【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及肿瘤细胞分析检测领域，尤其涉及运用流式细胞术检测肿瘤细胞蛋白的 表达。技术背景目前，在实体肿瘤研究中，由肿瘤组织块制备的单细胞通常全部视为肿瘤细胞进行 测定和研究，当需要做患者自身肿瘤细胞与正常细胞比对时，常需要另外采集正常组织 细胞，这涉及患者意愿、多部门配合、样品存储运输等系列问题，往往不易完善；在比 较肿瘤细胞与正常细胞的蛋白表达水平时，则要在不同的试管中分别检测、分别分析。事实上在肿瘤组织中除大量的肿瘤细胞外还含有血细胞、血管内皮细胞等正常细 胞。如果能用合适的标记抗体加以区分，就可以在一个试管中完成不同细胞的某种蛋白 表达水平测定，达到同步检测、同步分析、互相比较的目的。流式细胞术是借助流式细胞仪通过抗原、抗体反应和荧光标记法完成对细胞各种特 性进行定性定量的一种分析技术。其原理是将悬浮在液流中的单细胞逐个通过测量区， 用仪器检测细胞的光学参数而达到快速、大量地测定细胞的一系列物理特性和生化特 性。 '
技术实现思路
专利技术目的本专利技术所要解决的技术问题是提供一种采用流式细胞术检测肿瘤中细胞 蛋白表达的方法，可满足同步测定多种细胞(...
【技术保护点】
一种流式细胞术同步检测肿瘤中多种细胞蛋白表达的方法，其特征在于该方法包括以下步骤： （１）将新鲜的肿瘤组织制备成单细胞悬液； （２）调节单细胞悬液浓度为±１０↑［６］细胞／１００μｌ； （３）在一个试管中加入步骤（２）得到的单细胞悬液，分别按荧光标记抗体的试剂说明的配比浓度加入能够区分不同待测细胞的荧光标记抗体５－２０μｌ，充分混匀，室温避光反应１５～４５分钟； （４）在上述试管中，加入待测蛋白的抗体，充分混匀，室温避光反应１５～４５分钟； （５）离心去除上清液，以清除未结合的荧光标记抗体； （６）悬浮细胞后上流式细胞仪检测、分析多种细胞的蛋白表达。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：沈宗丽，朱月清，吴晓柳，
申请(专利权)人：江苏省肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：84[]
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