一种提取精液基因组DNA的试剂盒及方法技术

本发明专利技术适用于核酸分离纯化技术领域，提供了一种提取精液基因组DNA的试剂盒及方法，该试剂盒包括蛋白酶溶液、清洗液、洗脱液、纯化柱、溶液S、溶液K、溶液N和溶液D。其中，溶液S包括十二烷基硫酸钠、乙二胺四乙酸和第一缓冲液；溶液K包括氯化钠溶液、氯化钾溶液和无水乙醇；溶液N包括乙基苯基聚乙二醇、脱氧胆酸钠、硫氰酸胍和第二缓冲液；溶液D为二硫苏糖醇溶液。该试剂盒可充分裂解精子的细胞核与染色质，DNA得率高，重复性好，其可用于从人类以及动物的精液样本中提取基因组DNA，适合PCR、定量PCR、数字PCR、一代DNA测序、二代DNA测序、三代DNA测序、基因芯片分析、核酸质谱等各类分子生物学检验。

A kit and method for extracting sperm genomic DNA

【技术实现步骤摘要】
一种提取精液基因组DNA的试剂盒及方法
本专利技术属于核酸分离纯化
，尤其涉及一种提取精液基因组DNA的试剂盒及方法。
技术介绍
哺乳动物的有核细胞都可以用于制备基因组DNA。除了特殊要求外，白细胞、肝组织或脾组织是DNA提取最常用的材料。原始材料较少或较难获得时(如羊水细胞)，还必须经过细胞培养来获得足够量的细胞。有时为了简便易行起见，还可以无创伤地采集材料，如口腔上皮脱落细胞、发根的毛囊细胞等。有些类型的样本由于其本身的特殊性，DNA提取存在困难，得率偏低。比如成熟精子的细胞核染色质高度致密，染色质中的DNA与组蛋白裂解、分离困难，导致DNA得率低。因此，研发优质的精子DNA提取试剂盒和生产工艺具有重要意义。市场上已有的精子DNA提取产品虽然可以去除高浓度的金属离子和有机溶剂，以及可以降低蛋白质、多糖、多酚等生物大分子残留；但是这些产品存在价格较贵以及检测性能仍然不足的问题。
技术实现思路
本专利技术实施例的目的在于提供一种提取精液基因组DNA的试剂盒，旨在解决
技术介绍
中提出的问题。本专利技本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提取精液基因组DNA的试剂盒，包括蛋白酶溶液、清洗液、洗脱液和纯化柱，其特征在于，还包括：/n溶液S；所述溶液S包括十二烷基硫酸钠、乙二胺四乙酸和第一缓冲液；其中，十二烷基硫酸钠的浓度为12.5～25mg/mL，乙二胺四乙酸的浓度为12.5～25mmol/L；/n溶液K；所述溶液K包括氯化钠溶液、氯化钾溶液和无水乙醇；/n溶液N；所述溶液N包括乙基苯基聚乙二醇、脱氧胆酸钠、硫氰酸胍和第二缓冲液；其中，乙基苯基聚乙二醇的浓度为0.4～0.8mg/mL，脱氧胆酸钠的浓度为0.1～0.3mg/mL，硫氰酸胍的浓度为0.3～0.7mol/L；/n溶液D；所述溶液D为二硫苏糖醇溶液；其中，二硫苏...

【技术特征摘要】
1.一种提取精液基因组DNA的试剂盒，包括蛋白酶溶液、清洗液、洗脱液和纯化柱，其特征在于，还包括：
溶液S；所述溶液S包括十二烷基硫酸钠、乙二胺四乙酸和第一缓冲液；其中，十二烷基硫酸钠的浓度为12.5～25mg/mL，乙二胺四乙酸的浓度为12.5～25mmol/L；
溶液K；所述溶液K包括氯化钠溶液、氯化钾溶液和无水乙醇；
溶液N；所述溶液N包括乙基苯基聚乙二醇、脱氧胆酸钠、硫氰酸胍和第二缓冲液；其中，乙基苯基聚乙二醇的浓度为0.4～0.8mg/mL，脱氧胆酸钠的浓度为0.1～0.3mg/mL，硫氰酸胍的浓度为0.3～0.7mol/L；
溶液D；所述溶液D为二硫苏糖醇溶液；其中，二硫苏糖醇的浓度1～2mol/L。


2.根据权利要求1所述的一种提取精液基因组DNA的试剂盒，其特征在于，所述第一缓冲液为0.5～1.5mol/L的Tris-HCl缓冲液，其pH值为8～8.5；每升所述溶液S中包含6.25～18.75mL的第一缓冲液。


3.根据权利要求1所述的一种提取精液基因组DNA的试剂盒，其特征在于，所述第二缓冲液为40～60mmol/L的Tris-HCl缓冲液，其pH值为8～8.5。


4.根据权利要求1所述的一种提取精液基因组DNA的试剂盒，其特征在于，每升所述溶液K包括以下组分：氯化钠溶液10～15mL、氯化钾溶液0.5～1.5mL，余量为无水乙醇；其中，氯化钠溶液的浓度为0.1～3.5mol/L，氯化钾溶液的浓度为40～60mmol/L。


5.根据权利要求1所述的一种提取精液基因组DNA的试剂盒，其特征在于，所述蛋白酶溶液包括蛋白酶K，蛋白酶K的浓度为10～...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭燕芳，赵萱，
申请(专利权)人：阅尔基因技术苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32