一种从艾叶中同时提取多糖和黄酮类成分的方法技术

本发明专利技术公开了一种从艾叶中同时提取多糖和黄酮类成分的方法，包括以下步骤：1)将艾叶粉加入离子液体双水相并进行超高压提取，离心收集提取液；2)将收集到的提取液静置分相，上相液过DEAE纤维素柱得到艾叶多糖溶液，下相液加入乙酸乙酯萃取并回收离子液体，然后过大孔树脂柱后得艾叶黄酮溶液；3)分别浓缩、干燥得到艾叶多糖和艾叶黄酮。本发明专利技术大幅降低了艾叶多糖和黄酮的生产成本和周期，具有提取效率高，产物纯度高，操作简单，能耗低、环境友好等优点，所得产物具有很好的降血脂活性。

A method for simultaneous extraction of polysaccharides and flavonoids from Artemisia argyi leaves

【技术实现步骤摘要】
一种从艾叶中同时提取多糖和黄酮类成分的方法
本专利技术涉及一种从艾叶中同时提取多糖和黄酮类成分的方法，属于天然药物领域。
技术介绍
艾叶是一种菊科艾属多年生草本植物，在我国，艾叶种类繁多、分布广泛、且有悠久的药用和食用历史。其叶、茎、籽均可入药，其中叶具有散寒止痛、温经止血、祛湿止痒功效，我国民间还有饮艾酒、食用艾饼的习惯，是人们喜爱的一种天然野生蔬菜。现代研究发现，艾叶的化学成分主要包含蛋白质、各种矿物质、脂肪、黄酮、多糖和挥发油等，其中研究最多的是挥发油，而针对黄酮和多糖类化合物的研究相对较少。艾叶黄酮和艾叶多糖具有丰富的生物活性，如抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、提高免疫力等，艾叶生物活性的研究发展需要依靠提取、分离、纯化等技术的支撑，因此如何高效获得高质量的天然产物，对艾叶研究具有重大意义。目前艾叶黄酮和艾叶多糖的提取方法主要有常规溶剂提取法、微波或超声波辅助提取法、酶解法、超临界萃取法等，如CN109929047公开了一种采用超声波辅助水提艾叶多糖的方法，但所需提取时间长(10-30min)、提取温度高(60-80℃)，容易导致提取物的活性下降；CN109363969公开了一种艾草有效成分的综合利用方法，采用超临界CO2辅助提取艾叶黄酮和艾叶多糖，但超临界设备成本高，而且非极性的CO2多适用于提取脂溶性物质，对于极性的艾叶黄酮和多糖提取效率很低。超高压能在常温下使细胞结构发生变化，细胞内的有效成分能与提取溶剂在短时间内充分接触，达到快速、高效地提取目的。由于超高压能够对非共价键(氢键、离子键、疏水键)产生影响，而共价键不受影响，因此高压能使蛋白质变性、酶失活、微生物死亡等，而不破坏原料中小分子有效成分的生理活性，达到纯化、灭菌的目的，因此在制药和食品领域得到广泛应用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从艾叶中同时提取多糖和黄酮类成分的方法，以克服现有方法工艺复杂、成本高、效率低等问题。上述目的是通过以下技术方案实现的：一种从艾叶中同时提取多糖和黄酮类成分的方法，包括以下步骤：1)将艾叶粉按1：10-30的料液比加入离子液体双水相并在100-500MPa的压力下进行超高压提取，离心收集提取液；2)将收集到的提取液静置分相，上相液过DEAE纤维素柱，依次用水和NaCl溶液洗脱，收集含有艾叶多糖的洗脱液，下相液加入乙酸乙酯萃取并回收离子液体，然后过大孔树脂柱，用60-90％乙醇洗脱，收集含有艾叶黄酮的洗脱液；3)将洗脱液分别浓缩、干燥，得到艾叶多糖和艾叶黄酮。优选地，所述离子液体双水相中含有0.2-0.5g/mL的离子液体和0.05-0.15g/mL的盐。优选地，所述离子液体双水相中含有0.3g/mL的离子液体和0.09g/mL的盐。所述离子液体包括但不限于[C8MIM]PF6、[C4MIM]Cl、[C6MIM]Br、[BMIM]Cl、[C2MIM]BF4等，所述盐包括但不限于氯化钠、硫酸钾、磷酸氢二钾、硫酸铵、碳酸钠、硝酸镁等，本专利技术优选的离子液体为溴化1-己基-3-甲基咪唑([C6MIM]Br)，该离子液体的极性和溶解性更有利于提取艾叶黄酮和多糖，本专利技术优选的盐为K2HPO4。优选地，所述压力为200-300Mpa。优选地，所述超高压提取的保压时间是1-10min。所述大孔树脂柱包括但不限于D101、AB-8、H103、ADS-7、NKA-9、HP-20、S-8、X-5等型号，本专利技术优选为AB-8型大孔树脂柱，该大孔树脂柱对艾叶黄酮具有更优异的纯化能力。优选地，所述乙醇为80％乙醇。本专利技术还提供了一种降血脂药物，其活性成分是艾叶多糖和艾叶黄酮，所述艾叶多糖和艾叶黄酮是按以上所述方法提取的。根据本专利技术的一个实施例，当用于降血脂药物时，所述艾叶多糖与艾叶黄酮的质量比为1：2。本专利技术中所涉及的料液比指的是重量体积比，单位是g:mL。