一种分析糖蛋白的方法技术

一种分析糖蛋白的方法，其首先配制点样缓冲溶液、点制芯片、封闭、清洗、干燥后，得凝集素芯片。将生物样品直接加在凝集素芯片上，进行孵育、清洗去除杂蛋白、形成晶体、解离晶体，用飞行时间质谱仪检测荷电离子在真空电场中飞行的时间，得到糖蛋白图谱信息，直观显示被测生物样品中分子量、丰度等糖蛋白信息，鉴定糖蛋白差异表达。将被测生物样品的糖蛋白图谱信息与样本图谱信息进行比照，得到差异表达的糖蛋白信息。本发明专利技术解决了背景技术中检测通量低，检测步骤繁琐，周期长的技术问题。本发明专利技术操作简便，灵敏度高，重复性好，适合于医学临床的快速分析应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种分冊唐蛋白的方法，具体是一种翻 驗素芯片，结錄面增强激 光解析离子化飞行时间质谱技术对糖蛋白进行检测和鉴定的方法。
技术介绍
糖类化合物是生物体维持生命活动所需育糧的主要来源，是生物体合皿它化合物 的基本原料，是充当生物体的结构原料，是涉及生命活动本质的生物大^T之一。糖类具有多个羟基，W^又有a、 p构型之分，单瞎的连接可能产生数目很大的异构体， 因此，IH连结构蕴含十分丰富的生物语言信息，是高密度的信息载体。细胞是生物体的 基本单位，禾中类繁多的细胞形成各种组织，所有细胞表面均SM着一层禾BI。糖连和蛋 白质构成的共价复合物，即糖基化蛋白，简称糖蛋白。蛋白质糖基化是一种重要的翻译 后修饰，约有一半以上的蛋白质是发生糖基化的。糖基化作为一种主要的翻译后傲布对蛋白质的结构和功能有着重要影响，如对蛋白质的折叠、运输、定位等。在许多生物过程中蛋白质糖基化起着重要的作用，如免疫保护、病毒的复制、细胞生长、细胞与细 胞之间的黏附、炎症的产生等。许多蛋白都发现有糖基化这种翻译后i針妨式。如转录因子、核小孔蛋白、热休克蛋白、RNA聚合酶II、致癌基因翻译产物、酶等。许多疾病本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分析糖蛋白的方法，该方法的实现步骤包括：　　　　（１）制备凝集素芯片：　　　　（１．１）点制芯片：将各类凝集素或糖结合蛋白溶于点样缓冲液中，制成１～５ｍｇ／ｍＬ的点样缓冲液；用芯片点样仪将点样缓冲液点制于衍生化的固相载体上；于２５～６０℃温育１２小时，得凝集素芯片；　　　　（１．２）封闭：用封闭缓冲液对凝集素芯片进行１～２小时封闭；　　　　（１．３）保存：用超纯水清洗凝集素芯片，离心干燥后，于４℃干燥保存；　　　　（２）加载生物样品：　　　　（２．１）将被测生物样品直接加至凝集素芯片上；　　　　（２．２）孵育０．５～２小时，糖蛋白糖链通过与凝集素的特异识别结合到凝集素芯片上；生物样品中的特...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李铮，陈超，简强，王婷，孙士生，王芬，
申请(专利权)人：陕西北美基因股份有限公司，
类型：发明
国别省市：87[中国|西安]