用于二维（2D）凝胶电泳的系统技术方案

本发明专利技术涉及一种用于二维凝胶电泳的系统，其特征在于在电泳的至少一维上，其功能核心部件基本由可丽耐材料形成。而且，至少一个电极优选被设计成在第一维上是可移动形式的，从而它能够适应不同的凝胶长度。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种用于二维凝胶电泳的系统，其中在电泳的至少一维上，其 功能核心部件基本由可丽耐(Corian)材料形成。而且，至少一个电极优选被 设计成在第一维上是可移动形式的，以至于它能够适应不同的凝胶长度。技术背景作为一种有效而温和的方法，现有技术的电泳被用于例如蛋白质和氨基酸 的分离，也用于整个细胞的分离。它利用了荷电粒子在电场中的不同偏差来实 现分离效果。偏差度主要受两个电极间的场强度和被分离粒子的电迁移率的影 响。迁移率的水平依赖于各种数量，例如被分离粒子的电荷和大小、以及pH 值、緩沖液的粘性和离子强度。聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)这一传统一维 方法能够从单一样品中最多分离约100种蛋白质，由于这种原因，它们不适合 分析例如涉及细胞提取物的复杂蛋白质混合物。现今，二维电泳是分离复杂蛋白质混合物最有效的技术。它根据二个不同 参数来分离蛋白质，即等电点(第一维中的等电点pl)和电泳迁移率(第二维 中)。2D电泳具有多种用途。因此，例如，分析不同的有机体和细胞类型中的 蛋白质特性。分析蛋白质分段的纯度，并测定等电点，亚单元(subunits)的 分子量和异构数量。为复杂蛋白混合物的分离提供最佳分辨率的二维凝胶电泳 系统中，它将在第一维中存在尿素和中性洗涤剂情况下的等电聚焦(im7)与 在第二维中用十二烷基硫酸钠(SI)S)改性的条件下的平板凝胶电泳相结合 (O，Farrell， P.II. (1975), J. Biol. Chem. 250， 4007-4021 )。分离系统使用两个独 立的蛋白质特性 一个是由等电点(pl)反映的电荷，另外一个是决定十二烷 基疏酸钠-蛋白质复合物(SDS-protein complexes )在聚丙烯酰胺凝胶中迁移 率的分子量。O，l'，arrcll已经首次论证了该技术的巨大潜力，它能够在细胞的提 取物中分辨超过l，OOO种蛋白质u但是，在使用两性电解质载体的等电聚焦/ 十二烷I^5克酸钠(HiF/SDS)系统中，碱性蛋白质就会通常因为它迁移到等电聚焦凝胶的能力差而分离的不够充分。即使使用更多种碱性两性电解质，在碱性范围的pH梯度的i 争度也变小了，因为由于阴极偏移，在pH7.5以上时梯度的 上升不明显。此外，在这样的条件下少量碱性蛋白质进入等电聚焦凝胶中总是 导致条紋的产生。但是，就如O，Farrcll所描述的，这个问题能够通过在第一 维中使用非均衡p〖I梯度电泳(NI':PIIGIO来避免。非均衡pH梯度电泳和等电聚焦的主要区别是前者的样品被应用到凝胶 的酸性一侧并且其电压x时间的乘积比等电聚焦中的该值小。在这种情况下， pH梯度不会达到充分均衡。结果，蛋白质不会像等电聚焦中那样完全集中在 它们的等电点。然而，绝大多数蛋白质还是根据在非均衡pH梯度电泳凝胶中 不同的电荷而净皮分离。用在二维电泳中的所熟知的系统有许多缺点考虑到安全性，第一维没有 受到充分的保护来防止所使用高电压的影响；此夕卜，许多系统被要求能够适应 不同的凝胶长度，而且，用于第二维的设备不易搬运；例如，它们不是可叠起 堆放的，因此具有高度的空间要求，并消耗一些化学药品。
技术实现思路
