红核妇洁洗液一测多评指纹图谱的检测方法技术

本发明专利技术提供红核妇洁洗液一测多评指纹图谱的检测方法，该检测方法可以测定红核妇洁洗液中的糠醛、愈创木酚、5‑甲基愈创木酚、4‑甲基愈创木酚、3‑甲氧基邻苯二酚、4‑乙基愈创木酚、2,6‑二甲氧基苯酚、2,6‑二甲氧基‑4‑甲基苯酚等13种有效成分，本发明专利技术检测方法全面、高效、安全良好的特点，在工艺化大生产应用中有广阔的前景。

【技术实现步骤摘要】
红核妇洁洗液一测多评指纹图谱的检测方法
本专利技术涉及属于中成药化学分析检测领域，尤其涉及红核妇洁洗液一测多评指纹图谱的检测方法。
技术介绍
红核妇洁洗液是山东步长神州制药有限公司的妇科外用产品，该药的国药准字号为Z10980131，现今执行的国家药品标准编号为WS3－056(Z-010)-2001(Z)，其有效成分由山楂核一味中药材为原料，经干馏等现代制备工艺精制而成，该药中含酚类、醛类、酮类、有机酸类等多种有效活性成份，具有解毒祛湿，杀虫止痒的功效。用于湿毒下注之阴痒、带下；霉菌性阴道炎和非特异性阴道炎见上述证候者。其在治疗阴道炎方面具有突出的疗效，该产品之前已经申请多件专利技术专利申请：其专利申请号为03139655.0、201210071276.X、201210070908.0、201210070797.3、201410348891.X，上述专利保护内容主要集中在洗液、栓剂以及相关临床新用途方面。但由于红核妇洁洗液有良好的临床效果且市场销售前景广阔，而目前质量标准目前检测红核妇洁洗液质量的方法中愈创木酚的薄层鉴别(TLC)及糠醛、愈创木酚的GC含量测定。存在如下技术问题和缺陷：①、含量测定项的检测指标采用糠醛、愈创木酚两种成分，难以全面检测红核妇洁洗液的质量；②、红核妇洁洗液质量检测中采用的薄层鉴别方法(TLC)操作复杂、检验周期长，使用的化学有机试剂危害检验人员的职业健康。为了保证中药制剂的安全性与有效性，中药制剂质量检测的方法与手段成为中药现代化的最重要研究之一。按照传统中医药学的“整体观”，中药药效是药品中多个药效成分的综合效应的结果，而中药制剂的多中心多靶点特点使得单一成分或指标难以表达中药的质量，采用中药指纹图谱这种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。因此，迫切需要一种全面、高效、安全的质量检测方法能同时定性和定量测定及检测红核妇洁洗液的质量。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供红核妇洁洗液一测多评指纹图谱的检测方法，该检测方法采用气相指纹图谱测定红核妇洁洗液中的糠醛、愈创木酚、5-甲基愈创木酚、4-甲基愈创木酚、3-甲氧基邻苯二酚、4-乙基愈创木酚、2,6-二甲氧基苯酚、2,6-二甲氧基-4-甲基苯酚等13种有效成分，克服现有技术中薄层色谱法和单一成分检测方法。采用的13种成分为参照标准的全谱峰匹配指纹图谱技术可起到全面检测红核妇洁洗液质量及稳定性的作用，以保证其红核妇洁洗液的内在质量。本专利技术提供的技术方案如下：红核妇洁洗液一测多评指纹图谱的检测方法，所述检测方法包括如下步骤：⑴、供试品溶液的制备：取本品适量，混匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，即得；⑵、对照品标准液的制备：取愈创木酚对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含0.13～0.18mg/ml的溶液，即得；⑶、色谱条件与系统适用性试验：以石英毛细管柱为色谱柱；流速0.8～1.4ml/min；柱温为程序升温：初始温度55～65℃，以每分钟2～4℃的升温速率升温至85～95℃，保持2～5分钟，再以每分钟8～12℃的升温速率升温至110～130℃，保持6～10分钟，以每分钟4～6℃的升温速率升温至170～190℃，保持7～13分钟，再以每分钟30～50℃的升温速率升温至290～310℃，保持10～14分钟；进样口温度270～290℃；检测器温度290～310℃；分流进样，分流比8～12：1；⑷、色谱峰测定：将上述步骤⑴和⑵所制得的供试品和对照品溶液，注入气相色谱仪，按照上述步骤⑶的色谱条件，测定供试液溶液，记录6～48分钟的色谱图，即得，按中药色谱指纹图谱相似度评价系统，供试品指纹图谱与对照指纹图谱经相似度计算，相似度不得低于0.90。作为本专利技术的优选，所述步骤⑵对照品溶液制备方法中，愈创木酚储备液浓度为0.15mg/ml。作为本专利技术的进一步优选，所述步骤⑶色谱条件与系统适用性试验中，流速1.1ml/min；柱温为程序升温：初始温度60℃，以每分钟3℃的升温速率升温至90℃，保持4分钟，再以每分钟10℃的升温速率升温至120℃，保持8分钟，以每分钟5℃的升温速率升温至180℃，保持11分钟，再以每分钟40℃的升温速率升温至300℃，保持12分钟；进样口温度280℃；检测器温度300℃。作为本专利技术的优选，所述步骤⑶色谱条件与系统适用性试验中，分流进样，分流比：10：1。作为本专利技术的进一步优选，所述⑶色谱条件中，所述石英毛细管柱的固定相为5％苯基甲基聚硅氧烷，色谱柱型号为DB-5。为了突出本专利技术技术方案创新性，我们将本实验过程中筛选的部分实验提供如下。