梅克尔多元癌细胞病毒的大和小T抗原、核酸构建体和由此制造的疫苗及其使用方法技术

包含一种或多种核苷酸序列的核酸分子和组合物，所述核苷酸序列编码共有梅克尔多元癌细胞病毒(MCV)T抗原。公开了免疫调节方法和诱导对MCV的免疫应答的方法。公开了治疗MCV感染的方法以及治疗或预防MCV相关的梅克尔细胞癌的方法。公开了修饰的共有MCV T抗原。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】梅克尔多元癌细胞病毒的大和小T抗原、核酸构建体和由此制造的疫苗及其使用方法相关申请的交叉引用本申请要求于2018年1月19日提交的美国临时申请序列号62/619,161的优先权，通过引用以其全文并入本文。
本专利技术涉及用于诱导免疫应答和治疗MCV感染个体和/或治疗或预防梅克尔细胞癌(MCC)的疫苗。本专利技术涉及共有MCV大T抗原(LTAg)和小t抗原(STAg)癌蛋白以及编码它们的核酸分子。
技术介绍
梅克尔多元癌细胞病毒(MerkelCellPolyomavirus，MCV)由于其与侵袭性人皮肤癌梅克尔细胞癌(MerkelCellCarcinoma，MCC)有关而最近受到关注。在美国，每年大约诊断出1,500例新发MCC病例，并且MCC受试者的死亡率仍保持在46％。与皮肤T细胞淋巴瘤和慢性粒细胞白血病相比，MCC杀死的患者更多。大多数(约75％)MCC包含克隆整合的病毒DNA，并表达病毒T抗原转录本和蛋白。目前，尚无针对MCC的疫苗正在进行临床试验。因此，本领域需要针对MCV和MCC的治疗性疫苗。本专利技术满足了这种未满足的需求。
技术实现思路
在一个实施例中，本专利技术涉及一种免疫原性组合物，其包含编码至少一种修饰的梅克尔多元癌细胞病毒(MCV)T抗原的核酸分子，其中，所述T抗原包含至少一种突变，所述突变破坏天然MCVT抗原的至少一种致癌特征。在一个实施例中，所述至少一种致癌特征是CR1结合、DnaJ结合、结合磷酸酶pp2A的结合、Rb结合、ATP酶活性、解旋酶活性、伴侣蛋白结合、hVam6p结合、Fbxw7结合、起点结合和转化中的至少一种。在一个实施例中，所述至少一种突变是氨基酸突变，所述氨基酸位于D44、W209、E216、L142、L91、K92、D93、Y94或M95中的至少一处。在一个实施例中，至少一种突变是D44N突变、W209A、E216K突变、L142A突变、L91A突变、K92A突变、D93A突变、Y94A突变或M95A突变中的至少一种。在一个实施例中，所述修饰的MCVT抗原包含D44N突变、W209A或E216K突变中的至少一种。在一个实施例中，所述修饰的MCVT包含D44N突变、W209A和E216K突变。在一个实施例中，至少一种MCVT抗原是大T抗原(LTAg)或小t抗原(STAg)。在一个实施例中，至少一种MCVT抗原是LTAg和STAg的组合。在一个实施例中，所述核酸分子编码肽，所述肽包含以下氨基酸序列：a)氨基酸序列，其与SEQIDNO:2、SEQIDNO:4或SEQIDNO:6中的至少一个的氨基酸序列的全长具有至少约90％同一性，b)免疫原性片段，其包含与至少60％的SEQIDNO:2、SEQIDNO:4或SEQIDNO:6中的至少一个的氨基酸序列有至少约90％同一性，c)SEQIDNO:2、SEQIDNO:4或SEQIDNO:6的氨基酸序列，或者d)免疫原性片段，其包含至少60％的SEQIDNO:2、SEQIDNO:4或SEQIDNO:6的氨基酸序列。在一个实施例中，所述核酸分子是DNA分子或RNA分子。在一个实施例中，所述核酸分子包含以下至少一种核苷酸序列：a)核苷酸序列，其与SEQIDNO:1、SEQIDNO:3或SEQIDNO:5中的至少一个的核苷酸序列的全长具有至少约90％同一性，b)核苷酸序列的免疫原性片段，其与至少60％的SEQIDNO:1、SEQIDNO:3或SEQIDNO:5中的至少一个的核苷酸序列具有至少约90％同一性，c)SEQIDNO:1、SEQIDNO:3或SEQIDNO:5的核苷酸序列，或者d)SEQIDNO:1、SEQIDNO:3或SEQIDNO:5的核苷酸序列的免疫原性片段。