本专利技术中所涉及乙醇浓度均指体积浓度，如80％乙醇指的是每100ml乙醇水溶液中含有乙醇80ml。本专利技术的有益效果是：1)使用离子液体双水相进行提取，试验证明，与乙酸乙酯、蒸馏水等常规提取溶剂相比具有较高的艾叶多糖和黄酮提取率，更加特别的是，当使用离子液体双水相时，能够将提取液通过简单的分相操作实现艾叶多糖和黄酮的分离，而普通的提取溶剂通常要经过复杂的萃取、层析等步骤才能实现多种物质的分离，因此本专利技术还大幅降低了生产的成本和周期。2)本专利技术在常温下使用超高压对活性成分进行提取，与常规的煎煮、回流、微波或超声波辅助提取、酶解法相比，具有温度低、时间短等优点，提取时间不超过10min，因此不会对温度敏感的活性成分造成破坏，与超临界萃取、渗漏等低温提取方式相比，本专利技术不依赖于昂贵的设备，而且具有周期短的优点。本专利技术通过对超高压提取中提取溶剂的种类和浓度、料液比、提取压力和时间等进行大量优化，进一步提高了艾叶多糖和黄酮的提取率。3)提取产物中杂质含量低、生理活性成分纯度高、分子量小、生物利用率高，试验表明具有很好的降血脂作用，可制作成粉剂、片剂、胶囊、口服液等食品、保健品或药品。4)本专利技术还具有操作简单、设备安全、能耗低、环境友好等优点。附图说明图1：不同溶剂对提取率的影响。图2：不同料液比对提取率的影响。图3：不同浸泡时间对提取率的影响。图4：各组动物总甘油三酯含量变化。图5：各组动物总胆固醇含量变化。图6：各组动物高密度脂蛋白含量变化。图7：各组动物低密度脂蛋白含量变化。具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术进行详细说明。实施例1提取工艺预试验步骤1.于每年6月1日～6月15日采摘新鲜艾叶的叶，洗净后在40-50℃下干燥，烘干后粉碎过40-60目筛得到艾叶粉末。步骤2.称取10g艾叶粉末于聚乙烯塑料袋中，按一定的料液比加入不同溶剂密封，室温下浸泡一段时间后，放入超高压提取设备，在100～500MPa的压力下保持一定时间，然后卸压。分别采用苯酚硫酸法和紫外分光光度计法检测提取液中艾叶多糖和艾叶黄酮含量。采用单因素法考察提取溶剂、料液比和浸泡时间对艾叶多糖和艾叶黄酮提取率的影响。①提取溶剂对提取率的影响分别用[C6mim]Br/K2HPO4离子液体双水相、80％乙酸乙酯、蒸馏水为提取溶剂按料液比1:20(g:mL)，室温浸泡12h后，在200MPa的压力下提取2min。试验结果如图1所示，从提取率(提取率＝多糖质量或黄酮质量/艾叶干粉质量×100％)结果来看，无论是艾叶多糖还是艾叶黄酮，[C6mim]Br/K2HPO4离子液体双水相和蒸馏水的提取效果都优于乙酸乙酯，尤其是采用离子液体提取艾叶黄酮的提取率最高，可能与其阴、阳离子结构有关。因此优先选择[C6mim]Br/K2HPO4离子液体双水相。②料液比对提取率的影响以蒸馏水为提取溶剂，料液比分别为1:10、1:20、1:30、1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从艾叶中同时提取多糖和黄酮类成分的方法，其特征在于包括以下步骤：/n1)将艾叶粉按1：10-30的料液比加入离子液体双水相并在100-500MPa的压力下进行超高压提取，离心收集提取液；/n2)将收集到的提取液静置分相，上相液过DEAE纤维素柱，依次用水和NaCl溶液洗脱，收集含有艾叶多糖的洗脱液，下相液加入乙酸乙酯萃取并回收离子液体，然后过大孔树脂柱，用60-90％乙醇洗脱，收集含有艾叶黄酮的洗脱液；/n3)将洗脱液分别浓缩、干燥，得到艾叶多糖和艾叶黄酮。/n

【技术特征摘要】
1.一种从艾叶中同时提取多糖和黄酮类成分的方法，其特征在于包括以下步骤：
1)将艾叶粉按1：10-30的料液比加入离子液体双水相并在100-500MPa的压力下进行超高压提取，离心收集提取液；
2)将收集到的提取液静置分相，上相液过DEAE纤维素柱，依次用水和NaCl溶液洗脱，收集含有艾叶多糖的洗脱液，下相液加入乙酸乙酯萃取并回收离子液体，然后过大孔树脂柱，用60-90％乙醇洗脱，收集含有艾叶黄酮的洗脱液；
3)将洗脱液分别浓缩、干燥，得到艾叶多糖和艾叶黄酮。


2.如权利要求1所述从艾叶中同时提取多糖和黄酮类成分的方法，其特征在于：所述离子液体双水相中含有0.2-0.5g/mL的离子液体和0.05-0.15g/mL的盐。


3.如权利要求2所述从艾叶中同时提取多糖和黄酮类成分的方法，其特征在于：所述离子液体双水相中含有0.3g/mL的离子液体和0.09g/mL的盐。


4.如权利要求2所述从...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐丛玥，茹琴，熊琪，林款，
申请(专利权)人：江汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42