一种新的多肽--人反转录相关因子22和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人反转录相关因子２２，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如肌营养不良症，恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人反转录相关因子２２的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽--人反转录相关因子22，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。灵长类动物和啮齿动物几基因组中包含一个家族，有高度重复的、长的并且交替出现的L1家族，这个家族的序列特征是在3’-末端有一段富含A的序列，5’-末端是平末端结构，有一个较长的开放阅读框(ORFs)存在。L1家族成员存在于不同类型的细胞中，其中包括多功能胚胎细胞，这就证明了L1家族起源于同一种序列编码蛋白，通过一个RNA介导的过程散布到基因组中。L1家族参与反转录过程，反转录起始于3’-末端，终止于互补DNA插入物引起的重叠位点，它能够通过转录转换成cDNA，然后经过类似于假基因加工的过程插入到染色体中。在人类的基因组中，L1因子存在于染色体1q的LRE2上。在结构上，L1因子没有很长的末端重复序列，其3’-末端的多聚A尾巴比较特殊，而且它并不是在每个L1因子上都固定不变。L1因子的增殖过程包括转录、反转录和再整合到基因组上的一个新的位点。L1因子的5’末端大多是平端结构，区别于一般的粘性末端结构，但是并不影响其转录整合过程。5’末端的非翻译区域(UTR)含有一个内在的促进子，对于整个逆转录过程的速度进行调节和控制。LRE2位点含有两个完整的开放阅读框(ORF1框和ORF2框)，其中的ORF1框编码一个大约40Kd的胚胎癌细胞蛋白，ORF2框与逆转录酶和其它逆转录酶病毒蛋白有序列上的相似性，能够介导逆转录过程的进行。采用实验手段去除L1因子最前面的32Bp，得到的产物只能显示出正常转录效率的20％。L1家族序列含有一个开放阅读框，与某些病毒的依赖RNA的DNA聚合酶有相似之处，更进一步证明了L1家族或者它的祖先与反转录酶有关，它编码的蛋白实际上是一种类反转录酶。本专利技术的多肽与上述的L1因子有87％的相同性，93％的相似性，并且包含L1家族特征性的保守序列，因此认为此蛋白是一种新的L1因子，具有与反转录有关的生物学功能，并命名为人反转录相关因子22。由于如上所述人反转录相关因子22蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人反转录相关因子22蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人反转录相关因子22蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽--人反转录相关因子22以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人反转录相关因子22的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人反转录相关因子22的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人反转录相关因子22的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽--人反转录相关因子22的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽--人反转录相关因子22的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人反转录相关因子22异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少88％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中1590-2183位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-3079位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人反转录相关因子22蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人反转录相关因子22蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人反转录相关因子22表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与人反转录相关因子22结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合人反转录相关因子22的分子。“拮抗剂”或“抑制物”指当与人反转录相关因子22结合时，一种可封闭或调节人反转录相关因子22的生物学活性或免疫学活性的分子。拮抗剂和抑制物可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合人反转录相关因子22的分子。“调节”是指人反转录相关因子22的功能发生改变，包括蛋白质活性的升高或降低、结合特性的改变及人反转录相关因子22的任何其它生物学性质、功能或免疫性质的改变。＂基本上纯＂是指基本上不含天然与其相本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人反转录相关因子２２，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：复旦大学，上海博道基因技术有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]