治疗肺癌的组合物和方法技术

本发明专利技术涉及一种抑制癌细胞生长的方法，其是通过将所述细胞与ＰＫＰ３，ＣＤＣＡ１，ＣＤＣＡ８，ＤＬＸ５，ＵＲＬＣ１１或ＮＰＴＸ１　　ｓｉＲＮＡ的组合物相接触。本发明专利技术还包括治疗癌症的方法。本发明专利技术还涉及产品，包括核酸序列和载体以及包含它们的组合物，可用于提供的方法中。本发明专利技术还提供抑制肿瘤细胞，例如肺癌细胞，特别是ＮＳＣＬＣ的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及生物科学领域，更具体地涉及癌症研究领域。特别地，本专利技术涉及包含能够抑制PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1表达的核酸的组合物。在一些实施方案中，所述核酸是对应于来自这些基因的亚序列的小干扰RNA(siRNA)。
技术介绍
肺癌是世界上最常见的癌症。非小细胞肺癌(NSCLC)到目前为止是最常见的形式，几乎占肺癌的80％(American Cancer Society.Cancer Facts andfigures 2001(Am.Chem.Soc.Atlanta).2001)。尽管近来在多种形式疗法上有所进步，整体上10年存活率仍低为10％，因为大多数NSCLCs都是到晚期(advanced stage)才诊断出来(Fry，W.A.，Phillips，J.L.，和Menck，H.R.Ten-year survey of lung cancer treatment and survival in hospitals in the UnitedStatesa national cancer data base report，Cancer.861867-76，1999.)。尽管基于铂的化疗方案被认为是治疗NSCLC的参照标准，但那些药物只能将NSCLC晚期患者的存活延长大约六周(Chemotherapy in non-small cell lung cancerameta-analysis using updated data on individual patients from 52randomisedclinical trials.Non-small Cell Lung Cancer Collaborative Group，Bmj.311899-909，1995.)。正在研究这种疾病的许多靶向疗法，包括酪氨酸激酶抑制剂，但到目前为止只在有限数目的患者中获得预期结果并且一些受体发生严重的副反应(Kris M，N.R.，Herbst RS A phase II trial of ZDl 839(′Iressa′)inadvanced non-small cell lung cancer(NSCLC)patients who had failed platinum-and docetaxel-based regimens(IDEAL 2)，Proc Am Soc Clin Oncol.21292a(A1166)，2002.)。所以发展高效化疗药物和预防策略越来越迫切。
技术实现思路
本专利技术是基于令人吃惊的发现，即抑制PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1的表达对于抑制各种癌细胞的细胞生长有效，包括那些涉及NSCLC的细胞。本申请中描述的专利技术是部分基于这一发现。本专利技术提供抑制细胞生长的方法。提供的方法是那些包括将细胞与组合物接触的方法等，所述组合物包含抑制PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1表达的小干扰RNA(siRNA)。本专利技术还提供抑制受试者中肿瘤细胞生长的方法。这些方法包括向受试者施用组合物，所述组合物包含特异性地与来自PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1的序列杂交的小干扰RNA(siRNA)。本专利技术的另一方面提供在生物学样品的细胞中抑制PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1基因表达的方法。所述基因的表达可以通过向细胞中导入足以抑制PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1基因表达的量的双链核糖核酸(RNA)而得以抑制。本专利技术的另一方面涉及包括核酸序列和载体的产品以及涉及包含它们的组合物，可用于，例如，提供的方法中。提供的产品是当导入到表达所述基因的细胞中时具有抑制PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1基因表达特性的siRNA分子等。这些分子是包含有义链和反义链的分子等，其中有义链包含对应于PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1靶序列的核苷酸序列，并且其中反义链包含与所述有义链互补的核苷酸序列。所述分子的有义链和反义链彼此杂交以形成双链分子。如本文所用的，术语“生物”指由至少一个细胞组成的任何活的实体。活的生物可以简单如，例如，单一真核细胞或复杂如哺乳动物，包括人。如本文所用的，术语“生物学样品”指完整的生物或其组织、细胞或组成部分(例如体液，包括但不限于血液，粘液，淋巴液，滑液，脑脊液，唾液，羊水，羊膜脐带血(cord blood)，尿液，阴道液和精液)的亚组。“生物学样品”另外指由完整生物或它的细胞、组织或组成部分的亚组制备的匀浆，裂解物，提取物，细胞培养物或组织培养物，或其级分，片段或部分。最后，“生物学样品”指其中已经增殖了生物的培养基，如营养肉汤或凝胶，其包含细胞组分，如蛋白质或核酸分子。本专利技术涉及抑制细胞生长的方法。通过将细胞与PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1的小干扰RNA(siRNA)的组合物相接触来抑制细胞生长。将细胞进一步与转染增强剂相接触。在体外，体内或离体提供细胞。受试者是哺乳动物，例如，人，非人灵长类，小鼠，大鼠，狗，猫，马，或牛。所述细胞是肺细胞。或者，所述细胞是肿瘤细胞(即，癌细胞)如非小细胞癌细胞。例如，所述细胞是非小细胞型肺癌细胞。术语“抑制细胞生长”意为经处理的细胞以较低的速率增殖或具有比未经处理的细胞降低的生活力。通过本领域已知的增殖测定法来测定细胞生长。术语″siRNA″意为一种双链RNA分子，其阻碍靶mRNA的翻译。使用将siRNA导入细胞中的标准技术，包括那些其中DNA是RNA转录模板的技术。所述siRNA包括有义PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1核酸序列，反义PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1核酸序列或二者都包括。所述siRNA可以包含两个互补分子或可以这样构建，从而使得单一转录本具有来自靶基因，例如，发夹结构的有义和互补反义序列，其在一些实施方案中，导致微RNA(miRNA)的产生。使用所述方法改变细胞中的基因表达，在所述细胞中，例如，作为细胞恶性转化的结果，PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1的表达上调。SiRNA结合靶细胞中的PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1转录本导致细胞产生PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1减少。寡核苷酸的长度至少大约10个核苷酸并且可以与天然存在的PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1转录本一样长。优选地，所述寡核苷酸为大约19到大约25个核苷酸长。最优选地，所述寡核苷酸小于大约100，大约75，大约50，或大约25个核苷酸和。在哺乳动物细胞中抑制PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1表达的PKP3，CDCA1，CDCA8，DLX5，URLC11或NPTX1的siRNA寡核苷酸的例子包括含有靶序列，例如，SEQ I本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗或预防受试者中肺癌的方法，包括向所述受试者施用包含抑制ＰＫＰ３，ＣＤＣＡ１，ＣＤＣＡ８，ＤＬＸ５，ＵＲＬＣ１１或ＮＰＴＸ１表达的小干扰ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）的组合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：中村佑辅，醍醐弥太郎，中鹤修一，
申请(专利权)人：肿瘤疗法科学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：JP[日本]