镰状β珠蛋白抗体制造技术

本发明专利技术总体上提供了改进的抗镰状珠蛋白抗体及其片段。在特定实施例中，所述抗体或其抗原结合片段识别βs、Glu6Val突变。在各个实施例中，本发明专利技术提供了一种缀合物，其包括抗βs珠蛋白抗体或其抗原结合片段以及可检测标记。在特定实施例中，提供了一种杂交瘤，其包括本文所设想的抗βs珠蛋白抗体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】镰状β珠蛋白抗体相关申请的交叉引用本申请根据35U.S.C.§119(e)要求于2017年12月15日提交的美国临时申请第62/599,260号的权益，所述美国临时申请中的每一个以全文引用的方式并入本文中。关于序列表的声明与本申请相关的序列表以文本格式提供以代替纸质副本，并且在此通过引用并入本说明书中。含有序列表的文本文件的名称为BLBD_093_01WO_ST25.txt。所述文本文件为9KB，于2018年12月13日创建并且在提交本说明书的同时通过EFS-Web以电子方式提交。
本专利技术涉及镰状β-珠蛋白(βS)抗体或其抗原结合片段。
技术介绍
血红蛋白病是全世界最普遍的遗传性疾病并且由异常β-珠蛋白合成或结构引起。血红蛋白病是一组不同的遗传性血液病症，所述遗传性血液病症涉及由血红蛋白的结构和/或合成的改变而导致的异常血红蛋白分子的存在。通常，血红蛋白由四个蛋白亚基组成：两个β-珠蛋白亚基和两个α-珠蛋白亚基。这些蛋白亚基中的每一个都与被称为血红素的含铁分子连接(结合)；每个血红素在其中心都含有可以与一个氧分子结合的铁分子。红细胞内的血红蛋白与肺中的氧分子结合。这些细胞然后行进穿过血流，并且将氧气递送到整个身体的组织。最常见的血红蛋白病包含镰状细胞疾病、β-地中海贫血和α-地中海贫血。镰状细胞疾病包含任何由红细胞镰状化引起的症状性贫血病状。镰状细胞贫血βS/βS，一种镰状细胞疾病(SCD)的常见形式，由血红蛋白S(HbS)引起。HbS是两个βS珠蛋白亚基和两个α-珠蛋白亚基的四聚体。通过在β-珠蛋白中的位置6处用缬氨酸(V)替代谷氨酸(E)产生HbS，所述替代标记为Glu6Val或E6V。E6V位置是指最终蛋白产物中的氨基酸位置，因为第一氨基酸在转译之后被去除。用缬氨酸替代谷氨酸使异常HbS亚基粘在一起并且形成将红细胞弯曲成镰刀(新月)形状的长、刚性的分子。镰状细胞过早死亡，这可能导致红细胞不足(贫血)。另外，镰状细胞是刚性的并且可能阻塞小血管，从而引起严重的疼痛和器官损伤。
技术实现思路
本专利技术总体上提供了改进的抗镰状珠蛋白抗体及其片段。可以使用所述抗体或其抗原结合片段检测βS。通过在β-珠蛋白中的位置6处用缬氨酸(V)替代谷氨酸(E)产生βS，所述替代标记为Glu6Val或E6V。E6V位置是指最终蛋白产物中的氨基酸位置，因为第一氨基酸在转译之后被去除。在各个实施例中，抗βS珠蛋白抗体或其抗原结合片段包括包含SEQIDNO:1-3中所示的CDRL1-CDRL3序列的可变轻链序列和包含SEQIDNO:4-6中所示的CDRH1-CDRH3序列的可变重链序列。在特定实施例中，所述抗体或其抗原结合片段识别βS、E6V突变。在某些实施例中，结合人βS珠蛋白多肽的所述抗βS珠蛋白抗体或抗原结合片段是scFv。在特定实施例中，所述抗βS珠蛋白抗体或其抗原结合片段包括如SEQIDNO:1-3中的任一个所示的一个或多个轻链CDR和/或如SEQIDNO:4-6中的任一个所示的一个或多个重链CDR。在一些实施例中，所述抗βS珠蛋白抗体或其抗原结合片段包括如SEQIDNO:7中所示的可变轻链序列和/或如SEQIDNO:8中所示的可变重链序列。在各个实施例中，一种缀合物包括本文所设想的抗βS珠蛋白抗体或其抗原结合片段以及用于检测的装置。在各个实施例中，一种缀合物包括本文所设想的抗βS珠蛋白抗体或其抗原结合片段以及检测装置。在各个实施例中，一种缀合物包括本文所设想的抗βS珠蛋白抗体或其抗原结合片段以及可检测标记。在一些实施例中，所述可检测标记选自由以下组成的组：半抗原、荧光染料、荧光蛋白、发色团、金属离子、金颗粒、银颗粒、磁性颗粒、多肽、酶、发光化合物或寡核苷酸。在特定实施例中，所述可检测标记是选自由以下组成的组的荧光染料：OregonPacificBlueTM、PacificOrangeTM、PacificGreenTM、CascadeBlueTM、CascadeYellowTM、LuciferYellowTM、MarinaBlueTM和Texas(TxRed)。在某些实施例中，所述可检测标记是选自由以下组成的组的(AF)染料：AF350、AF405、AF488、AF500、AF514、AF532、AF546、AF555、AF568、AF594、AF610、AF633、AF635、AF647、AF680、AF700、AF710、AF750、AF790和AF800。在一些实施例中，所述可检测标记是选自由以下组成的组的525、565、585、605、655、705和800。在特定实施例中，所述可检测标记是选自由以下组成的组的DyLightTM染料(DL)：DL549、DL649、DL680和DL800。在某些实施例中，所述可检测标记是选自由以下组成的组的半抗原：荧光素或其衍生物、异硫氰酸荧光素、羧基荧光素、二氯三嗪基胺荧光素、地高辛、二硝基苯酚(DNP)、三硝基苯酚(TNP)和生物素。在特定实施例中，所述可检测标记是选自由以下组成的组的Cy染料：Cy2、Cy3、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7和Cy7.5。在一些实施例中，所述可检测标记是选自由以下组成的组的荧光分子：藻红蛋白(PE，R-藻红蛋白(RPE))、B-藻红蛋白(BPE)、多甲藻素叶绿素(PerCP)、别藻蓝蛋白(APC)和C-藻蓝蛋白。在特定实施例中，所述可检测标记是选自由以下组成的组的荧光染料：Atto390、Atto425、Atto465、Atto488、Atto495、Atto514Atto520、Atto532、Atto550、Atto565、Atto590、Atto594、Atto610、Atto620、Atto633、Atto647、Atto655、Atto665、Atto680、Atto700、Atto725、Atto740、SuperBrightTM436、SuperBrightTM600、SuperBrightTM645、SuperBrightTM702、SuperBrightTM780、BrilliantTMViolet421、BrilliantTMViolet480、BrilliantTMViolet510、BrilliantTMViolet605、BrilliantVioletTM650、BrilliantVioletTM711、BrilliantVioletTM786、BrilliantTMUltraviolet395(BUV395)、BrilliantTMUltraviolet496(BUV496)、BrilliantTMUltraviolet563(BUV563)、BrilliantTMUltraviolet661(BUV661)、BrilliantTMUltraviolet737(BUV737)、BrilliantTMUltraviolet805(BUV805)、Brilliant本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种结合人β

