一种同时测定染发剂中32种染料的检测方法技术

本发明专利技术属于化妆品检测技术领域，具体涉及一种高效液相色谱串联质谱技术同时测定染发剂中32种染料的方法。本发明专利技术建立了一种简便、快速、高通量的测定方法，能够同时定量测定染发剂中32种染料，具有操作简单、灵敏度高、回收率好、重现性好且检测时间短、溶剂消耗小、检测通量高、检测效率高的优点，对于分析染发剂的质量安全具有非常重要的意义。

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定染发剂中32种染料的检测方法
本专利技术属于化妆品检测
，具体涉及一种高效液相色谱串联质谱技术同时测定染发剂中32种染料的检测方法。
技术介绍
染发剂是一种很常见的化妆品，在我国属于特殊用途化妆品，分为氧化型染发剂和非氧化型染发剂，市场上销售的染发剂80％为氧化型染发剂。目前越来越多的人喜欢染发，染发剂的消费人群也越来越年轻化，因此染发剂的安全性也备受关注。染发剂的危害主要来自于染料，染料的主要成分为苯胺类和苯酚类化合物，该类化合物具有致敏性和致癌性，长期使用会对人体健康造成慢性伤害，近几年研究报道染发剂的使用会使人们患乳腺癌和膀胱癌的风险至少上升25％。染发剂的使用与人们的健康息息相关，因此加强对染发剂的质量管理和完善染发剂的检测技术势在必行。国内外相关文献报道染料的检测方法包括薄层色谱法、毛细管电泳法、高效液相色谱法、气相色谱法、气相色谱-质谱法、高效液相色谱-质谱法等。薄层色谱法不能准确定量，气相色谱法和气相色谱-质谱法不利于分析热不稳定物质且染发剂样品基质复杂分离效果不理想，定性困难。虽然高效液相色谱-质谱法分离能力强、灵敏度高可降低基质效应并且可快速、准确地分析目标化合物，然而《化妆品安全技术规范》(2015年版)中未收录此类方法检测染发剂中的染料组分，并且现有技术对染发剂多种染料进行检测时存在对苯二酚、间苯二酚、2-甲基间苯二酚、4-氨基-3-硝基苯酚、4-氯间苯二酚、1,5-萘二酚、2,7-萘二酚、1-萘酚等组分响应值较低，检测结果不准确，不能实现对染发剂中32种染料的同时检测。因此急需建立一种基于液质联用的同时测定染发剂中32种染料的检测方法。本专利技术建立了一种简便、快速、高通量的高效液相色谱-串联质谱检测方法，可以对染色剂中32种染料进行同时测定，同时实现32种染料组分的稳定性进行分析，为染料组分的准确定量和质量监控提供理论依据，为染发剂中染料的测定提供技术支持。
技术实现思路
针对上述技术问题，本专利技术的目的在于提供一种同时测定染发剂中32种染料的方法，所述32种染料为2-氨基-3-羟基吡啶、对苯二胺、对氨基苯酚、间苯二胺、2,6-二氨基吡啶、间氨基苯酚、甲苯-2,5-二胺硫酸盐、2,4-二氨基苯氧基乙醇盐酸盐、4-氨基间甲酚、N,N-二(2-羟乙基)-对苯二胺硫酸盐、邻苯二胺、邻氨基苯酚、2-氯对苯二胺硫酸盐、苯基甲基吡唑啉酮、对甲基氨基苯酚硫酸盐、2-硝基对苯二胺、4-氨基-2-羟基甲苯、4-硝基邻苯二胺、甲苯-3,4-二胺、6-氨基间甲酚、6-羟基吲哚、N,N-二乙基对苯二胺硫酸盐、N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺盐酸盐、N-苯基对苯二胺、对苯二酚、间苯二酚、2-甲基间苯二酚、4-氨基-3-硝基苯酚、4-氯间苯二酚、1,5-萘二酚、2,7-萘二酚、1-萘酚；所述方法包括以下步骤：(1)混合标准溶液的配置；(2)基质加标工作溶液的配置：在步骤(1)中的混合标准溶液加入空白染发剂基质，获得不同浓度的基质加标工作溶液，所述空白染发剂基质为不含权利要求1所述32种染料的染发剂；(3)样品溶液的配置；(4)利用高效液相色谱-串联质谱仪分别对标准溶液和样品溶液进行检测分析：其中色谱分析条件为：采用WatersAtlantisT3色谱柱，柱温：40℃；流动相A为10mmol/L甲酸铵水溶液，pH为8；流动相B为体积比为1:1的乙腈-甲醇溶液；进样量2.0μL，流速：0.5mL/min；采用梯度洗脱程序：0～