①、色谱柱优化：选择合适色谱柱能使红核妇洁洗液中有效成分中更好实现分离，我们考察非极性色谱柱HP-1、弱极性色谱柱DB-5、中等极性色谱柱DB-624、强极性色谱柱DB-WAX、改性强极性色谱柱HP-FFAP等不同极性和型号的色谱柱，进行大量的实验。由于山楂核干馏液包括酚类、醛类、酮类以及酯类等多种物质，成分复杂，极性差异较大，故分别选择非极性、弱极性、中等极性以及强极性色谱柱进行试验，结果以(5％苯基)甲基聚硅氧烷为固定液的弱极性色谱柱效果最理想。②、提取溶剂的考察愈创木酚与乙醇可以混溶，现行质量标准中，愈创木酚和糠醛的含量测定均以无水乙醇作为提取溶剂，分别以乙醇和无水乙醇作为溶剂进行考察。供试品溶液的制备：取本品(批号：171036)适量，混匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，分别加乙醇、无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各1μl，注入气相色谱仪，测定，计算含量。结果见表1。表1提取溶剂考察结果由测定结果可知，乙醇和无水乙醇基本无差异，但是乙醇更为常用，因此确定以乙醇作为提取溶剂。③、溶剂量的考察供试品溶液的制备：取本品(批号：171036)适量，混匀，精密量取1ml，分别置5ml、10ml、25ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各1μl，注入气相色谱仪，测定，计算含量。结果见表2。表2溶剂量考察结果由测定结果可知，不同溶剂量对测定结果影响较小，综合考虑溶剂量以及色谱响应值，确定料液比为1:10。④、供试品溶液制备方法的确定经试验，加入乙醇振摇后，红核妇洁洗液即变为澄清液体，故未对提取方法进行考察，综合提取溶剂和溶剂量的考察结果，供试品溶液的制备如下：取本品适量，混匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。⑤、指纹图谱的建立取收集的20批红核妇洁洗液样品，按照前文确定的供试品本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.红核妇洁洗液一测多评指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：/n⑴、供试品溶液的制备：取本品适量，混匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，即得；/n⑵、对照品标准液的制备：取愈创木酚对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含0.13～0.18mg/ml的溶液，即得；/n⑶、色谱条件与系统适用性试验：以石英毛细管柱为色谱柱；流速0.8～1.4ml/min；柱温为程序升温：初始温度55～65℃，以每分钟2～4℃的升温速率升温至85～95℃，保持2～5分钟，再以每分钟8～12℃的升温速率升温至110～130℃，保持6～10分钟，以每分钟4～6℃的升温速率升温至170～190℃，保持7～13分钟，再以每分钟30～50℃的升温速率升温至290～310℃，保持10～14分钟；进样口温度270～290℃；检测器温度290～310℃；分流进样，分流比8～12：1；/n⑷、色谱峰测定：将上述步骤⑴和⑵所制得的供试品和对照品溶液，注入气相色谱仪，按照上述步骤⑶的色谱条件，测定供试液溶液，记录6～48分钟的色谱图，即得，按中药色谱指纹图谱相似度评价系统，供试品指纹图谱与对照指纹图谱经相似度计算，相似度不得低于0.90。/n...

【技术特征摘要】
1.红核妇洁洗液一测多评指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：
⑴、供试品溶液的制备：取本品适量，混匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，即得；
⑵、对照品标准液的制备：取愈创木酚对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含0.13～0.18mg/ml的溶液，即得；
⑶、色谱条件与系统适用性试验：以石英毛细管柱为色谱柱；流速0.8～1.4ml/min；柱温为程序升温：初始温度55～65℃，以每分钟2～4℃的升温速率升温至85～95℃，保持2～5分钟，再以每分钟8～12℃的升温速率升温至110～130℃，保持6～10分钟，以每分钟4～6℃的升温速率升温至170～190℃，保持7～13分钟，再以每分钟30～50℃的升温速率升温至290～310℃，保持10～14分钟；进样口温度270～290℃；检测器温度290～310℃；分流进样，分流比8～12：1；
⑷、色谱峰测定：将上述步骤⑴和⑵所制得的供试品和对照品溶液，注入气相色谱仪，按照上述步骤⑶的色谱条件，测定供试液溶液，记录6～48分钟...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾国强，崔巧红，林林，林永强，麻明亮，林玉梅，李军，
申请(专利权)人：山东步长神州制药有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37