发光性化合物及使用它们的标识试剂制造技术

技术编号:2592075 阅读:138 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一般式(Ⅰ)表示的化合物:R-Y-(-X-Phe-COCH↓[2]COC↓[n]F↓[2n+1])↓[m](Ⅰ)(式中R是H、烷基、苯基或能够结合蛋白质、肽、氨基酸、核酸或碱的基团,Y是CH↓[2]、碳化或杂环,X是O、S、NH、CH↓[2]、OCH↓[2]、CONH或NHCO,Phe是亚苯基,n是1~5的整数,m是1、2或3);含有上述化合物和稀土离子的发光络合物;含有上述的化合物或发光络合物的标识试剂;及使用上述标识试剂的蛋白质、肽、氨基酸、核酸或碱的标识方法。(*该技术在2022年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及适于核酸检测法、免疫测定法和化学发光分析法中使用的时间分解荧光测定法、延迟磷光测定法或能量转移荧光检测法的标识试剂的化合物,特别是涉及在配位金属离子形成络合物时,能够产生荧光、延迟荧光或磷光的化合物。
技术介绍
免疫测定法或核酸检测法根据包括可见的及放射活性测量的许多方法进行其测定,荧光体或荧光色素标识物的荧光强度测定因为其简单被广泛采用。该方法的实用性在于处于和激发光波长不同的波长区域的荧光或发光产生时,能够准确地将其检测出来,但是由于荧光或发光会在短时间内消失,因此存在的问题是存在激发光的发生和荧光或发光的测定几乎被同时进行,由激发光产生的噪声被测定,背景高。荧光或发光波长的峰和激发光波长峰比较在长波长区域的多,使用波长选择滤波器从激发光中分离出荧光或发光对其进行测定。激发光波长和发光或荧光波长的波长差一般称为斯托克斯频移,如果荧光测定中斯托克斯频移小,通过波长差准确地分离激发光和荧光或发光是困难的。对于若丹明或荧光素等的荧光色素,其荧光的波长分布区域广,得到宽的荧光波形。在假设使用几个荧光体或荧光色素同时测定几个物质的场合,由于荧光波长区域叠加难以对各物质进行测定,为了得到各物质的量,必须适用换算式进行算法解析。作为激发光不对发光产生干涉的方法,有时使用包括电化学发光法,化学发光法的化学发光法。其中,由于激发光没有照射到标识体或标识色素,因而可以仅测定发光。标识异鲁米诺或丙烯酸(ジウムウムエステル)测定对象物质的方法可以构筑高灵敏度测量体系,该高灵敏度测量体系是利用标识物质是酶并采用在基质中发生发光反应的过氧化物酶和鲁米诺的反应,或者利用金刚烷基1,2-二氧六环芳基磷酸酯(AMPPD)和碱性磷酸酯酶的反应。近年来,利用铕或钐等的稀土元素和它们的配位体、络合物的荧光或磷光消光时间长,开发了优越的时间分解荧光或磷光测定法。由于荧光或磷光的消光时间长、斯托克斯频移大以及荧光或磷光峰波形窄,因此不含有激发光产生的噪声,可以检测荧光或磷光的信号,提供高灵敏度的分析方法。通过氙闪光灯或激光等用脉冲照射激发光,激发光的装置或其它物质的荧光经过消失的时间以后,是所需的荧光或磷光的测定方法。由于配位体改良的进展,报道了化合物4,7-二(氯磺酰基苯基)-1,10-菲咯啉-2,9-二羧酸(BCPDA)或4,4’-二(1”,1”,1”,2”,2”,3”,3”-七氟-4”,6”-己烷二酮-6-基)氯磺酰基-邻-三联苯(BHHCT)。BHHCT例如公开于特开平9-241233公报。虽然这些是优良的螯合物,但是仍然不能在免疫测定或核酸检测法中给出足够的最小检测灵敏度。
技术实现思路
本专利技术的目的是围绕在核酸检测法、免疫测定法和化学发光分析法中使用的时间分解荧光测定法、延迟磷光测定法或能量转移荧光检测法的标识试剂,提供可以高灵敏度地测定样品中的目标物质的有用的标识试剂,以及用于该标识试剂的化合物。本专利技术包括以下的专利技术(1)一般式(I)表示的化合物R-Y-(-X-Phe-COCH2COCnF2n+1)m(I)(式中R是氢、烷基、苯基或能够结合蛋白质、肽、氨基酸、核酸或碱的基团;Y是CH2、碳环或杂环;X是O、S、NH、CH2、OCH2、CONH或NHCO;Phe是亚苯基;n是1~5的整数;m是1,2或3)(2)一般式(1)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(3)一般式(2)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(4)一般式(3)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(5)一般式(4)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(6)一般式(5)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(7)一般式(6)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(8)一般式(7)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(9)一般式(8)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(10)一般式(9)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(11)一般式(10)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(12)一般式(11)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(13)一般式(12)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(14)一般式(13)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(15)一般式(14)表示的上述(1)中记载的化合物 (式中*是CnF2n+1(这里,n是1~5的整数);R和上述(1)的定义相同)(16)上述(1)~(15)任何一项记载的化合物,其中,R是能够结合蛋白质、肽、氨基酸、核酸或碱的官能团结合到可以在链原子中含有选自氧、氮和硫中的至少一个杂原子的碳链构成的间隔基团末端形成的基团。(17)上述(1)~(16)任何一项记载的化合物,其中,R具有下式表示的至少一个官能团-N=C=S、-N=C=O、 -N2X、-N3、 -SO3CF3、-NH2、 -SO2X、-SO3H、-SH、-X、-CX3、 (但是,X选自卤化物原子、-OSO3CH3、-OSO2F、-OSO2CF3、-SO2C4F9、 RA选自烷基、链烯基、芳基、芳烷基;RB选自亚烷基、亚芳基、亚芳烷基;p是0~5;q是2~10;n是1~20)(18)含有上述(1)~(17)中任何一项记载的化合物和稀土离子的荧光性络合物。(19)含有上述(1)~(17)中任何一项记载的化合物或上述(18)中记载的荧光性络合物的标识试剂。(20)用于免疫测定或核酸检测的上述(19)中记载的标识试剂。(21)使用上述(19)或(20)中记载的标识试剂的蛋白质、肽、氨基酸、核酸或碱的标识方法。在上述式(I)中R是氢、烷基、苯基或能够结合蛋白质、肽、氨基酸、核酸或碱的基团。这里对于“可以结合蛋白质、肽、氨基酸、核酸或碱的基团”,只要是可以结合蛋白质、肽、氨基酸、核酸或碱中存在的氨基、羧基、巯基、羟基中的任何一个的基团,没有特别的限制,例如可以列举出具有用下式表示的至少一个官能团的基团 -N=C=S、-N=C=O、 -N2X、-N3、 -SO3CF3、-NH2、 -SO2X、-SO3H、-SH、-X、-CX3、(但是,X选自卤化物原子、-OSO3CH3本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种一般式(Ⅰ)表示的化合物:R-Y-(-X-Phe-COCH↓[2]COC↓[n]F↓[2n+1])↓[m](Ⅰ)(式中R是氢、烷基、苯基或能够结合蛋白质、肽、氨基酸、核酸或碱的基团;Y是CH↓[2]、碳环或杂环;X是 O、S、NH、CH↓[2]、OCH↓[2]、CONH或NHCO;Phe是亚苯基;n是1~5的整数;m是1,2或3)。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:斋藤充弘埃尔诺普里施
申请(专利权)人:株式会社日立高新技术
类型:发明
国别省市:JP[日本]

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