荧光标记益生菌菌液及分析益生菌在肠道内吸附、定植状况的方法技术

本发明专利技术公开一种荧光标记益生菌菌液，是将益生菌按０．２～２０％接种量接种于初始ｐＨ５．５～８．５的液体ＭＲＳ培养基中，于３０～４５℃振荡培养至对数生长期；使用高速冷冻离心机２～１０℃、５０００～１５０００ｒｐｍ离心２～２０ｍｉｎ，去掉上清液，用ｐＨ５．５～８．５ＰＢＳ洗涤３次后，重新悬浮，使浓度达到１０↑［６－９］ＣＦＵ／ｍｌ；将ｂ步骤所得菌液与溶解于０．０１～０．５ｍｏｌ／ｌＮａ↓［２］ＣＯ↓［３］和０．０５～０．２５ｍｏｌ／１Ｎａｃｌ缓冲液中的荧光标记物溶液混合，荧光标记物的浓度是０．５～５ｍｇ／ｍｌ，菌液与荧光标记物溶液体积比为５～２０∶１，４℃标记０．５～３ｈ后用ｐＨ５．５～８．５ＰＢＳ洗涤３次，重新悬浮，使浓度达到１０↑［６－９］ＣＦＵ／ｍｌ。利用荧光标记物标记益生菌，通过跟踪监测荧光标记益生菌在肉鸡消化道各段的情况，以准确地确定益生菌在动物消化道各段的吸附、定植状况。

【技术实现步骤摘要】

-本专利技术涉及一种操作简单、形象生动、能准确地描述益生菌在动物肠道内 吸附、定植状况的荧光标记益生菌菌液及用荧光标记益生菌菌液分析益生菌在 肠道内吸附、定植状况的方法。
技术介绍
-益生菌是一类来源于自然界和健康动物肠道的微生物，通过分泌、产生短 链脂肪酸、H202和细菌素等物质，对病原微生物具有显著的抑制和杀灭作用，从而具有对动物肠道菌群的调节功能；同时，能分泌B簇维生素、氨基酸和多 种消化酶类，可促进动物肠绒毛的发育、促进营养物质的消化和吸收、加快动 物生长，达到了替代饲用抗生素的目的；另外，益生菌还具有剌激和激活免疫 细胞活性、调节免疫功能的作用。随着人们对食品安全越来越重视，益生菌作为动物饲料添加剂也越来越受 到人们的关注，上述益生菌对动物的作用效果与其在动物肠道内的生长、繁殖 有着直接关系，即益生菌在动物肠道内吸附、定植状况是确保益生菌发挥作用 的主要因素之一。多年来，人们对益生菌的研究从未间断，使益生菌从理论到 实际应用都有了较快的发展。但迄今为止，对于益生菌在肠道中如何吸附、定 植的机理研究及排泄过程的研究等一直无法客观评价，绝大多数采用体外上皮 细胞吸附试验进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种荧光标记益生菌菌液，其特征在于由下述方法制成：　　　　ａ．将益生菌按０．２～２０％接种量接种于初始ｐＨ５．５～８．５的液体ＭＲＳ培养基中，于３０～４５℃振荡培养至对数生长期；　　　　ｂ．使用高速冷冻离心机２～１０℃、５０００～１５０００ｒｐｍ离心２～２０ｍｉｎ，去掉上清液，用ｐＨ５．５～８．５ＰＢＳ洗涤３次后，重新悬浮，使浓度达到１０↑［６－９］ＣＦＵ／ｍｌ；　　　　ｃ．将ｂ步骤所得菌液与溶解于０．０１～０．５ｍｏｌ／ｌＮａ↓［２］ＣＯ↓［３］和０．０５～０．２５ｍｏｌ／ｌＮａｃｌ缓冲液中荧光标记物溶液混合，荧光标记物的浓度是０．５～５ｍｇ／ｍｌ，菌液与荧光标记物溶液体积比为５～２０∶１，...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：江国托，
申请(专利权)人：大连三仪动物药品有限公司，
类型：发明
国别省市：91[中国|大连]