0.5min，98％A；0.5～1.3min，98％A～75％A；1.3～5.0min，75％A～30％A；5.0～6.0min，30％A～5％A；6.0～7.0min，5％A；7.0～7.1min，5％A～98％A；7.1～10min，98％A；质谱条件为：混合标准溶液A采用电喷雾离子源正离子(ESI+)模式，离子化电压为3500V，混合标准溶液B采用负离子(ESI-)模式，离子化电压为-3500V；加热温度(TEM)均为：500℃；气帘气(CUR)、喷撞气(CAD)、喷雾气(GS1)、辅助加热气(GS2)均分别为：35psi、8psi、65psi、50psi；扫描模式：多反应监测(MRM)；(5)样品中染料含量的计算：以基质加标工作溶液所检测出的目标物的色谱峰面积对应其相应浓度进行回归分析得到标准曲线线性方程，然后将样品溶液检出的目标物的色谱峰面积，分别代入目标物对应标准曲线线性方程，计算得到样品中32种染料目标物的含量。优选地，所述步骤(1)中混合标准溶液配置方法为：将2-氨基-3-羟基吡啶、对苯二胺、对氨基苯酚、间苯二胺、2,6-二氨基吡啶、间氨基苯酚、甲苯-2,5-二胺硫酸盐、2,4-二氨基苯氧基乙醇盐酸盐、4-氨基间甲酚、N,N-二(2-羟乙基)-对苯二胺硫酸盐、邻苯二胺、邻氨基苯酚、2-氯对苯二胺硫酸盐、苯基甲基吡唑啉酮、对甲基氨基苯酚硫酸盐、2-硝基对苯二胺、4-氨基-2-羟基甲苯、4-硝基邻苯二胺、甲苯-3,4-二胺、6-氨基间甲酚、6-羟基吲哚、N,N-二乙基对苯二胺硫酸盐、N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺盐酸盐和N-苯基对苯二胺的染料标准品用体积比为1:1的甲醇-2g/L亚硫酸氢钠水溶液溶解得混合标准溶液A；将对苯二酚、间苯二酚、2-甲基间苯二酚、4-氨基-3-硝基苯酚、4-氯间苯二酚、1,5-萘二酚、2,7-萘二酚、1-萘酚的染料标准品用体积比为1:1的甲醇-2g/L亚硫酸氢钠水溶液溶解得混合标准溶液B。优选地，所述混合标准溶液A的浓度为600μg/mL，所述混合标准溶液B的浓度为2000μg/mL。优选地，所述步骤(4)中混合标准溶液A采用电喷雾离子源正离子(ESI+)模式，离子化电压为3500V；所述混合标准溶液B采用负离子(ESI-)模式，离子化电压为-3500V。优选地，所述步骤(3)中样品溶液的配置为：准确称取样品0.5g加体积比为2:8甲醇-2g/L亚硫酸氢钠水溶液15mL混匀，离心，取上清液经0.22μm滤膜过滤，滤液作为样品溶液备用。优选地，所述步骤(5)中标准曲线线性方程的构建过程为：精密量取混合标准溶液至容量瓶中，配制不同浓度的空白基质加标溶液，根据步骤(4)所述分析条件进行高效液相色谱-串联质谱仪分析，根据基质加标工作溶液所检测出的目标物的色谱峰面积对应其相应浓度-进行回归分析得到标准曲线线性方程。本专利技术的有益效果是：本专利技术建立了一种简便、快速、高通量的测定方法，为染发剂中32种染料的检测提供了技术支持；本专利技术具有操作简单、灵敏度高、回收率好、重现性好且检测时间短、溶剂消耗小、检测通量高、检测效率高的优点，对于分析染发剂的质量情况具有非常重要的意义。附图说明图1正离子模式检测条件下染料总离子流色谱图；图2负离子模式检测条件下染料总离子流色谱图；图3正离子检测模式下染料组分峰面积随时间变化图；图4负离子检测模式下染料组分峰面积随时间变化图。具体实施方本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种同时测定染发剂中32种染料的方法，所述32种染料为2-氨基-3-羟基吡啶、对苯二胺、对氨基苯酚、间苯二胺、2,6-二氨基吡啶、间氨基苯酚、甲苯-2,5-二胺硫酸盐、2,4-二氨基苯氧基乙醇盐酸盐、4-氨基间甲酚、N,N-二(2-羟乙基)-对苯二胺硫酸盐、邻苯二胺、邻氨基苯酚、2-氯对苯二胺硫酸盐、苯基甲基吡唑啉酮、对甲基氨基苯酚硫酸盐、2-硝基对苯二胺、4-氨基-2-羟基甲苯、4-硝基邻苯二胺、甲苯-3