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血清蛋白电泳琼脂糖凝胶板及其制作方法技术

技术编号:2577876 阅读:719 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一种血清蛋白电泳琼脂糖凝胶板及其制作方法,凝胶板为两层,底层为亲水性塑料板,上层为琼脂糖胶。琼脂糖胶由琼脂糖、巴比妥、巴比妥钠、乳酸钙、三羟甲基氨基甲烷、乙二胺四乙酸二钠、硼酸配制而成。其制作方法是:把琼脂糖胶配好放在容器内,在水浴锅内加热,待全部溶解后保持恒温,把胎具置于恒温加热板上,用吸液器吸出足够量的琼脂糖胶,加压挤在胎具内,把浇满琼脂糖胶的胎具放在阶梯冷却恒温板上,慢慢冷却凝成半干式状态后,把胎具打开,把铺好的凝胶板放在盒内封好。本发明专利技术是干式平板电泳仪最佳的配套试剂,不仅一致性好,且使用方便,即拆即用,节省时间,电泳分离区带清晰准确,分辨率好,精度高,使用寿命长。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种,它是 在做血清蛋白干式电泳时所使用的载体,属体外诊断试剂。
技术介绍
传统的手工电泳方法是在电泳槽内加缓冲液,用醋酸纤维素膜作 载体,用手工将血清加在载体上,然后接通电源,开始电泳,它的缺 点是①操作起来很麻烦,做一次电泳标本,需一个人忙七、八个小时才能完成;②电泳质量不高,分辨率低,区带不明显且歪歪扭扭, 精度差,又不能长期保存;③数据处理麻烦,电泳完了用剪刀把每条 区带剪开,分头在一种专用溶液里进行洗脱,把洗下来的液体在比色 计上进行比色,换算成百分比,这种方法非常不准确,而且计算起来 也特别麻烦;④手工点样无法控制它的点样量,点样存在不一致性, 电泳区带不在一条线上,且电泳出来的区带是歪歪扭扭的。其实电泳 分离技术能为临床诊断提供重要依据,但由于方法落后,操作复杂, 质量不高,提供的数据不准确,使医院逐渐不开展电泳分离技术,阻 碍了这门学科的发展。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种使用方便,节省时间,分离区带清晰 准确,分辨率高,保存期长的,可用于血清蛋白干式电泳分离时作载 体用的琼脂糖凝胶板及其制作方法。本专利技术的目的是由如下技术方案实现的,琼脂糖凝胶板为两层结 构,底层为亲水性塑料板,上层为琼脂糖胶,两层之间用无化学反应 透明胶粘合。琼脂糖胶的配方如下-巴比妥(C8H12N203) 1 4克巴比妥钠(C8H N2Na03) 10~15克 乳酸钙(C6H1()Ca06 5H20) 0.3 ~ 1.5克三羟甲基氨基甲垸(C4H N03) 10 14克乙二胺四乙酸二钠(C1()H14N2Na208 2H20) 1.9 ~ 3克 硼酸(H3B03) 1.5 2.5克将上述六种组分按配比溶入1000毫升蒸馏水中配制成溶液 琼脂糖 每100毫升上述溶液中含0.5 ~ 2.0克其制作方法包括以下步骤① 先将巴比妥、巴比妥钠、乳酸钙、三羟甲基氨基甲烷、乙二 胺四乙酸二钠、硼酸按上述配比溶入蒸馏水中,搅拌均匀,充分溶解, 配制成溶液;再按上述相应的配比放入琼脂糖搅拌,将盛放上述混合 溶液的容器,放在水浴锅内加热,保湿保温,待琼脂糖全部溶解后保 持在70°C-85。C恒温;② 将亲水性塑料板上表面中央位置涂上无化学反应透明胶,四 周留3毫米左右的边框不涂胶,然后置于胎具的底模板上,再将上模 板扣上,用定位销固定。③ 将固定好的胎具放在恒温加热板上,温度恒在50-65°C; 倒胶,用专用吸液器吸出足够量的琼脂糖胶,加压挤在胎具 内,在压力的作用下,琼脂糖胶能顺畅排净胎具内的气体而充满胎具 空间;⑤把浇满琼脂糖胶的胎具放在阶梯冷却恒温板上,慢慢的平稳 冷却,使琼脂糖胶慢慢凝成半干式状态; 20分钟后用专用工具把胎具打开,把铺好的凝胶板进行检验, 完好无损即可放在盒内封好,再用铝塑袋密封。所述制作方法步骤④中所用的压力,只是用手挤压的压力。所述凝胶板厚度在0.3 0.9毫米,且均匀不能出现凹凸不平现象, 不能厚薄不均匀,如果出现上述现象就无法保证电泳区带的质量。故 对表面平整性、均匀性要求很严格。凝胶板一般为正方形,也可为长 方形,上层琼脂糖胶比底层亲水性塑料板四周均小3毫米左右。所述无化学反应的透明胶可为明胶或猪皮胶等。所用胎具可拆装,当亲水性塑料板置于胎具底模板时,亲水性塑 料板已涂有无化学反应的透明胶,因此,当琼脂糖胶占满胎具空间 时,其底部即与亲水性塑料板粘合成一体。