一种熊胆外泌体在制备治疗II型糖尿病药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了熊胆外泌体在制备治疗II型糖尿病药物中的应用，属于分子生物学领域。所述熊胆外泌体包含有效作用于II型糖尿病的多种miRNA有效作用成分，可以降低大鼠的血糖并改善相关症状，为制备治疗糖尿病药物提供新的方向；本发明专利技术应用于制备治疗II型糖尿病药物的熊胆外泌体简单易得，可以单独使用或以药物组合物的形式使用，范围广泛，经济可行。

Application of a bear bile exosomes in the preparation of drugs for the treatment of type II diabetes mellitus

【技术实现步骤摘要】
一种熊胆外泌体在制备治疗II型糖尿病药物中的应用
本专利技术涉及分子生物学
，尤其涉及一种熊胆外泌体在制备治疗II型糖尿病药物中的应用。
技术介绍
糖尿病(DM)是一种以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖主要是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损，或两者兼有引起。长期的高血糖会导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。现代发现糖尿病群体过大，且尚无有效根治的方式和药物。临床治疗糖尿病药物仅仅只能降低血糖，但疗效较差，对机体造成较大损伤，如胰岛素和二甲双胍。糖尿病是多因素相互作用下形成的慢性糖脂代谢紊乱疾病，其自身及相关并发症已经严重影响全球人类健康。糖尿病并发症早期难察觉，往往在糖尿病前，即糖耐量减低(IGT)时就已产生。糖尿病治疗的各种口服降糖药，如双胍类、磺脲类、噻唑烷二酮类等，但不能有效的预防和治疗糖尿病并发症。中医药具有“多组分，多途径，多靶点，整体调节”的特点，在糖尿病及其并发症防治方面具有独特优势。熊胆是四大名贵动物药之一，为熊科动物的干燥胆囊(胆汁)，被誉为“药中黄金”。现代主要使用活体胆汁引流、冷冻干燥法获得，对熊基本无损伤。其始载于《药性论》记载其“主小儿五疳、杀虫、治恶疮”；历代医书记载了其凉肝血、泻肝火、清热解毒、清肝明目等功效，迄今应用千年疗效确切。熊胆作为药用始载于唐代的《新修本草》，距今已有一千三百多年历史。明代李时珍的《本草纲目》也载有：熊胆，气味苦寒、无毒，入肝胆心经。现代医药学研究证实，熊胆具有清热解毒、疏肝利胆，去翳明目，解痉镇痛作用。熊胆的抗炎、保肝、镇痛等多种药理活性也被发现。外泌体是指细胞内包含了复杂RNA(如microRNA或简写为miRNA、miR等)和蛋白质的小膜泡(30-150nm)，现多指直径在40-100nm的盘状囊泡，其在细胞与细胞交流传递中起着重要作用。目前发现外泌体具有较强的药理活性，且较一般化学成分具有更优的治疗效果。因此，有必要研究熊胆外泌体，通过提取和分析有效作用成分为制备治疗糖尿病的药物提供新的研究方向，进而为熊胆外泌体在制备治疗糖尿病药物方面的应用提供支撑。
技术实现思路
鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种熊胆外泌体在制备治疗II型糖尿病药物中的应用，为制备治疗糖尿病药物提供新的方向。本专利技术提供熊胆外泌体在制备治疗II型糖尿病的药物中的应用，所述熊胆外泌体包含有如下miRNA中的一种或多种：rno-miR-592、rno-miR-675-5p、rno-miR-1247-3p、rno-miR-3072、rno-miR-3541、rno-miR-343、rno-miR-673-3p、rno-miR-6324、rno-miR-1247-5p、rno-miR-370-3p、rno-miR-3585-5p、rno-miR-375-5p、rno-miR-92a-1-5p、rno-miR-434-5p、rno-miR-668、rno-miR-9a-5p、rno-miR-455-5p、rno-miR-3084a-3p、microRNA-368、microRNA-132-3p、microRNA-181a、microRNA-30b、microRNA-192、microRNA-29c、microRNA-149-3p、microRNA-144、microRNA-142、microRNA-Let-7b、microRNA-130b、microRNA-9-5p、microRNA-23b、microRNA-21，microRNA-20，microRNA-126。进一步地，所述熊胆外泌体包含以下miRNA中的一种或多种：rno-miR-592、rno-miR-675-5p、rno-miR-1247-3p、rno-miR-3072、rno-miR-3541、rno-miR-343、rno-miR-673-3p、rno-miR-6324、rno-miR-1247-5p、rno-miR-370-3p、rno-miR-3585-5p、rno-miR-375-5p、rno-miR-92a-1-5p、rno-miR-434-5p、rno-miR-668、rno-miR-9a-5p、rno-miR-455-5p、rno-miR-3084a-3p。