一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法技术

本发明专利技术公开了一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法，具体包括以下步骤：S1、称取1.00g一枝蒿，置于锥形瓶中，然后在锥形瓶中加入纤维素酶量，然后再加入10‑50mL且体积分数为30‑70％的乙醇溶液，调节pH为5，在水浴温度为30‑70℃的温度条件下，提取1.5h，反应结束后，放入微波超声萃取仪中，设置微波功率600W，微波时间为1‑5min；S2、根据S1中，待反应结束后，将溶液旋转蒸发至乙醇完全蒸出，本发明专利技术涉及黄酮萃取技术领域。该微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法，可实现采用微波辅助酶解法提取新疆一枝蒿总黄酮，同时在不同的变量中探究出最佳的试验方法及试验最佳条件，以提高新疆一枝蒿总黄酮的提取率，使得有效资源能够有效利用到最大化。

【技术实现步骤摘要】
一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法
本专利技术涉及黄酮萃取
，具体为一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法。
技术介绍
新疆一枝蒿是新疆特有的一种菊科多年生草本植物，为菊科蒿属苦艾组植物，主要分布在新疆北疆一带，新疆一枝蒿是维药中常用药物之一，以全草入药，新疆一枝蒿性寒，味辛苦，具有清热解毒、健胃消食、镇静止吐、抗过敏等功效，用于治疗毒蛇咬伤、荨麻疹、消化不良、感冒、过敏性疾病等，具有很高的开发利用价值，新疆一枝蒿作为疗效确切的地道药材，已广泛应用于临床，有研究报道新疆一枝蒿中含有黄酮类、倍半萜类、苷类、多糖类、挥发油类、新疆一枝蒿酮酸等化学成分，其中黄酮类化合物在新疆一枝蒿中含量丰富，是其主要活性成分，具有抗氧化、抗病毒、抑菌等作用，从新疆一枝蒿中已分离鉴定25个黄酮类成分，主要包括黄酮及黄酮苷、黄酮醇类、2-苯氧色原酮类等。新疆一枝嵩全草中含有如下化学成分：黄酮类、倍半萜类、多糖类及其氨基酸类、挥发油类和生物碱类等，目前对于新疆一枝蒿总黄酮的提取方法主要为传统的回流提取法和超声波法，超声波提取效率较高，但存在功率过高或提取时间过长导致黄酮类成分被破坏的情况，而且过程中消耗大量的有机溶剂，对环境不友好，因此本专利技术针对以上问题，提供了一种微波辅助酶解法制备新疆一枝蒿总黄酮的方法。
技术实现思路
(一)解决的技术问题针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法，解决了超声波提取效率较高，但存在功率过高或提取时间过长导致黄酮类成分被破坏的情况，而且过程中消耗大量的有机溶剂，对环境不友好的问题。(二)技术方案为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法，具体包括以下步骤：S1、称取1.00g一枝蒿，置于锥形瓶中，然后在锥形瓶中加入纤维素酶量，然后再加入10-50mL且体积分数为30-70％的乙醇溶液，调节pH为5，在水浴温度为30-70℃的温度条件下，提取1.5h，反应结束后，放入微波超声萃取仪中，设置微波功率600W，微波时间为1-5min；S2、根据S1中，待反应结束后，将溶液旋转蒸发至乙醇完全蒸出，用石油醚萃取三次之后将总黄酮的粗提取液全部转移至50mL容量瓶中，加入体积分数为95％的乙醇溶液定容，摇匀后作为待测样品溶液；S3、然后精密量取1mL待测液置于10mL比色皿中，用蒸馏水补充至3mL，各比色皿中加入5％的NaNO2溶液0.5mL，摇匀放置6min，再加10％的Al(NO3)3溶液0.5mL，摇匀放置6min，加4％的NaOH溶液5.0mL，加水至刻度，摇匀放置15min；S4、最后使用紫外分光光度法，可见分光光度计在510.5nm测吸光度，然后对照标准曲线求得总黄酮浓度，最后按照下列公式计算总黄酮提取量(mg/g)，计算公式：优选的，所述S1中的纤维素酶量为7％，纤维素酶能够破坏植物中的细胞壁，可以使细胞内活性成分的溶出量增加，因此加入的酶量对总黄酮的提取效果有重要影响。优选的，所述S4中的紫外分光光度法在190-760nm波长范围内测定物质的吸光度，是一种用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法，当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化，因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱，从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性，因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质，用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。优选的，所述S2中的石油醚为戊烷和己烷的混合物，不溶于水，溶于无水乙醇、苯、氯仿、油类等多数有机溶剂，易燃易爆，与氧化剂可强烈反应，主要用作溶剂和油脂处理，通常用铂重整抽余油或直馏汽油经分馏、加氢或其他方法制得。优选的，所述S4中计算公式的Y为总黄酮含量(mg/g)，k为待测液与测试液体积之比，c为标准曲线法计算所得浓度(mg/mL)，V为测试液定容的体积(mL)，m为新疆一枝蒿质量(g)。(三)有益效果本专利技术提供了一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法。具备以下有益效果：该微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法，通过S1、称取1.00g一枝蒿，置于锥形瓶中，然后在锥形瓶中加入纤维素酶量，然后再加入10-50mL且体积分数为30-70％的乙醇溶液，调节pH为5，在水浴温度为30-70℃的温度条件下，提取1.5h，反应结束后，放入微波超声萃取仪中，设置微波功率600W，微波时间为1-5min；S2、根据S1中，待反应结束后，将溶液旋转蒸发至乙醇完全蒸出，用石油醚萃取三次之后将总黄酮的粗提取液全部转移至50mL容量瓶中，加入体积分数为95％的乙醇溶液定容，摇匀后作为待测样品溶液；S3、然后精密量取1mL待测液置于10mL比色皿中，用蒸馏水补充至3mL，各比色皿中加入5％的NaNO2溶液0.5mL，摇匀放置6min，再加10％的Al(NO3)3溶液0.5mL，摇匀放置6min，加4％的NaOH溶液5.0mL，加水至刻度，摇匀放置15min；S4、最后使用紫外分光光度法，可见分光光度计在510.5nm测吸光度，然后对照标准曲线求得总黄酮浓度，最后按照下列公式计算总黄酮提取量(mg/g)，计算公式：可实现采用微波辅助酶解法提取新疆一枝蒿总黄酮，同时在不同的变量中探究出最佳的试验方法及试验最佳条件，以提高新疆一枝蒿总黄酮的提取率，使得有效资源能够有效利用到最大化。附图说明图1为本专利技术总黄酮提取量随乙醇体积分数的变化曲线图；图2为本专利技术总黄酮提取量随料液比的变化曲线图；图3为本专利技术总黄酮提取量随酶解温度的变化曲线图；图4为本专利技术总黄酮提取量随微波提取时间的变化曲线图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。请参阅图1-4，本专利技术实施例提供三种技术方案：一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法，具体包括以下实施例：实施例一S1、称取1.00g一枝蒿，置于锥形瓶中，然后在锥形瓶中加入纤维素酶量，然后再加入10mL且体积分数为30％的乙醇溶液，调节pH为5，在水浴温度为30℃的温度条件下，提取1.5h，反应结束后，放入微波超声萃取仪中，设置微波功率600W，微波时间为1min；S2、根据S1中，待反应结束后，将溶液旋转蒸发至乙醇完全蒸出，用石油醚萃取三次之后将总黄酮的粗提取液全部转移至50mL容量瓶中，加入体积分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：/nS1、称取1.00g一枝蒿，置于锥形瓶中，然后在锥形瓶中加入纤维素酶量，然后再加入10-50mL且体积分数为30-70％的乙醇溶液，调节pH为5，在水浴温度为30-70℃的温度条件下，提取1.5h，反应结束后，放入微波超声萃取仪中，设置微波功率600W，微波时间为1-5min；/nS2、根据S1中，待反应结束后，将溶液旋转蒸发至乙醇完全蒸出，用石油醚萃取三次之后将总黄酮的粗提取液全部转移至50mL容量瓶中，加入体积分数为95％的乙醇溶液定容，摇匀后作为待测样品溶液；/nS3、然后精密量取1mL待测液置于10mL比色皿中，用蒸馏水补充至3mL，各比色皿中加入5％的NaNO2溶液0.5mL，摇匀放置6min，再加10％的Al(NO3)3溶液0.5mL，摇匀放置6min，加4％的NaOH溶液5.0mL，加水至刻度，摇匀放置15min；/nS4、最后使用紫外分光光度法，可见分光光度计在510.5nm测吸光度，然后对照标准曲线求得总黄酮浓度，最后按照下列公式计算总黄酮提取量(mg/g)，计算公式：