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171215 US 62/599,2601.一种结合人βS珠蛋白多肽的抗βS珠蛋白抗体或其抗原结合片段，其中所述抗βS珠蛋白抗体或其抗原结合片段包括包含SEQIDNO:1-3中的任一个所示的轻链CDR(CDRL1-CDRL3)的轻链可变区和包含SEQIDNO:4-6中的任一个所示的重链CDR(CDRH1-CDRH3)的重链可变区。


2.根据权利要求1所述的抗βS珠蛋白抗体或其抗原结合片段，其中所述抗βS珠蛋白抗体或其抗原结合片段包括包含SEQIDNO:1中所示的轻链CDR(CDRL1-CDRL3)的轻链可变区和包含SEQIDNO:4中所示的重链CDR(CDRH1-CDRH3)的重链可变区。


3.根据权利要求1所述的抗βS珠蛋白抗体或其抗原结合片段，其中所述抗βS珠蛋白抗体或其抗原结合片段包括包含SEQIDNO:2中所示的轻链CDR(CDRL1-CDRL3)的轻链可变区和包含SEQIDNO:5中所示的重链CDR(CDRH1-CDRH3)的重链可变区。


4.根据权利要求1所述的抗βS珠蛋白抗体或其抗原结合片段，其中所述抗βS珠蛋白抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：奥利维尔·尼格拉，
申请(专利权)人：蓝鸟生物公司，
类型：发明
国别省市：美国;US