在一个实施例中，编码肽的核苷酸序列与至少一种调控序列可操作地连接。在一个实施例中，所述调控序列是起始密码子、IgE前导序列或终止密码子中的至少一个。在一个实施例中，所述核酸分子编码肽，所述肽包含以下至少一个氨基酸序列：a)氨基酸序列，其与SEQIDNO:2、SEQIDNO:4或SEQIDNO:6中的至少一个的氨基酸序列的全长具有至少约90％同一性，b)免疫原性片段，其包含与至少60％的SEQIDNO:2、SEQIDNO:4或SEQIDNO:6中的至少一个的氨基酸序列有至少约90％同一性，c)SEQIDNO:2、SEQIDNO:4或SEQIDNO:6的氨基酸序列，或者d)免疫原性片段，其包含至少60％的SEQIDNO:2、SEQIDNO:4或SEQIDNO:6的氨基酸序列，与SEQIDNO:7所示的氨基酸序列可操作地连接。在一个实施例中，所述核酸分子包含以下至少一种核苷酸序列：a)核苷酸序列，其与SEQIDNO:1、SEQIDNO:3或SEQIDNO:5中的至少一个的核苷酸序列的全长具有至少约90％同一性，b)核苷酸序列的免疫原性片段，其与至少60％的SEQIDNO:1、SEQIDNO:3或SEQIDNO:5中的至少一个的核苷酸序列具有至少约90％同一性，c)SEQIDNO:1、SEQIDNO:3或SEQIDNO:5的核苷酸序列，或者d)SEQIDNO:1、SEQIDNO:3或SEQIDNO:5的核苷酸序列的免疫原性片段，与SEQIDNO:7所示的氨基酸序列可操作地连接。在一个实施例中，所述核酸分子包含表达载体。在一个实施例中，所述核酸分子被掺入病毒颗粒。在一个实施例中，所述免疫原性组合物进一步包含药学上可接受的辅料。在一个实施例中，所述免疫原性组合物进一步包含佐剂。在一个实施例中，本专利技术涉及一种核酸分子，所述核酸分子编码包含以下至少一种氨基酸序列的肽：a)氨基酸序列，其与SEQIDNO:2、SEQIDNO:4或SEQIDNO:6中的至少一个的氨基酸序列的全长具有至少约90％同一性，b)免疫原性片段，其包含与至少60％的SEQIDNO:2、SEQIDNO:4或SEQIDNO:6中的至少一个的氨基酸序列有至少约90％同一性，c)SEQIDNO:2、SEQIDNO:4或SEQIDNO:6的氨基酸序列，或者d)免疫原性片段，其包含至少60％的SEQIDNO:2、SEQIDNO:4或SEQIDNO:6的氨基酸序列。在一个实施例中，所述核酸分子是DNA分子或RNA分子。在一个实施例中，所述核酸分子包含以下至少一种核苷酸序列：a)核苷酸序列，其与SEQIDNO:1、SEQIDNO:3或SEQIDNO:5中的至少一个的核苷酸序列的全长具有至少约90％同一性，b)核苷酸序列的免疫原性片段，其与至少60％的SEQIDNO:1、SEQIDNO:3或SEQIDNO:5中的至少一个的核苷酸序列具有至少约90％同一性，c)SEQIDNO:1、SEQIDNO:3或SEQIDNO:5的核苷酸序列，或者d)SEQIDNO:1、SEQIDNO:3或SEQIDNO:5的核苷酸序列的免疫原性片段。在一个实施例中，编码肽的核苷酸序列与至少一种调控序列可操作地连接。在一个实施例中，所述调控本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种免疫原性组合物，其包含编码至少一种修饰的梅克尔多元癌细胞病毒(MCV)T抗原的核酸分子，其中，所述T抗原包含至少一种突变，所述突变破坏天然MCV T抗原的至少一种致癌特征。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180119 US 62/619,1611.一种免疫原性组合物，其包含编码至少一种修饰的梅克尔多元癌细胞病毒(MCV)T抗原的核酸分子，其中，所述T抗原包含至少一种突变，所述突变破坏天然MCVT抗原的至少一种致癌特征。