【技术特征摘要】
1.一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：
S1、称取1.00g一枝蒿，置于锥形瓶中，然后在锥形瓶中加入纤维素酶量，然后再加入10-50mL且体积分数为30-70％的乙醇溶液，调节pH为5，在水浴温度为30-70℃的温度条件下，提取1.5h，反应结束后，放入微波超声萃取仪中，设置微波功率600W，微波时间为1-5min；
S2、根据S1中，待反应结束后，将溶液旋转蒸发至乙醇完全蒸出，用石油醚萃取三次之后将总黄酮的粗提取液全部转移至50mL容量瓶中，加入体积分数为95％的乙醇溶液定容，摇匀后作为待测样品溶液；
S3、然后精密量取1mL待测液置于10mL比色皿中，用蒸馏水补充至3mL，各比色皿中加入5％的NaNO2溶液0.5mL，摇匀放置6min，再加10％的Al(NO3)3溶液0.5mL，摇匀放置6min，加4％的NaOH溶液5.0mL，加水至刻度，摇匀放置15min；
S4、最后使用紫外分光光度法，可见分光光...

【专利技术属性】
技术研发人员：李雪，南光明，刘伟，王俊龙，居尔艾特提拜克，
申请(专利权)人：伊犁师范大学，
类型：发明
国别省市：新疆;65