本发明专利技术涉及一种新的诊断人肺癌的蛋白质芯片，以及由此蛋白质芯片衍生的诊断试剂盒。该蛋白质芯片包含了１２种特定人蛋白质的蛋白斑点，使用该蛋白质芯片可以检测被检人血液样品中这１２种蛋白质各自相应抗体的含量，联合分析这１２个蛋白质的相应抗体的检测结果，可以判断被检人是否为肺癌患者。本发明专利技术进一步提供了该蛋白质芯片在健康人群或高危人群中筛查肺癌的应用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种用于诊断肺癌的蛋白质芯片，以及由此蛋白质芯片衍生的诊断试剂盒。本专利技术进一步提供了蛋白质芯片以及由此蛋白质芯片衍生的诊断试剂盒在肺癌诊断、健康人群或高危人群肺癌筛查中的应用。确切地说是本专利技术涉及一种可用于血清学检测诊断人肺癌的蛋白质芯片，该方法通过检测12种抗原在被检人血液样品中的各自的相应抗体的含量，并联合分析这12种抗原相应抗体检测的结果，来判定被检人是否患有肺癌。本专利技术还涉及由此蛋白质芯片衍生的诊断试剂盒，这些诊断试剂盒均采用或包含了此蛋白质芯片。另外，本专利技术提供了此蛋白质芯片及衍生的诊断试剂盒在肺癌诊断、健康人群或高危人群肺癌筛查中的应用。
技术介绍
人肺癌是人类常见肿瘤之一，发病率高、死亡率高，目前肺癌的死亡率仍然在85％以上，严重威胁着人类的生命健康。肺癌死亡率高的最重要的原因是肺癌的诊断率低，早期肺癌病人无体征，因而到医院就诊的病人绝大多数是中晚期病人。提高早期肺癌、肺癌的诊断率，将亚临床肺癌或隐匿性肺癌从人群中筛查出来，对于提高肺癌的治愈率及降低死亡率具有重大的意义。目前肺癌的诊断主要分为2类侵入性诊断和非侵入性诊断。侵入性诊断包括穿刺活检、手术探查等创伤性手段；非侵入性诊断包括各种影像学诊断手段(如X光胸片、CT、核磁共振、PET等)、细胞学检查，以及各种体液中某些肺癌或肿瘤标志物的检测。肺癌的侵入性诊断痛苦大，病人不愿意接受，一般只用于临床的鉴别诊断和确诊。肺癌最常用的诊断手段还是非侵入性诊断，在目前尤其是指影像学诊断和细胞学诊断。40年前胸部X光片就已作为早期肺癌的诊断和筛查手段之一，尽管这种技术费时，费用也高于细胞学检查，但确实能发现一些痰检阴性的早期肺癌。我国云锡肺癌高发现场1992-1997年6年对10481高危人群普查6年的结果表明，普查痰检阳性率为31.74％，X光胸片的阳性检出率为63.64％，优于痰细胞学，但其阳性预测值(33.05％)却低于痰细胞学的阳性预测值(62.01％)。此外X光片通常只能检出大于1.5cm病灶的肺癌，而对更早期的肺癌、隐匿性、可疑肺癌及癌前病变均不能检出。自70年代英国科学家Housfield专利技术CT用于肺癌的诊断以来，相继又发展了多种先进的影像设备和技术，如螺旋CT、高分辨CT、肺血管和支气管动脉DSA造影，以及近几年发展起来的PET。这些先进的影像设备和技术都有各自的优势和不足，以及不同的用途。对早期肺癌的检出率也有所提高。近年来美国、日本一些发达国家将螺旋CT技术用于人群早期肺癌的筛查。1993年美国的早期肺癌普查方案对1000例自愿者高危人群采用低剂量螺旋CT筛查，发现233例有1-6个非钙化结节，其中27例确诊肺癌，早期肺癌23例(85％)，而同期X光片漏诊率为83％。日本1998年报道了采用螺旋CT普查人群早期肺癌，并与传统的痰细胞学和X光片技术进行了比较。结果在螺旋CT筛查的9452人中，肺癌的检出率为0.37％，而在26338人痰检和X光片检测中，肺癌的检出率仅为0.16％，前者是后者的2.3倍。同时发现低剂量螺旋CT对周围型早期肺癌的检出明显好于中央型。近几年发展起来的另一种新技术PET对肺癌诊断的敏感性和准确性又有进一步的提高。美国、日本、德国、加拿大等各国报道的结果显示，PET在分辨恶性与良性非钙化结节的敏感性、特异性均高于螺旋CT，可达85％和90％。但是，PET不能检出小于1.5cm的肺癌病灶，在早期肺癌的诊断上无显著优势，且设备价格更昂贵。螺旋CT在我国大中城市的医院均有，但其检测费昂贵(800-1000元/人份)，在现阶段我国的国情下不可能作为筛查人群的技术。综上所述，除X光胸片以外的所有影像学设备和技术，在我国目前的国情下均不可能用于人群早期肺癌的筛查和诊断，但在确诊早期肺癌中有一定的意义。本研究将利用低剂量螺旋CT技术对高危人群筛查出来的阳性病例的边缘型早期肺癌确诊。支气管纤维镜检在肺癌诊断中的应用，主要是用于痰检和X光胸片发现异常或CT发现非钙化结节的病例，通过支纤镜检确定病变，并取活检组织或洗液，再进一步进行病理或细胞学确诊。