【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物恐怖的检测，特别涉及病原的检测，更具体涉及一种噬菌体免疫PCR检测病原的方法。
技术介绍
致病性病原微生物(包括致病菌、病毒)引发的各种传染性疾病大范围的流行传播，将严重危害中国的国家安全和人口健康。发展灵敏、准确的病原分析方法和检测技术对于相关疾病的快速诊断和及时治疗、生物恐怖和突发性公共卫生事件的有效防范和快速处置具有重要意义。常规病原微生物的检测方法包括微生物分离培养鉴定、免疫学方法和基于病原核酸的分子检测方法等。经典的微生物分离鉴定麻烦费时，难以应用于致病微生物的现场、快速检测；免疫学方法因为基于抗体对病原的特异性识别作用而使该方法具有较好的特异性，但尚需在灵敏度和实用型等方面进行优化、改善；基于病原核酸的检测方法需要复杂的核酸抽提过程，PCR过程的信号扩增作用赋予该方法较高的检测灵敏度，但容易出现假阳性。本专利技术提出一种新的病原检测策略，称为噬菌体介导的免疫PCR。免疫PCR(Immuno-PCR，IPCR)最早由Sano等提出，是一种非常有发展潜力的超灵敏免疫检测方法。其基本原理是在检测单克隆抗体上共价交联上DNA，使后者可以作...
【技术保护点】
一种噬菌体免疫ＰＣＲ检测病原的方法，它包括下列步骤：Ａ、特异性识别病原的重组噬菌体制备：从噬菌体抗体库中筛选特异识别病原的重组噬菌体／展示有识别病原抗原的单链抗体，或是从分泌识别病原的单克隆抗体的杂交瘤细胞中扩增抗体基因构建 重组噬菌体，挑经鉴定阳性的单克隆培养过夜，然后二次活化至对数生长期，加入辅助噬菌体拯救，然后离心收集菌体，重悬于选择培养基中培养过夜，次日菌液离心，上清即为所需的噬菌体；Ｂ、特异性噬菌体的捕获，其步骤是：１）特异识别病原的单 克隆抗体包被于酶标板；２）洗涤；３）封阻；４）洗涤；５）每孔加入样品...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张先恩，郭永超，周亚凤，张治平，乔岩梅，
申请(专利权)人：中国科学院武汉病毒研究所，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]
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