,4-二胺、6-氨基间甲酚、6-羟基吲哚、N,N-二乙基对苯二胺硫酸盐、N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺盐酸盐、N-苯基对苯二胺、对苯二酚、间苯二酚、2-甲基间苯二酚、4-氨基-3-硝基苯酚、4-氯间苯二酚、1,5-萘二酚、2,7-萘二酚、1-萘酚；其特征在于，所述方法包括以下步骤：/n(1)混合标准溶液的配置；/n(2)基质加标工作溶液的配置：/n在步骤(1)中的混合标准溶液加入空白染发剂基质，获得不同浓度的基质加标工作溶液，所述空白染发剂基质为不含权利要求1所述32种染料的染发剂；/n(3)样品溶液的配置；/n(4)利用高效液相色谱-串联质谱仪分别对标准溶液和样品溶液进行检测分析：/n其中色谱分析条件为：采用Waters Atlantis T3色谱柱，柱温：40℃；流动相A为10mmol/L甲酸铵水溶液，pH为8；流动相B为体积比为1:1的乙腈-甲醇溶液；进样量2.0μL，流速：0.5mL/min；采用梯度洗脱程序：0～0.5min，98％A；0.5～1.3min，98％A～75％A；1.3～5.0min，75％A～30％A；5.0～6.0min，30％A～5％A；6.0～7.0min，5％A；7.0～7.1min，5％A～98％A；7.1～10min，98％A；/n质谱条件为：电喷雾离子源正离子(ESI...

【技术特征摘要】
1.一种同时测定染发剂中32种染料的方法，所述32种染料为2-氨基-3-羟基吡啶、对苯二胺、对氨基苯酚、间苯二胺、2,6-二氨基吡啶、间氨基苯酚、甲苯-2,5-二胺硫酸盐、2,4-二氨基苯氧基乙醇盐酸盐、4-氨基间甲酚、N,N-二(2-羟乙基)-对苯二胺硫酸盐、邻苯二胺、邻氨基苯酚、2-氯对苯二胺硫酸盐、苯基甲基吡唑啉酮、对甲基氨基苯酚硫酸盐、2-硝基对苯二胺、4-氨基-2-羟基甲苯、4-硝基邻苯二胺、甲苯-3,4-二胺、6-氨基间甲酚、6-羟基吲哚、N,N-二乙基对苯二胺硫酸盐、N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺盐酸盐、N-苯基对苯二胺、对苯二酚、间苯二酚、2-甲基间苯二酚、4-氨基-3-硝基苯酚、4-氯间苯二酚、1,5-萘二酚、2,7-萘二酚、1-萘酚；其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)混合标准溶液的配置；
(2)基质加标工作溶液的配置：
在步骤(1)中的混合标准溶液加入空白染发剂基质，获得不同浓度的基质加标工作溶液，所述空白染发剂基质为不含权利要求1所述32种染料的染发剂；
(3)样品溶液的配置；
(4)利用高效液相色谱-串联质谱仪分别对标准溶液和样品溶液进行检测分析：
其中色谱分析条件为：采用WatersAtlantisT3色谱柱，柱温：40℃；流动相A为10mmol/L甲酸铵水溶液，pH为8；流动相B为体积比为1:1的乙腈-甲醇溶液；进样量2.0μL，流速：0.5mL/min；采用梯度洗脱程序：0～0.5min，98％A；0.5～1.3min，98％A～75％A；1.3～5.0min，75％A～30％A；5.0～6.0min，30％A～5％A；6.0～7.0min，5％A；7.0～7.1min，5％A～98％A；7.1～10min，98％A；
质谱条件为：电喷雾离子源正离子(ESI+)模式，离子化电压为3500V；电喷雾离子源负离子(ESI-)模式，离子化电压为-3500V；加热温度(TEM)均为：500℃；气帘气(CUR)、喷撞气(CAD)、喷雾气(GS1)、辅助加热气(GS2)均分别为：35psi、8psi、65psi、50psi；扫描模式：多反应监测(MRM)；
(5)样品中染料含量的计算：
以基质加标工作溶液所检测出的目标物的色谱峰面积对应其相应浓度进行回归分析得到...

【专利技术属性】
技术研发人员：李若绮，孙莺，刘婷媛，武悦，杜兴，
申请(专利权)人：甘肃省药品检验研究院，
类型：发明
国别省市：甘肃;62