通常对于有经验的大夫，支纤镜检可发现约30-40％的早期癌，难以检出癌前病变和原位癌。近年来Xillix公司研制了荧光支气管镜，利用自发荧光技术，在442nm兰色氦镉激光照射下正常组织发出绿色自身荧光，癌变组织和不典型增生则发出棕色或棕红色光，有助于确定活检部位，发现早期肺癌，并有助于判断手术范围，同时还能检出癌前病变。美国、加拿大报道的结果显示，其原位癌和癌前病变检出率是普通白光支纤镜的几倍。但这一设备价格昂贵，对操作人员专业水平要求很高，检测费也贵，是痛苦有创性检测技术，对中心型早期肺癌和癌前病变，检出率较高，对周围型肺癌检出率低。因此这一技术和设备也不可能作为筛查人群的技术方法。早在30年代，痰细胞学检测技术在国内外已用于肺癌的诊断，由于检测方法的简便、经济，后来也作为人群筛查早期肺癌的技术方法，但其阳性检出率低。中晚期病人的检出率为60-80％，而早期肺癌的检出率仅有10-20％。美国NCI的肺癌早期发现实验中，不足10％的肺癌是由细胞学单独发现。云锡肺癌高发现场不断改进痰检方法，其在1992-1997年6年间普查中，痰检阳性率平均为31.74％，可见漏诊率仍很高。其原因(1)该技术对痰中能排出癌细胞的中心型肺癌检出率较高，而对周围型肺癌诊断用处不大。在云锡普查中，339例痰检阳性的病例中，216例为中心型(占63％)。原因(2)普通痰细胞涂片质量差，镜检难度大。原因(3)操作者判断的误差大，其次痰样本获取的质量差异大。近年来国外发展一种新的痰细胞学检测技术(ThinPrep即液基超薄细胞电脑扫描技术)，目前已发展出第三代自动化设备AutocytePrep and AutoPap系统，该技术的优点是能将粘稠的痰处理稀化，能制备出质量很高的超薄细胞片，从而提高痰检的检出率，同时能自动收集痰中几乎所有的脱落细胞进行镜检或各种分子标志物的自动检测，数据分析处理，对早期肺癌诊断的敏感性可提高到40-60％。另一个重要的优点是能提高癌前病变的检出率，但该技术需价格昂贵的进口设备，每份标本处理的试剂费为100元人民币，操作人员需较高的专业水平。国外主要在大医院里应用，用于人群早期肺癌筛查的报道甚少。国内目前仅有几个大城市的极少医院有此设备，开展了这项技术。因此，在我国现有国情下不可能用于大人群筛检。此外该技术对于周围型和边缘型早期肺癌检出率较低。随着分子生物学的迅速发展，在研究肺癌病因的同时，也在分子水平上对肺癌发生发展有了更多的了解。已有的研究表明在肺癌发生发展的多阶段过程中，细胞形态的恶性生物学改变伴随着其分子水平的多种基因参与和改变，它们包括癌基因的扩增、过度表达、突变和抑癌基因的缺失、突变、易位、重排等等多种基因的改变。到目前为止，已报道的与肺癌发生相关的基因异常改变约有十余种。最常见的癌基因改变有ras家族、myc家族、HER2、Bcl-2的过度表达等等。同时发现P53、Rb、CDKN2、DuTT1、FHIT、BAP-1等抑癌基因的突变、缺失、转导、易位及甲基化等改变。细胞遗传学和分子生物学技术的分析，还发现多个染色体上某些基因的改变与肺癌的本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种诊断人肺癌的蛋白质芯片，其特征在于由以下氨基酸序列组成： （１）具有序列号１所示氨基酸序列的ＭＡＧＥＡ１抗原片段； （２）具有序列号２所示氨基酸序列的ＭＡＴＫ抗原片段； （３）具有序列号３所示氨基酸序列的ＭＡＧＥＡ３抗原片段； （４）具有序列号４所示氨基酸序列的ＣＣＴ８抗原片段； （５）具有序列号５所示氨基酸序列的ＴＰ５３抗原片段； （６）具有序列号６所示氨基酸序列的ＺＮＦ２５８抗原片段； （７）具有序列号７所示氨基酸序列的ＰＲＣ１抗原片段； （８）具有序列号８所示氨基酸序列的Ｃ１４ｏｒｆ１０４抗原片段； （９）具有序列号９所示氨基酸序列的ＥＥＦ１Ａ１抗原片段； （１０）具有序列号１０所示氨基酸序列的ＺＩＣ２抗原片段； （１１）具有序列号１１所示氨基酸序列的ＳＯＸ２抗原片段；和 （１２）具有序列号１２所示氨基酸序列的Ｓ１００Ａ１０抗原片段。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：杨治华，冉宇靓，李国惠，李江伟，
申请(专利权)人：中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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