2.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中，所述至少一种致癌特征选自由以下组成的组：CR1结合、DnaJ结合、结合磷酸酶pp2A的结合、Rb结合、ATP酶活性、解旋酶活性、伴侣蛋白结合、hVam6p结合、Fbxw7结合、起点结合和转化。


3.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中，所述至少一种突变是选自由D44、W209、E216、L142、L91、K92、D93、Y94和M95组成的组的氨基酸处的突变。


4.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中，至少一种突变选自由以下组成的组：D44N突变、W209A、E216K突变、L142A突变、L91A突变、K92A突变、D93A突变、Y94A突变和M95A突变。


5.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中，所述MCVT抗原选自由大T抗原(LTAg)、小t抗原(STAg)及其组合组成的组。


6.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中，所述核酸分子编码肽，所述肽包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：
a)氨基酸序列，其与选自由SEQIDNO:2、SEQIDNO:4和SEQIDNO:6组成的组的氨基酸序列的全长具有至少约90％同一性，
b)免疫原性片段，其包含与选自由SEQIDNO:2、SEQIDNO:4和SEQIDNO:6组成的组的氨基酸序列的至少60％的至少约90％同一性，
c)氨基酸序列，其选自由SEQIDNO:2、SEQIDNO:4和SEQIDNO:6组成的组，以及
d)免疫原性片段，其包含选自由SEQIDNO:2、SEQIDNO:4和SEQIDNO:6组成的组的氨基酸序列的至少60％。


7.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中，所述核酸分子选自由DNA分子和RNA分子组成的组。


8.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中，所述核酸分子包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：
a)核苷酸序列，其与选自由SEQIDNO:1、SEQIDNO:3和SEQIDNO:5组成的组的核苷酸序列的全长具有至少约90％同一性，
b)核苷酸序列的免疫原性片段，其与选自由SEQIDNO:1、SEQIDNO:3和SEQIDNO:5组成的组的核苷酸序列的至少60％具有至少约90％同一性，
c)核苷酸序列，其选自由SEQIDNO:1、SEQIDNO:3和SEQIDNO:5组成的组，以及
d)核苷酸序列的免疫原性片段，其选自由SEQIDNO:1、SEQIDNO:3和SEQIDNO:5组成的组。


9.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中，编码肽的核苷酸序列与至少一种调控序列可操作地连接，所述调控序列选自由起始密码子、IgE前导序列和终止密码子组成的组。


10.根据权利要求9所述的免疫原性组合物，其中，所述核酸分子编码肽，所述肽包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：
a)氨基酸序列，其与选自由SEQIDNO:2、SEQIDNO:4和SEQIDNO:6组成的组的氨基酸序列的全长具有至少约90％同一性，
b)免疫原性片段，其包含与选自由SEQIDNO:2、SEQIDNO:4和SEQIDNO:6组成的组的氨基酸序列的至少60％的至少约90％同一性，
c)氨基酸序列，其选自由SEQIDNO:2、SEQIDNO:4和SEQIDNO:6组成的组，以及
d)免疫原性片段，其包含选自由SEQIDNO:2、SEQIDNO:4和SEQIDNO:6组成的组的氨基酸序列的至少60％，
与SEQIDNO:7所示的氨基酸序列可操作地连接。


11.根据权利要求10所述的免疫原性组合物，其中，所述核酸分子包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：
a)核苷酸序列，其与选自由SEQIDNO:1、SEQIDNO:3和SEQIDNO:5组成的组的核苷酸序列的全长具有至少约90％同一性，
b)核苷酸序列的免疫原性片段，其与选自由SEQIDNO:1、SEQIDNO:3和SEQIDNO:5组成的组的核苷酸序列的至少60％具有至少约90％同一性，
c)核苷酸序列，其选自由SEQIDNO:1、SEQIDNO:3和SEQIDNO:5组成的组，以及
d)核苷酸序列的免疫原性片段，其选自由SEQIDNO:1、SEQIDNO:3和SEQIDNO:5组成的组，
与编码SEQIDNO:7的核苷酸序列可操作地连接。


12.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中，所述核酸分子包含表达载体。


13.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中，所述核酸分子被掺入病毒颗粒。


14.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其进一步包含药学上可接受的辅料。


15.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其进一步包含佐剂。


16.一种核酸分子，所述核酸分子编码肽，所述肽包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：
a)氨基酸序列，其与选自由SEQIDNO:2、SEQIDNO:4和SEQIDNO:6组成的组的氨基酸序列的全长具有至少约90％同一性，<...

【专利技术属性】
技术研发人员：大卫·B·韦纳，伊丽莎白·迪佩雷，
申请(专利权)人：威斯塔解剖学和生物学研究所，
类型：发明
国别省市：美国;US