一种用于动物病理组织核酸的快速提取方法技术

技术编号:26162214 阅读:29 留言:0更新日期:2020-10-31 12:51
本申请属于核酸纯化技术领域,具体为一种用于动物病理组织核酸的快速提取方法,制备步骤如下:(1)研磨,将动物组织病料于液氮下研磨至粉末,后将研磨后的动物组织病料超声处理3次,处理条件为:功率350W,频率26kHz,超声时间5s,间歇1min;(2)裂解:向步骤(1)所得动物组织病料中加入裂解液一,用匀浆器处理得到匀浆液,向匀浆液中加入氯仿,并于8000r/min下离心,静置分层得含有核糖核酸的料液;(3)吸附:向含有核糖核酸的料液加入含有磁珠的裂解液二,静置,除去溶液得吸附有核糖核酸的磁珠;(4)清洗:将磁珠和洗涤液混合均匀,除去洗涤液,完成一次清洗,重复上述步骤3次以上;(5)洗脱:将经过清洗的磁珠至于洗脱液中,充分混合,除去磁珠得含有核糖核酸的洗脱液;(6)向洗脱液中加入乙醇和醋酸铵,充分搅拌后,静置、过滤得核糖核酸。

【技术实现步骤摘要】
一种用于动物病理组织核酸的快速提取方法
本申请属于核酸纯化
,具体为一种用于动物病理组织核酸的快速提取方法。
技术介绍
RNA是以DNA的一条链为模板,以碱基互补配对原则,转录而形成的一条单链,主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达,是遗传信息传递过程中的桥梁。动物疾病对畜牧业以及人类的食品安全都有着重要的影响,采用分子生物学方法对动物组织进行病原菌诊断能够获得最准确的结果,而病菌和病毒的遗传信息载体为核糖核酸,然而RNA极易变性、降解,因此,如何从动物组织中提取有效的核糖核酸尤为重要。
技术实现思路
为了解决上述技术问题,本申请提供了一种用于动物病理组织核酸的快速提取方法,本申请是通过下述方案实现的:一种用于动物病理组织核酸的快速提取方法,制备步骤如下:(1)研磨,将动物组织病料于液氮下研磨至粉末,后将研磨后的动物组织病料超声处理3次,处理条件为:功率350W,频率26kHz,超声时间5s,间歇1min;(2)裂解:向步骤(1)所得动物组织病料中加入裂解液一,用匀浆器处理得到匀浆液,向匀浆液中加入氯仿,并于8本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于动物病理组织核酸的快速提取方法,其特征在于,制备步骤如下:(1)研磨,将动物组织病料于液氮下研磨至粉末,后将研磨后的动物组织病料超声处理3次,处理条件为:功率350W,频率26kHz,超声时间5s,间歇1min;(2)裂解:向步骤(1)所得动物组织病料中加入裂解液一,用匀浆器处理得到匀浆液,向匀浆液中加入氯仿,并于8000r/min下离心,静置分层得含有核糖核酸的料液;(3)吸附:向含有核糖核酸的料液加入含有磁珠的裂解液二,静置,除去溶液得吸附有核糖核酸的磁珠;(4)清洗:将磁珠和洗涤液混合均匀,除去洗涤液,完成一次清洗,重复上述步骤3次以上;(5)洗脱:将经过清洗的磁珠至于洗脱液...

【技术特征摘要】
1.一种用于动物病理组织核酸的快速提取方法,其特征在于,制备步骤如下:(1)研磨,将动物组织病料于液氮下研磨至粉末,后将研磨后的动物组织病料超声处理3次,处理条件为:功率350W,频率26kHz,超声时间5s,间歇1min;(2)裂解:向步骤(1)所得动物组织病料中加入裂解液一,用匀浆器处理得到匀浆液,向匀浆液中加入氯仿,并于8000r/min下离心,静置分层得含有核糖核酸的料液;(3)吸附:向含有核糖核酸的料液加入含有磁珠的裂解液二,静置,除去溶液得吸附有核糖核酸的磁珠;(4)清洗:将磁珠和洗涤液混合均匀,除去洗涤液,完成一次清洗,重复上述步骤3次以上;(5)洗脱:将经过清洗的磁珠至于洗脱液中,充分混合,除去磁珠得含有核糖核酸的洗脱液;(6)向洗脱液中加入乙醇和醋酸铵,充分搅拌后,静置、过滤得核糖核酸。


2.如权利要求书1所述的一种用于动物病理组织核酸的快速提取方法,其特征在于,所述步骤(2)所述的裂解液一为盐酸胍、尿素、异硫氰酸铵、环己酮、醋酸钠和水。


3.如权利要求书2所述的一种用于动物病理组织核酸的快速提取方法,其特征在于,所述盐酸胍、尿素、异硫氰酸铵、环己酮、醋酸钠和水的质量比为90:50:110:15:11:1000。


4.如权利要求书1所...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈大为
申请(专利权)人:济南国益生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:山东;37

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