成型胎具出气孔要开的合理科学,不产生死角,使液态琼脂糖胶 能很均匀的把气排出去,从而使琼脂糖胶薄层流的也就很均匀。专利技术原理人血液中含有一百多种蛋白质,各组分含量有着各自 不同的功能,并且在不同的病理条件下会出现各种不同的特定的变化 量,从而来判断不同的病因。自从Tiselies界面移动电泳的创立和随 后出现区带电泳的使用及自动电泳仪的问世以来,蛋白电泳技术获得极大进展,血清蛋白电泳在检验医学具有重要价值。血清蛋白质属两性电解质,当溶液的PH值大于蛋白质等电点时 蛋白质带阴电荷,在电场作用下,电泳时向阳极移动。以琼脂糖凝胶 板作为载体,由于蛋白质所带净电荷数量等电点和分子量的差别在电 泳时产生不同的迁移率,使血清蛋白分离出五条区带,即白蛋白、 al球蛋白、a2球蛋白、3球蛋白和Y球蛋白,这些蛋白组分的相 对比值为某些疾病的诊断和预后提供有价值的临床依据。本专利技术必须处于半干式状态中才能在电场作用下泳出好电泳区 带片子,泳出清晰度高的区带,所以必须密封包装,使用时才可打开。 本专利技术是放在干式平板电泳仪的电泳平板上使用。本专利技术的优点是1、 表面平整,厚薄均匀,厚度仅在0.3 0.9毫米。2、 它是干式平板电泳仪最佳的配套试剂,不仅使用寿命长,一 致性好,而且使用方便,即拆即用,不需自己制作,节省时间,分离 区带清晰准确,分辨率高。3、 提供的数据准确,能为临床诊断提供重要依据。 附图说明图1为血清蛋白电泳琼脂糖凝胶板俯平面结构示意图 图2为图1的A-A剖面图 图3为胎具结构示意图图中l.亲水性塑料板,2.琼脂糖胶,3.底模板,4.上模板,5.定 位销,6.挤胶孔,7.出气孔;箭头分别为挤胶方向和出气方向。具体实施例方式实施例1本实施例所述的琼脂糖凝胶板为两层结构,底层为亲水性塑料板1,上层为琼脂糖胶2,两层之间用无化学反应透明胶粘合。琼脂糖胶2的配方如下巴比妥(C8H12N203) 1克巴比妥钠(C8H N2Na03) 12克乳酸钙(C6H1()Ca06 5H20) 1.5克三羟甲基氨基甲垸(C4H N03) 10克 乙二胺四乙酸二钠(C1QH14N2Na208 2H20) 2.4克硼酸(H3B03) 2.5克将上述六种组分按配比溶入1000毫升蒸馏水中配制成溶液 琼脂糖 每100毫升上述溶液中含0.5克其制作方法包括以下步骤-① 先将巴比妥、巴比妥钠、乳酸钙、三羟甲基氨基甲烷、乙二 胺四乙酸二钠、硼酸按上述配比溶入蒸馏水中,搅拌均匀,充分溶解, 配制成溶液;再按上述相应的配比放入琼脂糖搅拌,将盛放上述混合 溶液的容器,放在水浴锅内加热,保湿保温,待琼脂糖全部溶解后保 持在7(TC-85。C恒温;② 将亲水性塑料板上表面中央位置涂上无化学反应透明胶,四 周留3毫米左右的边框不涂胶,然后置于胎具的底模板上,再将上模 板扣上,用定位销固定。③将固定好的胎具放在恒温加热板上,温度恒在50-65°C; 倒胶,用专用吸液器吸出足够量的琼脂糖胶,加压挤在胎具 内,在压力的作用下,琼脂糖胶能顺畅排净胎具内的气体而充满胎具 空间; 把浇满琼脂糖胶的胎具放在阶梯冷却恒温板上,慢慢的平稳 冷却,使琼脂糖胶慢慢凝成半干式状态; 20分钟后用专用工具把胎具打开,把铺好的凝胶板进行检验, 完好无损即可放在盒内封好;再用铝塑袋密封。所述凝胶板为正方形,厚度在0.3 0.9毫米,且厚薄均匀无凹凸 不平现象;上层琼脂糖胶2比底层亲水性塑料板1四周均小3毫米。实施例2:本实施例所述的琼脂糖凝胶板为两层结构,底层为亲水性塑料板 1,上层为琼脂糖胶2,两层之间用无化学反应透明胶粘合。琼脂糖胶2的配方如下巴比妥(C8H12N203) 3克巴比妥钠(CgH,,N2NaCb) 15克乳酸钙(C6H1GCa06 5H20) 0.3克三羟甲基氨基甲烷(C4H 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种血清蛋白电泳琼脂糖凝胶板,其特征在于:凝胶板为两层结构,底层为亲水性塑料板(1),上层为琼脂糖胶(2),两层之间用无化学反应透明胶粘合。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:姜尚武张连祥刘晨梅郭绍丽蔡忠王兆成
申请(专利权)人:姜尚武张连祥刘晨梅
类型:发明
国别省市:11[中国|北京]

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