本专利技术通过根据权利要求所述的系统方式来解决这个问题。 在用于二维凝胶电泳的本专利技术的系统中，至少一个功能核心部件基本上由可丽耐材料形成。例如，功能核心部件可以是在第二维中凝胶位于其上的平板。 可丽耐材料中可以具有能提供冷却系统的钻孔洞。这样，该系统能够采用一种 更紧凑的设计。更具体地，用于第二维的设备能够水平堆叠和消耗较少的化学 药品。该系统包括分别用于第 一维和第二维电泳的至少两个部件、以及第 一维和 第二维凝胶电泳，其中，第一维包括一能够适合不同凝胶长度的电极，并且第 一维被树脂玻璃制成的外壳体包围，该外壳体包括至少一扇具有一个用于电路 的常开触点(NO触点)的门，并且其中第二维凝胶电泳基本由可丽耐材料制 成。这种系统优点在于当打开一扇门或多扇门时，电路被中断，并且当锁上 多扇门时电路净皮关闭。例如，通过门上的一个触点以及i殳备底部的相应触点产 生的电路中断、能够被设计成用于第一维。在一个优选方式中，材料是可丽耐雪白系列(Corian Glacier White )。在本专利技术的一个优选实施方式中，第一维中的至少一个电极位于接触臂上 的可移动支架上。本专利技术也涉及可丽耐在用于制造凝胶电泳系统、特别是用于制造功能部件 中的用途。这种材料的优点是具有延展性、易成型性、以及因而可成型性为例 如具有空腔和沟槽的部件，从而能够被用于冷却的目的，这些只是举例说明而 并非穷举。大量的系统通常使用人们所熟知的无韧性玻璃。用于在第一维和第二维上运行电泳的以上所述的两个部件是单独的电泳 单元。因此，根据本专利技术，用于运行二维凝胶电泳之第一维的电泳单元也是本 专利技术一个内容，其包括一能够适合不同凝胶长度的电极、第一维被树脂玻璃制 成的外壳体所包围，并且该外壳体包括至少一扇具有一个用于电路的常开触点 的门。本专利技术也涉及一用于运行二维凝胶电泳之第二维的附加电泳单元，其基本 由可丽耐材料制造。由于可任意地集成具有冷却功能的平板设计，它能够水平 堆叠，因此节省大范围的空间，其设置在狭窄的实验室中具有显著地优点。同 时，大范围减少了化学药品的消耗。下面参考一个例子来解释本专利技术，但并非是对本专利技术的限制。 附图说明图1:.具有树脂玻璃外壳的用于第一维的设备； 图2:接触臂(第一维)； 图3:电'泳单元； 图4:第二维的前视图； 图5:第二维的后视图(开放式)； 图6:第二维的后视图(封闭式)； 图7:第二维的侧视图。 附图标记列表1)用于第一维的设备3)外壳，优选由树脂玻璃制造5)门7)把手9)底部11) 电极12) 下部电扨_13) 上部电极 15)支架17) 接触臂18) 电泳单元19) 上部接触点 21 )下部接触点23)用于第二维的装置 25)功能核心部件 27)冷却部分 29)容器具体实施方式图1显示了用于运行第一维凝胶电泳的设备/电泳腔室(1)。更具体地， 在第一维上运行凝胶电泳的设备(1 )具有一个优选由树脂玻璃制成的外壳(3)。 设备(1)的外壳(3)优选被设计成存在两个门(5)。用把手(7)打开门(5)， 从而将门上的一个触点(未示出)与设备(1)底部(9)上的相应触点(未示 出)隔开。因此，当打开门(5)时电路断开，关闭门(5)时电路闭合。图l也显示了设备(1)的二个电极(11)，电极(13)设置在支架(15) 上，该支架能够在接触臂(17)上垂直地上下运动。根据凝胶的大小，可以将 接触臂(17)和电极(13 )调节成利用一个电极以及相同的设备(1)即可 使用不同大小的凝胶。图2显示了不具有外壳(3)的设备(1)。省略外壳(3),从而可以看见 其上设置有上部电极(13 )的支架(15 )的设计。如图3所示，螺栓(19)用 来更好的使电泳单元定位，从而电泳单元和下部电极(12)的接触方式使得上 部电极(13) —与上部接触点接触且门(5)被闭合，则电路就被关闭。图3显示了上述具冇上部接触点(19)和下部接触点(21)的电泳单元。 充满凝胶或緩沖液的电泳单元产生了 一导电设置，其中通过施加电流来分离其中的生物分子。电泳单本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于二维凝胶电泳的系统，其特征在于在电泳的至少一维中，功能核心部件基本上由可丽耐材料制造。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：托马斯珀尔，
申请(专利权)人：维塔有限公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]