一种生物制剂中宿主残留rDNA的去除方法技术

一种酶制剂等生物制品中宿主残留DNA的去除方法，属于基因工程及酶制剂研究领域，本发明专利技术应用超滤、絮凝、鱼精蛋白处理、核酸酶降解及喷雾干燥等技术针对发酵液中rDNA对其进行处理。利用该技术最优条件下可将生物制剂中rDNA含量降至10ng/g以下。

【技术实现步骤摘要】
一种生物制剂中宿主残留rDNA的去除方法
一种生物制剂中宿主残留rDNA的去除技术。所述的宿主为基因工程菌，属于生物工程领域。
技术介绍
伴随着生物技术的发展，酶制剂、氨基酸、维生素等生物制品在食品、医药、农牧行业的应用日益增加。目前除木瓜蛋白酶等少数酶制剂是由动植物组织中直接提取之外，常见的酶制剂均由微生物培养获得，如饲用酶制剂的主要生产菌株即为利用基因重组技术构建的工程菌，而在氨基酸、维生素等大宗生物制品的生产中，多数也利用发酵法进行制备。尽管利用转基因技术能大幅度提高生产水平，但宿主细胞残留DNA却因为具有特别的潜在安全风险，一直是国内外监管机构关注的重点。如欧盟遵循“预防原则”，认为转基因技术存在着潜在风险，因此欧洲食品安全局(EFSA)规定出口至欧盟的生物制剂中重组DNA(rDNA)含量不得高于10ng/g。随着行业发展，人们对于转基因技术生产的产品中rDNA关注度日益增强，未来国家关于转基因技术的管控会愈加严格，因此本技术在生物产业的良性发展及降低转基因产品安全风险等方面均具有良好的应用前景。目前国外生物制剂中rDNA去除技本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基因工程菌生产的生物制品中rDNA去除方法，其特征在于，步骤为：/n(1)将产目的物的发酵菌株培养至一定阶段，提取并检测发酵液中rDNA含量；/n(2)利用板框过滤、微滤膜除菌进行固液分离；/n(3)在发酵液上清中添加絮凝剂，并根据发酵产物的耐热稳定性将温度控制在50-70℃之间；/n(4)利用微滤膜对步骤(3)获得的发酵液进行二次过滤，之后利用超滤膜进行浓缩；/n(5)在步骤(4)获得的浓缩液中添加鱼精蛋白，低速搅拌后利用超滤膜除杂；/n(6)在超滤膜透过液中添加核酸酶，过夜水解。/n(7)利用喷雾干燥塔对步骤(6)获得的水解液进行干燥。/n

【技术特征摘要】
1.一种基因工程菌生产的生物制品中rDNA去除方法，其特征在于，步骤为：
(1)将产目的物的发酵菌株培养至一定阶段，提取并检测发酵液中rDNA含量；
(2)利用板框过滤、微滤膜除菌进行固液分离；
(3)在发酵液上清中添加絮凝剂，并根据发酵产物的耐热稳定性将温度控制在50-70℃之间；
(4)利用微滤膜对步骤(3)获得的发酵液进行二次过滤，之后利用超滤膜进行浓缩；
(5)在步骤(4)获得的浓缩液中添加鱼精蛋白，低速搅拌后利用超滤膜除杂；
(6)在超滤膜透过液中添加核酸酶，过夜水解。
(7)利用喷雾干燥塔对步骤(6)获得的水解液进行干燥。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述絮凝剂添加比例为0.01％-2％，絮凝剂可以是碱式氯化铝或聚合硫酸铁，所述超滤膜为30kDa超滤膜。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述浓缩体积需在5～1...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨宏宇，王海燕，张广民，蔡辉益，
申请(专利权)人：北京挑战农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11