本专利技术的另一个目的在于提供一种治疗II型糖尿病的药物组合物，包含上述应用中的熊胆外泌体。进一步地，所述药物组合物包括作为活性成分的熊胆；进一步地，所述药物组合物包括作为活性成分的可药用载体；进一步地，所述药物组合物包括作为活性成分的可药用辅料。本专利技术还一个目的在于提供一种预防II型糖尿病的保健品，包括本专利技术以上所述应用中的熊胆外泌体；进一步地，所述保健品包括抗氧化剂、色素、酶制剂各种食品添加剂中的一种或多种。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：1)本专利技术提供了熊胆外泌体在制备治疗II型糖尿病药物中的应用，该外泌体包含多种熊胆外泌体miRNA，可有效降低II型糖尿病大鼠的血糖及相关症状，为制备治疗糖尿病药物提供新的方向；2)应用于制备治疗II型糖尿病药物的熊胆外泌体简单易得，可以单独使用或以药物组合物的形式使用，范围广泛，经济可行。附图说明图1A为熊胆粉外泌体粒度分布；图1B为熊胆粉外泌体颗粒透射电子显微镜图像；1C为熊胆粉外泌体、熊胆粉、熊去氧胆酸HPLC结果。图2为II型糖尿病模型大鼠给予熊胆外泌体后的临床体征表现。图3为II型糖尿病模型大鼠给予熊胆外泌体后的血糖变化和糖耐量实验结果。图4为II型糖尿病模型大鼠给予熊胆外泌体后的器官指数。图5为II型糖尿病模型大鼠血清中的ALT和AST水平。图6为II型糖尿病模型大鼠肝脏中SOD、MDA和GSH的水平。图7为II型糖尿病模型大鼠肝和胰腺的组织学分析结果。图8为II型糖尿病模型大鼠肝脏中TNF-α和IL-1β的表达情况。图9为II型糖尿病模型大鼠肝脏中PPARα、NF-κB和CTP7A1水平。图10为熊胆外泌体调节糖脂代谢机制图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。本专利技术的是基于这样一个意外发现：熊胆及熊胆外泌体成分可以降低糖尿病小鼠的血糖和相关疾病损伤，故而其可以作为糖尿病的预防和治疗药物。如本专利技术所用，本专利技术的外泌体成分具有如下表征(图1A)：如本领域的普通技术人员所公知，上述外泌体分别具有如下粒径分布(图1B)：本专利技术熊胆(特指熊引流胆汁冻干粉即熊胆粉)可通过商业途径从四川省绿野生科制药有限公司等处购买获得，然后严格按照相关文献中的标准外泌体颗粒分离方法(差速离心法)进行分离，其纯度和相关物理化学特征均符合外泌体相关标准。本专利技术的熊胆外泌体可以单独使用或以药物组合物的形式使用。药物组合物包括作为活性成分的本专利技术的外泌体成分及熊胆及可药用载体。较佳地，本专利技术的药物组合物含有0.1-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种熊胆外泌体在制备治疗II型糖尿病药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.一种熊胆外泌体在制备治疗II型糖尿病药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述熊胆外泌体包括以下miRNA中的一种或多种：rno-miR-592、rno-miR-675-5p、rno-miR-1247-3p、rno-miR-3072、rno-miR-3541、rno-miR-343、rno-miR-673-3p、rno-miR-6324、rno-miR-1247-5p、rno-miR-370-3p、rno-miR-3585-5p、rno-miR-375-5p、rno-miR-92a-1-5p、rno-miR-434-5p、rno-miR-668、rno-miR-9a-5p、rno-miR-455-5p、rno-miR-3084a-3p、microRNA-368、microRNA-132-3p、microRNA-181a、microRNA-30b、microRNA-192、microRNA-29c、microRNA-149-3p、microRNA-144、microRNA-142、microRNA-Let-7b、microRNA-130b、microRNA-9-5p、microRNA-23b、microRNA-21、microRNA-20、microRNA-126。


3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述熊胆外泌体包括以下miRNA中...

【专利技术属性】
技术研发人员：任永申，邓旭坤，李燕，梁帅，
申请(专利权)人：武汉萃绿科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42