNA表达的物质、提高miRNA-200簇的微小RNA活性的物质。


7.一种药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物含有活性成分，和药学上可接受的载体，其中，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：程群，任进，史宏利，戚新明，
申请(专利权)人：华东医院，中国科学院上海药物研究所，
类型：发明
国别省市：上海;31