提高丹参毛状根中丹酚酸B含量的方法及漆酶基因技术

本发明专利技术提供了一种提高丹参毛状根中丹酚酸B含量的方法，其特征在于，通过在丹参毛状根中过表达丹参漆酶SmLAC20基因从而得到丹酚酸B含量提高的转基因丹参毛状根，包括如下步骤：步骤S1，构建含有丹参漆酶SmLAC20基因的过表达载体；步骤S2，将步骤S1得到的过表达载体转染入农杆菌，得到重组农杆菌；步骤S3，用步骤S2得到的重组农杆菌转化丹参组织并诱导发根，获得转基因丹参毛状根，其中，丹参漆酶SmLAC20基因的序列如SEQ ID No：2所示。

Methods of increasing salvianolic acid B content in hairy roots of Salvia miltiorrhiza and laccase gene

【技术实现步骤摘要】
提高丹参毛状根中丹酚酸B含量的方法及漆酶基因
本专利技术属于基因工程领域，涉及一种提高丹参毛状根中丹酚酸B含量的方法，以及在该方法中应用的漆酶基因。
技术介绍
丹参(SalviamiltiorrhizaBunge)是一种重要的中药材，包含多种有效成分。其中，丹酚酸B是研究得较多的一种，具有抗氧化、抗肿瘤、保护心血管系统等多种药理作用。目前，丹酚酸B的获得主要依赖于从丹参的干燥根中提取。然而，自然状态下丹参根部的丹酚酸B含量较低，使得丹参根部提取物中的丹酚酸B含量也不够理想，影响了其药用价值。研究表明，丹参体内酚酸类化合物共用同一个生物途径。在丹酚酸B的生物合成过程(生物合成过程参见附图1)中，迷迭香酸(RA)是丹酚酸B(SAB)的直接前体，并且该转化过程关系到丹参中SAB的最终含量。
技术实现思路
本专利技术的专利技术人在发现前述SAB生物合成过程的基础上进行了体外酶转化试验，发现漆酶能够将RA转化为SAB。专利技术人进一步发现，丹参体内有多种疑似漆酶的基因，但其中仅有少数对SAB的含量具有影响。基于本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高丹参毛状根中丹酚酸B含量的方法，其特征在于，通过在所述丹参毛状根中过表达丹参漆酶SmLAC20基因从而得到丹酚酸B含量提高的转基因丹参毛状根，包括如下步骤：/n步骤S1，构建含有所述丹参漆酶SmLAC20基因的过表达载体；/n步骤S2，将步骤S1得到的所述过表达载体转染入农杆菌，得到重组农杆菌；/n步骤S3，用步骤S2得到的所述重组农杆菌转化丹参组织并诱导发根，获得所述转基因丹参毛状根，/n其中，所述丹参漆酶SmLAC20基因的序列如SEQ ID No：2所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种提高丹参毛状根中丹酚酸B含量的方法，其特征在于，通过在所述丹参毛状根中过表达丹参漆酶SmLAC20基因从而得到丹酚酸B含量提高的转基因丹参毛状根，包括如下步骤：
步骤S1，构建含有所述丹参漆酶SmLAC20基因的过表达载体；
步骤S2，将步骤S1得到的所述过表达载体转染入农杆菌，得到重组农杆菌；
步骤S3，用步骤S2得到的所述重组农杆菌转化丹参组织并诱导发根，获得所述转基因丹参毛状根，
其中，所述丹参漆酶SmLAC20基因的序列如SEQIDNo：2所示。


2.根据权利要求1所述的提高丹参毛状根中...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈万生，张磊，陈亮，李卿，冯婧娴，王芸，谭何新，陈昊轩，
申请(专利权)人：上海长征医院，
类型：发明
国别省市：上海;31